一种卡非佐米纳米混悬剂的制备工艺的制作方法

本发明涉及医药，具体涉及一种卡非佐米纳米混悬剂的制备工艺。

背景技术：

1、卡非佐米是一种环氧甲酮四肽蛋白酶体抑制剂类似物，其作用是通过结合20s蛋白酶体的苏氨酸活性位点的n-末端，抑制20s蛋白酶体的糜蛋白酶，从而抑制细胞生长。卡非佐米和20s蛋白酶体的糜蛋白酶是不可逆结合，同时卡非佐米还可以抑制胰蛋白酶和类半酰天冬酶，其疗效和耐受性都超过硼替佐米。2012年7月20日，美国食品与药物监督管理局（fda）批准卡非佐米用于多发性骨髓瘤患者的治疗。

2、虽然卡非佐米具有良好的抗肿瘤作用，但是其水溶性较差。为了解决卡非佐米的水溶性问题，目前上市的卡非佐米注射用均使用磺丁基倍他环糊精钠作为增溶剂。虽然环糊精提高了卡非佐米的水溶性，但是环糊精的用量大（卡非佐米：磺丁基倍他环糊精=1:16.6（摩尔比）），卡非佐米的载药量很低，不足2%。因此卡非佐米在临床使用时，会使大量的环糊精进入人体，增加肾脏负担，造成细胞伤害，长期使用可能造成静脉痉挛和静脉炎。此外，卡非佐米在水性介质溶液中非常不稳定，室温条件下最多稳定4小时，这对临床使用是一个挑战。

3、因此，目前上市的卡非佐米注射液在治疗多发性骨髓瘤方面有着较好的效果，但是，其水溶性差的特征给临床应用带来了安全性问题。

4、cn105497871a公开了一种卡非佐米药物的脂质体冻干组合物，其按重量份计算，包括以下组分：卡非佐米5~20份；抗氧化剂0.1~1份；ph值调节剂1~5份；磷脂类40~100份；胆固醇5~20份；冻干保护剂5~25份。制备方法包括步骤：1)制备多室脂质体混悬液；2)制备单室脂质体；3)制备卡非佐米脂质体冻干粉。该卡非佐米药物的冻干组合物为脂质体，药物被包裹在磷脂膜上，磷脂是载体，制备方法采用薄膜分散法，适合小试，工业放大困难，难以推广应用。

技术实现思路

1、为解决以上技术问题，本发明提供了一种卡非佐米纳米混悬剂的制备工艺，不使用环糊精，将卡非佐米制备成纳米级的粒子，提高卡非佐米的溶解度和稳定性。

2、为了实现本发明的目的，本发明采用的技术方案是：

3、一种卡非佐米纳米混悬剂的制备工艺，包括以下步骤：

4、a、将卡非佐米溶解在有机溶剂中，作为有机相，卡非佐米在有机相中的浓度范围为1%~20%(w/v)；

5、将稳定剂溶解在水中，作为水相，所述稳定剂在水相中的浓度范围为0%~10%（w/v）；

6、水相可以采用纯水。没有稳定剂的存在，对材质相容性、滤器相容性的挑战较小，同时冻干工艺相对简单，但纳米粒稳定时间较短，对后续工艺时限要求较高。

7、b、 将所述有机相和水相采用t型混合、y型混合或者微流控的混合方式混合，得到混悬液；

8、c、 用稀释液和所述混悬液混合并搅拌均匀，得到纳米混悬液，所述稀释液的溶剂为水，溶质为稳定剂和/或冻干保护剂，溶质的浓度为0-20%（w/v）；

9、d、 去除纳米混悬液中的有机溶剂；

10、通过高压均质或微射流的方式对所述纳米混悬液进行处理；

11、e、再经除菌过滤、冷冻干燥，得到冻干制剂。

12、本发明采用有机相和水相混合的方式制备卡非佐米纳米混悬剂，随后用预先配制的稀释液进行稀释，以增加纳米混悬剂的稳定性。这是由于有机溶剂会影响油水混合制备纳米粒时纳米粒的形态和大小，且制备后有机相的存在会影响纳米粒的稳定性，无论是去除有机相还是控制粒径，工艺的时间都比较长，为了保持工艺过程中纳米粒的稳定性，本发明在配制得到混悬液后增加稀释工序以降低有机相的浓度，减少有机相对纳米粒的影响。然后再去除有机相，并通过高压均质或微射流的方式控制纳米粒的粒径，除菌过滤后冻干，得到注射用卡非佐米纳米混悬剂。

13、有机相在注入水相的过程中，混合液的油水比一直在变化，导致纳米粒晶核成型的环境发生变化，最终得到的纳米粒粒径分布宽，晶体差异大，工艺重现性差，这种问题在工艺放大的过程中尤为明显。为了解决这个问题，本发明使用t型、y型、微流控等方式混合有机相和水相，在混合过程中，药物浓度过饱和而析出结晶。由于有机相和水相的混合流速不变，在混合过程中的油水比始终保持不变，纳米晶核的形成环境相同，最终得到的纳米粒粒径分布较窄，晶体差异小，粒径可控，且粒径分布更均匀，工艺重现性好，支持线性放大，降低工艺放大的难度。

14、本发明所述稳定剂选自泊洛沙姆、聚乙二醇、羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮中的一种或者多种。稳定剂起稳定纳米晶体的作用，使纳米晶体在储存过程中不发生聚集，保持稳定的尺寸。

15、本发明所述有机溶剂选自乙醇、甲醇、叔丁醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、二甲基亚砜、乙腈、丙酮，n,n-二甲基甲酰胺中的一种或者多种。

16、优选地，所述有机溶剂选自乙醇、甲醇、叔丁醇和二甲基亚砜中的一种或者多种。

17、本发明的冻干保护剂选自葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、海藻糖、麦芽糖、白蛋白、组氨酸、甘氨酸、精氨酸和赖氨酸中的一种或者多种。冻干保护剂的作用是在纳米混悬剂的冻干过程中对纳米粒进行保护，提高纳米混悬剂的稳定性。

18、本发明所述有机相和水相通过各自的管路以一定流速输送至混合器中，有机相和水相的流速比为1:1~1:15，混合体积比为1：0.5-1：20，混合温度为2-8℃。通过控制混合流速、混合温度等参数来调节成核条件，可得到粒径符合需求的纳米药物结晶。

19、本发明所述纳米混悬液和稀释液的比例为1:1～1:5，稀释后有机相的浓度≤2%（w/v）。

20、本发明去除有机溶剂的方式为旋转蒸发、减压蒸发、惰性气体吹扫、鼓泡和超滤中的一种或多种方式的组合。

21、优选地，所述去除有机溶剂的方式为超滤。

22、本发明在除菌过滤前调节所述纳米混悬液的ph值至2.0~6.0。该ph范围内，卡非佐米比较稳定。

23、本发明通过高压均质或微射流处理后得到的纳米混悬剂的平均粒径≤200nm。通过有机相和水相混合制得的混悬液中药物结晶粒径比较大，无法除菌过滤，本发明引入高压均质和微射流，对药液进行整粒的处理，使药物结晶的粒径≤200nm，解决纳米混悬剂难以除菌过滤的问题。

24、本发明的有益效果在于：

25、1、本发明工艺制得的卡非佐米混悬剂不使用环糊精，解决了安全性问题。混悬液中卡非佐米为纳米级的粒子，提高了卡非佐米的溶解度和稳定性，同时，工艺便于控制混悬液中的药物浓度不低于4mg/ml，具有理想的载药量。

26、2、纳米粒子在小试阶段制备时间短，但是工业化生产制备时间长，在工业化生产的过程中为了保证纳米粒的稳定性是一个挑战。本发明在有机相和水相混合后增加稀释步骤，目的是为了降低纳米混悬液中的有机相浓度，在后续的工艺过程中提高纳米粒的稳定性。

27、3、本发明工艺制得的纳米混悬剂在复溶后的卡非佐米粒径为纳米尺寸，纳米级别的粒子能提高卡非佐米的溶解度和溶出速率；提高卡非佐米的稳定性；载药量高，能降低卡非佐米的给药体积，增加生物安全性；通过控制粒径实现被动靶向给药，提高药效，毒副作用降低。