UFP-101在制备治疗慢性心力衰竭药物中的应用

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–
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[0008]
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技术实现要素：

[0009]
本发明为了解决目前慢性心力衰竭治疗药物方面的补充，关于作用于心脏感觉神经系统的慢性心衰治疗药物的开发，提供了ufp-101在制备治疗慢性心力衰竭药物中的应用。
[0010]
本发明由如下技术方案实现的：ufp-101在制备治疗慢性心力衰竭药物中的应用。
[0011]
制造慢性心力衰竭老鼠模型，使用ufp-101后对比心衰老鼠心功能指标的变化。
[0012]
进一步，根据研究结果所得，慢性心力衰竭患者血清中n/ofq表达水平升高，给慢性心力衰竭老鼠使用ufp-101后，心功能指标改善；而且使用ufp-101较使用zp120的慢性心力衰竭老鼠，心功能改善更加明显。
[0013]
鉴于ufp-101在慢性心力衰竭老鼠模型中具有改善心功能指标的作用，表明ufp-101作为慢性心力衰竭有效治疗药物的广阔前景。
[0014]
本发明还提供了ufp-101在调节心脏感觉神经系统释放的介质来治疗慢性心力衰竭的药物中的应用。
[0015]
所述ufp-101给药剂量为：ufp-101浓度为1
×
10-9
mol/l，给药剂量为1ml/kg。
[0016]
使用n/ofq检测试剂盒检测慢性心力衰竭患者血清内源性孤啡肽即n/ofq及健康
体检人群血清n/ofq。
[0017]
ufp-101：[n-(bn)gly-gly-gly-phe-thr-gly-ala-arg-lys-ser-ala-arg-lys-arg-lys-asn-gln-nh2]是一种特异性的孤啡肽受体拮抗剂，ufp-101(cas:849024-68-6)，孤啡肽受体部分激动剂zp120(ac-ryyr-wkkkkkkk-nh2)，均商务采购所得。
[0018]
鉴于ufp-101在慢性心力衰竭老鼠模型中具有改善心功能指标的作用，表明ufp-101作为慢性心力衰竭有效治疗药物的广阔前景。
[0019]
本发明的有益效果是：提供了通过调节心脏感觉神经系统释放的介质来治疗慢性心力衰竭的药物开发。通过对心脏感觉神经系统释放的n/ofq进行拮抗来达到改善心功能指标的作用。
附图说明
[0020]
图1为两组人群的血清n/ofq水平（ng/l）；图中显示慢性心力衰竭患者血清中n/ofq表达水平高于健康体检人群；图2为心功能ⅰ级
‑ⅳ
级的血清n/ofq水平；图中显示n/ofq随着心功能严重程度的增加而增加；图3为各组的ef(射血分数)；图中显示慢性心力衰竭老鼠使用ufp-101后，ef有明显升高，且较使用zp120组升高更明显；图4为各组的fs（短轴缩短率）；图中显示慢性心力衰竭老鼠使用ufp-101后，fs有明显升高，且较使用zp120组升高更明显；图5为各组的bnp（ng/ml）；图中显示慢性心力衰竭老鼠使用ufp-101后，bnp有明显降低，且较使用zp120组降低更明显。
具体实施方式
[0021]
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例；基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0022]
除非另有定义，所有在此使用的技术和科学术语，和本发明所属领域内的技术人员所通常理解的意思相同，在此公开引用及他们引用的材料都将以引用的方式被并入。
[0023]
本领域技术人员意识到的通过常规实验就能了解到的描述的特定实施方案的等同技术，都将包含在本技术中。
[0024]
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的仪器设备，如无特殊说明，均为实验室常规仪器设备；下述实施例中所用的实验材料，如无特殊说明，均为由常规生化试剂商店购买得到的。
[0025]
本发明主要是ufp-101在制备用于治疗慢性心力衰竭的药物中的应用。
[0026]
实验例1：慢性心力衰竭患者与健康体检人群血清中n/ofq的检测1、选择2021年1月－2022年2月山西医科大学第二医院本院心内科四个组及分院收治的冠心病心力衰竭患者216例，根据患者临床症状、辅助检查指标及美国纽约心脏病学会(nyha)心功能分级标准进行分级ⅱ～ⅳ级。同期体检结果基本正常的健康人群40例。实
验方案得到了中国山西医科大学山大二院伦理委员会的批准，研究前获得患者书面知情同意书。
[0027]
纳入标准：由2名心脏病专家根据《中国心力衰竭诊断和治疗指南2018》中冠心病心力衰竭的诊断入选：（1）冠心病为基础病因，经冠状动脉造影确诊，冠心病诊断以冠状动脉左主干、左前降支、左回旋支或右冠状动脉中１支或以上狭窄≥５０％为标准。（2）lvef＜50%，且规律使用血管紧张素转换酶抑制剂（acei）或血管紧张素受体拮抗剂（arb）、利尿剂、β-受体阻滞剂，酌情应用洋地黄制剂、硝酸酯类等药物，近期心衰症状加重住院接受治疗的患者。
[0028]
排除标准:（1）非冠心病原因导致的心力衰竭；合并急性冠状动脉综合征者；合并急性肺栓塞者；合并风湿性心脏病、心肌炎等其他心血管疾病者；急性失代偿性心力衰竭；心源性休克；（2）严重其它系统疾病、肝肾功能不全、严重感染、严重精神问题、恶性肿瘤者。（3）临床资料不全者。
[0029]
2、临床一般资料与生化检验：纳入患者住院后给予维持基本生命体征平稳，收集患者一般资料，次日清晨抽取患者空腹静脉血两份，一份静脉血送检验科进行相关指标的检验：三酰甘油（tg）、总胆固醇（tc）、低密度脂蛋白胆固醇（ldl-c）及高密度脂蛋白胆固醇（hdl-c）的检验采用全自动生化分析仪，nt-pro-bnp采用双向测流免疫法测定；另一份静脉血经处理后在实验室行本研究相关指标检测。
[0030]
3、辅助检查指标：心脏超声使用彩色超声仪检查治疗前后左室射血分数（lvef）、左室舒张末期内径（lvedd）、左心室收缩末期内径（lvesd）等。
[0031]
血浆n/ofq的测定：静脉血样本采集于不含抗凝剂的小瓶中。加等量人外周血淋巴细胞分离液kit，10分钟4000转离心后，血清立即分离，并保存在-70℃直到测定。
[0032]
内源性孤啡肽n/ofq含量：采用n/ofq试剂盒使用酶联免疫吸附法测定血清孤啡肽含量，严格按照说明书中提示的操作步骤完成实验，最终孔板中的显色深浅和样品中的孤啡肽含量呈正相关，在酶标仪 450nm 波长处测定吸光度值，通过标准曲线计算样品中人血清内源性孤啡肽含量。
[0033]
4、统计学分析：将数据导入spss23.0，两组临床一般资料中的计数资料用百分比例与例数表示，计量资料和所有检验指标用均数
±
标准差表示，比较用t检验或χ2检验。规定 p＜0.05代表差异有统计学意义。
[0034]
5、实验结果a、n/ofq含量见表1、图1和图2，结果显示在慢性心力衰竭患者血清中n/ofq表达水平高于健康体检人群，且随着心功能严重程度的增加而增加。
[0035]
表1：2组患者各项指标的比较
实验例2：慢性心力衰竭模型小鼠给予ufp-101前后血清n/ofq水平的变化1、建立慢性缺血性心力衰竭模型小鼠：24只sd大鼠（250
±
20）g称质量后用10%水合氯醛0.3 ml/100g腹腔注射麻醉小鼠，腹腔注射2%盐酸利多卡因（10mg/kg）以预防室性心律失常。麻醉满意后将小鼠仰卧位固定于操作台上，然后气管切开并插入气管导管，连接小动物呼吸机进行机械通气，呼吸机设置潮气量8ml/kg，呼吸频率70次/min。在左侧第4肋间开胸暴露心脏：假结扎组只开胸穿线不结扎，入选后续实验；结扎组以5-0无损伤缝线于左心耳右缘冠状动脉左前降支起点下2 mm处进针结扎，心脏前壁逐渐变白，关闭胸腔后，将大鼠从手术台转移到带呼吸机的加热恢复垫上。术后腹腔注射青霉素16wiu，每天1次，连续3d，预防感染。成功的心衰诱导被定义为心肌梗死后三周进行的，因为三周后，大多数适应性不良的结构重塑完成。最终筛选出12只假结扎组和12只缺血性心衰大鼠模型，只维持标准饮食。
[0036]
使用philipsie33 小儿心脏超声探头行射血分数（ef），短轴缩短分数（fs）检查，取3次平均值为最终数据。使用elisa试剂盒测量b型钠尿肽（bnp）。
[0037]
24只缺血性心衰大鼠模型平均分为两组各12只。根据文献研究给予最佳剂量：ufp-101组缺血性心衰大鼠按1ml/kg经尾静脉注入ufp-101（浓度为1
×
10-9
mol/l），zp120组缺血性心衰大鼠按10mmol/kg经尾静脉注入zp120。两组均按照一日一次静脉注射，连续2周后再次检测ef、fs、bnp。
[0038]
2、统计学分析：将数据导入spss23.0，计数资料用百分比例与例数表示，计量资料用均数
±
标准差表示，比较用t检验或χ2检验。规定 p＜0.05代表差异有统计学意义。
[0039]
3、结果：实验结果如表2、图3、图4和图5所示，图3显示慢性心力衰竭老鼠使用ufp-101后，ef有明显升高；图4显示慢性心力衰竭老鼠使用ufp-101后，ef有明显升高；图5显示慢性心力衰竭老鼠使用ufp-101后，bnp有明显升高。给予ufp-101后，慢性心力衰竭模型小鼠的心功能明显改善，bnp明显降低。
[0040]
表2各组ef、fs及bnp的比较表2各组ef、fs及bnp的比较注：t1、p1：心衰组与假结扎组比较，p
▲
＜0.05；t2、p2：使用ufp-101后心衰组与使用前心衰组比较，p
▲▲
＜0.05；t3、p3：使用ufp-101后心衰组与使用zp120后心衰组比较，p
▲▲▲
＜0.05。
[0041]
上述结果显示：慢性心力衰竭老鼠使用ufp-101后，ef有明显升高，且较使用zp120组升高更明显；慢性心力衰竭老鼠使用ufp-101后，fs有明显升高，且较使用zp120组升高更明显；慢性心力衰竭老鼠使用ufp-101后，bnp有明显降低，且较使用zp120组降低更明显。显然，ufp-101在慢性心力衰竭老鼠模型中具有改善心功能指标的作用，表明ufp-101作为慢性心力衰竭有效治疗药物明显优于zp120，具有广阔的前景，为慢性心力衰竭治疗药物提供了实验依据。
[0042]
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术
方案的范围。