一种用于防治抗结核药物所致肝损伤的中药组合物

1.本发明涉及一种用于防治抗结核药物所致肝损伤的中药组合物，属于中医药技术领域。


背景技术：

2.结核是一种由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，主要感染肺部。目前，抗结核治疗的一线治疗方案为异烟肼、利福平、吡嗪酰胺、乙胺丁醇的联合用药，该治疗方案可以对快速繁殖和半静止的结核杆菌进行同时杀伤，避免耐药性的产生，然而，该治疗方案在人群中容易引发药物性肝损伤、皮疹等不良反应。其中，抗结核药物所致肝损伤(atdh,antituberculosis drug-induced hepatotoxicity)是抗结核药物引发的最为常见、最严重的不良反应，严重时甚至导致患者死亡。而一旦发生抗结核药物所致肝损伤则需要立即停药中断治疗，甚至治疗失败，这也是诱发耐多药结核的重要原因之一。
3.目前临床上常采用预防性给予保肝药进行预防，这些保肝药包括双环醇、水飞蓟素、联苯双酯、甘草酸二铵、谷胱甘肽、硫普罗宁等，但这些保肝药并不能减少atdh的发生、发展，对抗结核药物所致的肝损伤是无效的或疗效有限。中医药疗法干预atdh具有明显优势，自上世纪90年代以来，临床报道多种用于防治抗结核药物所致肝损伤的中药组合物，例如，有报道采用生药黄芩和五味子的，该组合物对抗结核药物所致的肝损伤有一定的防治作用，但疗效有限。


技术实现要素：

4.本发明的目的在于解决现有技术的不足，提供一种用于防治抗结核药物所致肝损伤的中药组合物，其对于抗结核药物所致的肝损伤具有显著的疗效。
5.技术方案
6.一种用于防治抗结核药物所致肝损伤的中药组合物，由如下重量份的原料药制成：3-10份柴胡，6-12份茯苓，5-15份白芍，6-10份炙甘草，3-10份茵陈。
7.进一步，所述中药组合物由如下重量份的原料药制成：10份柴胡，10份茯苓，10份白芍，10份炙甘草，10份茵陈。
8.本发明的中药组合物配方中，柴胡具有疏肝理气的功效；白芍具有养血合营、敛阴平肝的功效；茯苓具有利水渗湿，健脾和胃的功效；炙甘草则起到益气补中、调和诸药的功效；茵陈具有清热利湿的功效。全方共奏疏肝解郁，健脾养血，清利湿热之功，暗合atdh补虚、清热、利湿的总治则。
9.进一步，所述中药组合物的剂型为汤剂、片剂、颗粒剂或胶囊剂。
10.上述中药组合物的制备方法：按重量份称取原料药柴胡、茯苓、白芍、炙甘草和茵陈，混合后，加入10倍量的水煎煮1-3h，过滤后，往滤渣中继续加入10倍量的水煎煮1-3h，过滤，合并两次滤液，添加药学上可接受的辅料制备成相应的剂型，得到用于防治抗结核药物所致肝损伤的中药组合物。
11.上述中药组合物在制备用于防治抗结核药物所致肝损伤的药物组合物中的应用。
12.本发明的有益效果：
13.本发明提供了一种用于防治抗结核药物所致肝损伤的中药组合物，其由柴胡、茯苓、白芍、炙甘草和茵陈五味原料药制成，其中，柴胡具有疏肝理气的功效；白芍具有养血合营、敛阴平肝的功效；茯苓具有利水渗湿，健脾和胃的功效；炙甘草则起到益气补中、调和诸药的功效；茵陈具有清热利湿的功效。这五味原料药相互配合，共同发挥疏肝解郁、健脾养血、清利湿热之功，对于抗结核药物所致的肝损伤具有显著的疗效。
附图说明
14.图1为给药72h后tuebingen斑马鱼的死亡率和畸形率统计结果；
15.图2为给药72h后tuebingen斑马鱼的形态图；
16.图3为给药72h后cz320品系斑马鱼在荧光显微镜下的肝脏图片；
17.图4为给药72h后cz320品系斑马鱼肝脏的荧光面积和荧光密度图。
具体实施方式
18.下面结合附图和具体实施例对本发明的技术方案作清楚、详细地说明。下述实施例中，采用的原料药及其来源如下：
19.柴胡(安徽省金芙蓉中药饮片公司，批号：02-19060101)、茯苓(安徽存真中药饮片有限公司，批号：200301)、白芍(安徽省金芙蓉中药饮片公司，批号：01-19080101)、茵陈(安徽嘉佑中药饮片有限公司，批号：20200401)、炙甘草(江苏华洪药业科技有限公司，批号：200526)，但均不限于此。
20.实施例1
21.一种用于防治抗结核药物所致肝损伤的中药组合物，由如下重量份的原料药制成：10份柴胡，10份茯苓，10份白芍，10份炙甘草，10份茵陈。
22.所述中药组合物的制备方法：按重量份称取原料药柴胡、茯苓、白芍、炙甘草和茵陈共20g，混合后，加入10倍量的水煎煮1h，过滤后，往滤渣中继续加入10倍量的水煎煮1h，过滤，合并两次滤液，加纯净水稀释至400ml(50mg生药/ml)，得到用于防治抗结核药物所致肝损伤的中药组合物。
23.药效测试：
24.1.1药品与试剂
25.异烟肼(美国sigma-aldrich公司，批号：mkcj5583)；斑马鱼胚胎培养基：5mmol/l nacl、0.17mmol/l kcl、0.33mmol/l cacl2、0.33mmol/l mgso4；将实施例1制得的中药组合物分别用斑马鱼胚胎培养基稀释至50、100、200、400、800μg生药/ml。
26.1.2实验动物
27.tuebingen品系斑马鱼、cz320(ihb175tg,tg(-1.7apoa2:gfp))品系肝脏特异性荧光标记斑马鱼，均为4-6月龄，购买于南京尧顺禹生物科技有限公司。
28.1.3实验方法
29.(1)tuebingen品系斑马鱼雌雄分开饲养，定时喂以孵化的丰年虾卵，饲养条件按照光照14h/黑暗10h，水温28℃的循环水系统。于收集鱼卵前一日下午16:00按雌雄比1:1挑
选健康性成熟的斑马鱼放入产卵缸中，次日上午9:00-10:00收集受精卵。对受精卵挑选、清洗后移入胚胎培养用水培养，并滴入亚甲基蓝消毒。在受精卵发育至72hpf(hour post fertilization)，得到3dpf(day post fertilization)幼鱼，挑选发育正常的幼鱼，移入24孔板中，每孔8尾。实验设空白对照组(胚胎培养基)，模型组(异烟肼8mmol/l)，实验组(异烟肼8mmol/l与实施例1的中药组合物50、100、200、400、800μg生药/ml联合给药组)，按不同组别往放有3dpf的幼鱼的24孔板中加入不同供试液，设3个重复孔，每孔2ml供试液，连续给药3天，每天换液，实验重复三次。其中，空白对照组记为c，加入的供试液为斑马鱼胚胎培养基；模型组记为inh8，加入的供试液为8mmol/l异烟肼；实验组按供试液中中药组合物的浓度不同分别记为inh8+50、inh8+100、inh8+200、inh8+400、inh8+800。在给药72h后记录tuebingen斑马鱼死亡数和畸形数，计算死亡率和畸形率，并在体视显微镜下观察斑马鱼的形态变化情况。
30.(2)采用cz320品系斑马鱼进行实验验证，实验方法与tuebingen品系斑马鱼实验方法基本相同，实验设空白对照组(胚胎培养基)，模型组(异烟肼8mmol/l)，实验组(异烟肼8mmol/l与实施例1的中药组合物100μg生药/ml联合给药组)，每孔3尾幼鱼，供试液2ml，连续给药3天，每天换液，实验重复三次。给药72h后，在荧光显微镜下观察cz320品系斑马鱼肝脏形态变化情况。
31.1.4实验结果
32.给药72h后tuebingen斑马鱼的死亡率和畸形率统计结果见图1,可以看出，与空白对照组相比，模型组的死亡率和畸形率显著上升(p＜0.01)，与模型组相比，实验组随着实施例1的中药组合物的给药浓度的增加，死亡率、畸形率均显著下降(p＜0.01)，至高浓度时，死亡率、畸形率又有上升。
33.给药72h后tuebingen斑马鱼的形态图见图2，与空白对照组相比，模型组出现鱼鳔缺失或减小、卵黄囊吸收延滞、脊柱弯曲、心包水肿；与模型组相比，随着给药浓度增加，实验组形态学变化得到改善，至高浓度时恶化，实验组inh8+800全部死亡。
34.图3为给药72h后cz320品系斑马鱼在荧光显微镜下的肝脏图片，图4为给药72h后cz320品系斑马鱼肝脏的荧光面积和荧光密度图，其中图4a为cz320品系斑马鱼肝脏的荧光面积，图4b为cz320品系斑马鱼肝脏的荧光密度。由图3、图4可以看出，与对照组相比，模型组的斑马鱼肝脏荧光面积显著下降，荧光光密度显著降低(p＜0.01)，与模型组相比，实验组的斑马鱼肝脏荧光面积显著上升，荧光光密度显著增强(p＜0.01)。