一种鱼腥草注射液及其制备方法与流程

1.本发明涉及鱼腥草注射液技术领域，具体涉及一种鱼腥草注射液及其制备方法。


背景技术：

2.鱼腥草是中药三白草科多年生草本植物蕺菜(howtingria cordata thanb)的全草。现代药学研究表明，其含有葵酰乙醛、月桂醛、菠烯、月桂烯以及甲基正壬酮等挥发性成分。传统医学认为，其茎和叶可以入药，性微寒，味辛，归肺经，具有清热解毒，消肿排毒，利尿通淋之功效，主治肺痈吐脓、痰热咳喘、热痢热淋、痈肿疮毒等。鱼腥草在中医学早已经是传统药物。
3.近年来，人们对于鱼腥草进行了深入的研究，并开发出鱼腥草的注射液剂型。早在上世纪60年代，我国科技人员即开始鱼腥草注射剂的研制，70年代开发成功并上市使用。该药是临床常用抗菌药物，具有不产生抗药性、价格低廉等优点，也是传统中药发展为现代中药制剂的典型。该药在抗病毒、退热等方面疗效可靠、速度快，被称为“中药抗生素”。
4.卫生部标准(ws3-b-3264-98)公开了鱼腥草注射液的制备方法，即“取鲜鱼腥草2000g进行水蒸气蒸馏，收集初馏液2000ml，再进行重蒸馏，收集重蒸馏液约1000ml，加入7g氯化钠及5g聚山梨酯80，混匀，加注射用水使成1000ml，滤过，灌封，灭菌，即得。”鱼腥草注射液因疗效突出而逐渐成为临床抗感染的重要治疗药物。
5.现有技术中对鱼腥草进行水蒸气蒸馏过程中，蒸馏时间过长，导致有效成分分解，影响鱼腥草注射液的制备效率；蒸馏时间短，导致有效成分提取不彻底，造成原料浪费。


技术实现要素：

6.针对现有技术中的上述不足，本发明提供了一种鱼腥草注射液及其制备方法，该方法可有效解决现有的方法存在的鱼腥草注射液制备效率低、有效成分含量低的问题。
7.为实现上述目的，本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：
8.一种鱼腥草注射液的制备方法，包括以下步骤：
9.(1)取洗净的鲜鱼腥草，将其置于液氮中静置，将鱼腥草取出压碎，向其中添加酶溶液，升温至25-33℃静置，然后向其中加水并进行水蒸气蒸馏，收集蒸馏液，将蒸馏液进行重蒸馏，收集重馏液；
10.(2)向重馏液中添加乙醇、氯化钠和聚山梨酯，搅拌至溶解，然后调节溶液ph值为5.0-6.0，过滤、灭菌，制得。
11.上述方案中，将鱼腥草置于液氮中，液氮的超低温度瞬间将鱼腥草进行冷冻，使得鱼腥草细胞内的大液泡迅速凝结成冰晶，大液泡内的挥发油成分迅速凝固，将液氮处理后的鱼腥草中添加酶溶液并升温后，鱼腥草内的冰晶熔化，该过程中液泡涨破，使得液泡内的有效成分溶出，便于后续蒸馏提取；
12.将液氮处理后的鱼腥草置于酶溶液，也可以通过酶将鱼腥草的细胞壁溶解，促使细胞内的有效成分溶出，便于蒸馏提取。本技术中经过液氮和酶溶液处理的鱼腥草的水蒸
气蒸馏时间大大缩短，且产物中有效成分的含量也大大提高。
13.进一步地，鱼腥草于液氮中静置5-10min。
14.上述方案中，将鱼腥草完全置于液氮中静置5-10min，鱼腥草内部的液泡以及组织可实现充分的冷冻，当解冻后，使得鱼腥草的液泡溶胀，鱼腥草的组织结构变的疏松，便于其内部的有效成分溢出。
15.进一步地，压碎后鱼腥草的长度为0.5-1.5cm。
16.上述方案中，液氮处理后的鱼腥草质脆、易碎，将其压碎，可提高后续与酶溶液的接触效果，提高鱼腥草的酶解效果。
17.进一步地，鱼腥草于酶溶液中静置10-20min。
18.上述方案中，鱼腥草在酶溶液中逐渐解冻，并在酶的作用下其组织发生酶解，使得其内部的有效成分溶出。
19.进一步地，酶溶液中含有纤维素酶和果胶酶，纤维素酶的浓度为0.1-0.5g/ml，果胶酶的浓度为0.01-0.1g/ml。
20.进一步地，水蒸气蒸馏过程中溶液中水与鱼腥草的体积质量比为10-15:1。
21.上述方案中，酶解后向其中加水，使得混合溶液中水与鱼腥草保持10-15:1的体积质量比，较大的用水量保证了充分的蒸汽量，便于将鱼腥草挥发油携带溢出，且保证了鱼腥草在水蒸气蒸馏过程中不会出现糊化、局部温度过高的问题，充分保证了鱼腥草有效成分的提取。
22.进一步地，蒸馏液与鱼腥草的体积质量比为1:0.7-1.2。
23.进一步地，重馏液与鱼腥草的体积质量比为1:0.4-0.8。
24.进一步地，鱼腥草注射液中乙醇的体积浓度为10-30％，氯化钠的浓度为6-9g/1000ml，聚山梨酯80的浓度为2-3g/1000ml。
25.上述方案中，通过向最终的重馏液中添加乙醇和聚山梨酯80，可增加挥发油的溶解度，使制得的注射液呈清亮透明，其中在乙醇浓度达到6-9g/1000ml时，可大大降低聚山梨酯80的添加量，降低聚山梨酯80引起副作用。
26.本发明所产生的有益效果为：
27.1、本发明中先将鱼腥草置于液氮中进行冷冻处理，既可以利用冷冻操作改变鱼腥草组织结构，促进后续挥发油成分溶出，又能够利用液氮处理后鱼腥草质脆易碎的特性，实现将鱼腥草压碎，制成鱼腥草颗粒的目的，避免现有技术中通过粉碎操作造成鱼腥草内部挥发油成分蒸发的问题。而且，本技术中利用液氮对鱼香草进行处理，充分促进了鱼腥草内部的挥发油成分溶出，又将低了挥发油与氧气的接触，避免挥发油被氧化，提高了有效成分的提取效率。
28.2、本发明中对液氮冷冻处理后的鱼腥草进行酶解，可进一步促进鱼腥草细胞壁的溶解，提高了细胞内有效成分的溶出，溶出的挥发油在后续水蒸气蒸馏的过程中快速被收集，大大缩短了水蒸气蒸馏的时间，降低了挥发油在高温环境下的停留时间，降低了挥发油的分解、氧化等，也进一步的提高了有效成分的提取。
29.3、本发明中采用液氮冷冻和酶解两种方式对鱼腥草进行前处理，使得鱼腥草中的组织结构发生改变，使得鱼腥草内部的有效成分溢出速率更快，可大大缩短水蒸气蒸馏时间，提高提取效果；而且，前处理过程中鱼腥草的组织结构基本保持完整，不存在暴露于空
气中的问题，也充分避免了有效成分被氧化，提高了有效成分的含量。
具体实施方式
30.实施例1
31.一种鱼腥草注射液，其制备方法包括以下步骤：
32.(1)取洗净的鲜鱼腥草，将其置于液氮中，液氮完全没过鱼腥草，静置10min，将鱼腥草取出压碎成长度为1cm的片段，向其中添加酶溶液，将鱼腥草片段完全浸没，升温至30℃静置15min，然后向其中加水并进行水蒸气蒸馏，水蒸气蒸馏过程中溶液中水与鱼腥草的体积质量比为10:1，收集蒸馏液，约3小时后蒸馏液与鱼腥草的体积质量比达到1:1，将蒸馏液进行重蒸馏，收集重馏液，重馏液与鱼腥草的体积质量比为1:0.7；其中，酶溶液中含有纤维素酶和果胶酶，纤维素酶的浓度为0.2g/ml，果胶酶的浓度为0.08g/ml；
33.(2)向重馏液中添加乙醇、氯化钠和聚山梨酯，鱼腥草注射液中乙醇的体积浓度为20％，氯化钠的浓度为7g/1000ml，聚山梨酯80的浓度为2g/1000ml，搅拌至溶解，然后用枸橼酸溶液调节溶液ph值为5.5，过滤、灭菌，制得。
34.实施例2
35.一种鱼腥草注射液，其制备方法包括以下步骤：
36.(1)取洗净的鲜鱼腥草，将其置于液氮中，液氮完全没过鱼腥草，静置5min，将鱼腥草取出压碎成长度为0.5cm的片段，向其中添加酶溶液，将鱼腥草片段完全浸没，升温至25℃静置20min，然后向其中加水并进行水蒸气蒸馏，水蒸气蒸馏过程中溶液中水与鱼腥草的体积质量比为15:1，收集蒸馏液，约3小时后蒸馏液与鱼腥草的体积质量比达到1:1.2，将蒸馏液进行重蒸馏，收集重馏液，重馏液与鱼腥草的体积质量比为1:0.8；其中，酶溶液中含有纤维素酶和果胶酶，纤维素酶的浓度为0.5g/ml，果胶酶的浓度为0.1g/ml；
37.(2)向重馏液中添加乙醇、氯化钠和聚山梨酯，鱼腥草注射液中乙醇的体积浓度为30％，氯化钠的浓度为9g/1000ml，聚山梨酯80的浓度为2g/1000ml，搅拌至溶解，然后用枸橼酸溶液调节溶液ph值为5.0，过滤、灭菌，制得。
38.实施例3
39.一种鱼腥草注射液，其制备方法包括以下步骤：
40.(1)取洗净的鲜鱼腥草，将其置于液氮中，液氮完全没过鱼腥草，静置8min，将鱼腥草取出压碎成长度为1.5cm的片段，向其中添加酶溶液，将鱼腥草片段完全浸没，升温至33℃静置20min，然后向其中加水并进行水蒸气蒸馏，水蒸气蒸馏过程中溶液中水与鱼腥草的体积质量比为13:1，收集蒸馏液，约3.5小时后蒸馏液与鱼腥草的体积质量比为1:1.2，将蒸馏液进行重蒸馏，收集重馏液，重馏液与鱼腥草的体积质量比为1:0.5；其中，酶溶液中含有纤维素酶和果胶酶，纤维素酶的浓度为0.4g/ml，果胶酶的浓度为0.03g/ml；
41.(2)向重馏液中添加乙醇、氯化钠和聚山梨酯，鱼腥草注射液中乙醇的体积浓度为30％，氯化钠的浓度为6g/1000ml，聚山梨酯80的浓度为3g/1000ml，搅拌至溶解，然后用枸橼酸溶液调节溶液ph值为6.0，过滤、灭菌，制得。
42.对比例1
43.一种鱼腥草注射液，其制备方法包括以下步骤：
44.(1)取洗净的鲜鱼腥草，向其中添加酶溶液，将鱼腥草完全浸没，升温至30℃静置
15min，然后向其中加水并进行水蒸气蒸馏，水蒸气蒸馏过程中溶液中水与鱼腥草的体积质量比为10:1，收集蒸馏液，约3小时后蒸馏液与鱼腥草的体积质量比达到1:1，将蒸馏液进行重蒸馏，收集重馏液，重馏液与鱼腥草的体积质量比为1:0.7；其中，酶溶液中含有纤维素酶和果胶酶，纤维素酶的浓度为0.2g/ml，果胶酶的浓度为0.08g/ml；
45.(2)向重馏液中添加乙醇、氯化钠和聚山梨酯，鱼腥草注射液中乙醇的体积浓度为20％，氯化钠的浓度为7g/1000ml，聚山梨酯80的浓度为2g/1000ml，搅拌至溶解，然后用枸橼酸溶液调节溶液ph值为5.5，过滤、灭菌，制得。
46.对比例2
47.一种鱼腥草注射液，其制备方法包括以下步骤：
48.(1)取洗净的鲜鱼腥草，将其置于液氮中，液氮完全没过鱼腥草，静置10min，将鱼腥草取出压碎成长度为1cm的片段，向其中加水并进行水蒸气蒸馏，水蒸气蒸馏过程中溶液中水与鱼腥草的体积质量比为10:1，收集蒸馏液，约3小时后蒸馏液与鱼腥草的体积质量比达到1:1，将蒸馏液进行重蒸馏，收集重馏液，重馏液与鱼腥草的体积质量比为1:0.7；
49.(2)向重馏液中添加乙醇、氯化钠和聚山梨酯，鱼腥草注射液中乙醇的体积浓度为20％，氯化钠的浓度为7g/1000ml，聚山梨酯80的浓度为2g/1000ml，搅拌至溶解，然后用枸橼酸溶液调节溶液ph值为5.5，过滤、灭菌，制得。
50.对比例3
51.一种鱼腥草注射液，其制备方法包括以下步骤：
52.(1)取洗净的鲜鱼腥草，将其置于液氮中，液氮完全没过鱼腥草，静置10min，将鱼腥草取出压碎成长度为1cm的片段，向其中添加酶溶液，将鱼腥草片段完全浸没，升温至30℃静置15min，然后向其中加水并进行水蒸气蒸馏，水蒸气蒸馏过程中溶液中水与鱼腥草的体积质量比为4:1，收集蒸馏液，约3小时后蒸馏液与鱼腥草的体积质量比达到1:1，将蒸馏液进行重蒸馏，收集重馏液，重馏液与鱼腥草的体积质量比为1:0.7；其中，酶溶液中含有纤维素酶和果胶酶，纤维素酶的浓度为0.2g/ml，果胶酶的浓度为0.08g/ml；
53.(2)向重馏液中添加乙醇、氯化钠和聚山梨酯，鱼腥草注射液中乙醇的体积浓度为20％，氯化钠的浓度为7g/1000ml，聚山梨酯80的浓度为2g/1000ml，搅拌至溶解，然后用枸橼酸溶液调节溶液ph值为5.5，过滤、灭菌，制得。
54.对比例4
55.一种鱼腥草注射液，其制备方法包括以下步骤：
56.(1)取洗净的鲜鱼腥草，将其研磨成长度为1cm的片段，向其中添加酶溶液，将鱼腥草片段完全浸没，升温至30℃静置15min，然后向其中加水并进行水蒸气蒸馏，水蒸气蒸馏过程中溶液中水与鱼腥草的体积质量比为10:1，收集蒸馏液，约3小时后蒸馏液与鱼腥草的体积质量比达到1:1，将蒸馏液进行重蒸馏，收集重馏液，重馏液与鱼腥草的体积质量比为1:0.7；其中，酶溶液中含有纤维素酶和果胶酶，纤维素酶的浓度为0.2g/ml，果胶酶的浓度为0.08g/ml；
57.(2)向重馏液中添加乙醇、氯化钠和聚山梨酯，鱼腥草注射液中乙醇的体积浓度为20％，氯化钠的浓度为7g/1000ml，聚山梨酯80的浓度为2g/1000ml，搅拌至溶解，然后用枸橼酸溶液调节溶液ph值为5.5，过滤、灭菌，制得。
58.对比例5
59.一种鱼腥草注射液，其制备方法包括以下步骤：
60.(1)取洗净的鲜鱼腥草，将其置于液氮中，液氮完全没过鱼腥草，静置10min，将鱼腥草取出压碎成长度为1cm的片段，向其中添加酶溶液，将鱼腥草片段完全浸没，升温至30℃静置15min，然后向其中加水并进行水蒸气蒸馏，水蒸气蒸馏过程中溶液中水与鱼腥草的体积质量比为10:1，收集蒸馏液，约3小时后蒸馏液与鱼腥草的体积质量比达到1:1，将蒸馏液进行重蒸馏，收集重馏液，重馏液与鱼腥草的体积质量比为1:0.7；其中，酶溶液中含有纤维素酶和果胶酶，纤维素酶的浓度为0.2g/ml，果胶酶的浓度为0.08g/ml；
61.(2)向重馏液中添加氯化钠和聚山梨酯，鱼腥草注射液中氯化钠的浓度为7g/1000ml，聚山梨酯80的浓度为2g/1000ml，搅拌至溶解，然后用枸橼酸溶液调节溶液ph值为5.5，过滤、灭菌，制得。
62.试验例
63.一、有效成分含量测定
64.分别测定将实施例1-3和对比例1-5中的鱼腥草注射液中鱼腥草素的含量，具体测定结果见表1。
65.表1：鱼腥草注射液中有效成分含量
[0066][0067][0068]
通过上表中的数据可以得知，采用实施例1-3中的方法制得的鱼腥草注射液中有效成分含量均较高，而对比例1-5中调整了制备工艺后，所制备的鱼腥草注射液中有效成分含量降低，证明采用本技术中的方法可有效提高鱼腥草注射液中有效成分的含量。
[0069]
二、注射液形状测定
[0070]
分别将实施例1-3和对比例1-5中的鱼腥草注射液进行避光保存，分别于2个月、6个月和1年后对鱼腥草注射液进行检测，检测结果见表1。
[0071][0072][0073]
通过上表中的数据得知，实施例1-3和对比例1-4中的方法制得的鱼腥草注射液的在放置一定时间后质量均未发生较大的改变，均符合使用标准；对比例5中的注射液中存在微量的油滴，推测是挥发油成分未能充分溶解于水中。