包含维生素C的低共熔混合物的化妆料组合物的制作方法

包含维生素c的低共熔混合物的化妆料组合物
技术领域
1.本发明涉及包含维生素c的低共熔混合物的化妆料组合物及其制备方法。


背景技术：

2.决定人类皮肤颜色的黑色素在存在于皮肤基底层的黑色素形成细胞(黑素细胞，melanocyte)中合成，传递到周围的角质细胞并显示皮肤颜色。据悉，特别是，当黑色素过度产生时，会发生色素沉着或形成黑斑和斑痕。已知为代表性皮肤美白成分的维生素c不仅可以通过抑制黑色素生成来减少色素沉着，还可以通过还原由外部环境诱发的活性氧(reactive oxygen species)来抑制老化，并且还可以通过帮助胶原蛋白合成来有助于改善皱纹和提高弹性。
3.这种维生素c可以较大量地溶解在水中，但由于快速氧化作用而容易分解，并且在非水性溶剂中可以提高氧化稳定性，但存在溶解度极低的问题。另外，由于维生素c是亲水性的，难以渗透作为皮肤最外层屏障的角质层，因此需要大量的维生素c以诱导充分的生物活性。因此，在医药和化妆品领域，主要以非常短的保质期提供以水性为基础的维生素c制剂，并且当低温保管以延缓氧化分解时，存在维生素c的析出可能引起品质问题并且给使用者带来不便的问题。
4.因此，进行了许多努力和研究来改善维生素c的溶解度和不稳定性。作为具体例，在专利文献1和2中，试图通过引入具有3个碳原子的二醇(glycol)类溶剂和析出防止剂来减少制剂中水的量，从而延缓维生素c的氧化并防止在低温下的析出。此外，在专利文献3中，讨论了通过将维生素c的粉末分散在硅类油中来提高稳定性的方法。在这些专利中，维生素c的稳定性得到部分改善，但存在溶剂选择性有限，皮肤吸收度也没有得到改善，并且在一定以上的高含量下出现析出的问题。另外，可以看出分散在硅类油中的维生素c不是以溶液状态而是以微细颗粒形态分散，并且这种形态难以经皮传递并且可能诱发刺激。
5.[现有技术文献]
[0006]
[专利文献]
[0007]
(专利文献1)jp wo2019-131892 a1
[0008]
(专利文献2)jp wo2019-189742 a1
[0009]
(专利文献3)us 10912729 b2


技术实现要素：

[0010]
要解决的课题
[0011]
本发明的发明人确认了当将维生素c和甜菜碱以低共熔混合物的形态制备时，对各种水性和非水性溶剂的溶解度显著增加，即使在低温下也稳定地保持而不会析出，并且维生素c的皮肤透过率得到提高，从而完成了本发明。
[0012]
因此，本发明的目的是提供一种通过将维生素c和甜菜碱以低共熔混合物的形态包含在化妆料组合物中，从而在各种溶剂条件下显示出高溶解度并且氧化稳定性优异、皮
肤透过度优异的化妆料组合物及医药外品组合物。
[0013]
解决课题的手段
[0014]
作为解决上述课题的手段，
[0015]
本发明提供一种化妆料组合物，其包含含有维生素c和甜菜碱的低共熔混合物(eutectic mixture)。
[0016]
另外，本发明提供一种化妆料组合物的制备方法，包括：混合维生素c和甜菜碱来制备低共熔混合物(eutectic mixture)的步骤；以及添加上述低共熔混合物来制备化妆料组合物的步骤。
[0017]
本发明提供一种包含含有维生素c和甜菜碱的低共熔混合物(eutectic mixture)的医药外品组合物。
[0018]
另外，本发明提供医药外品组合物的制备方法，包括：混合维生素c和甜菜碱来制备低共熔混合物(eutectic mixture)的步骤；以及添加上述低共熔混合物来制备医药外品组合物的步骤。
[0019]
发明的效果
[0020]
本发明通过以低共熔混合物的形态包含维生素c和甜菜碱，可以提供含有大量维生素c同时显著提高对各种水性和非水性溶剂的溶解度并且氧化稳定性优异的化妆料组合物及医药外品组合物。此外，可以提供即使在低温下也稳定而不会析出维生素c、可以显示出高的皮肤透过率、进而改善皮肤美白、肤色均匀度、皱纹和弹性的组合物。
附图说明
[0021]
图1是根据实验例1确认在抗坏血酸：甜菜碱的各种摩尔比下是否形成由抗坏血酸和甜菜碱构成的低共熔混合物的结果。
[0022]
图2是根据实验例2比较维生素c、维生素c和甜菜碱的简单混合物、维生素c和甜菜碱的低共熔混合物在包含大量非水性溶剂的组成中是否稳定而不会析出的结果。
[0023]
图3显示了根据实验例5的维生素c(ascorbic acid)、甜菜碱(betaine)、维生素c和甜菜碱的简单混合物以及维生素c和甜菜碱的低共熔混合物的红外光谱分析结果。
[0024]
图4的(a)显示了根据实验例5的维生素c的1h nmr分析结果，图4的(b)显示了甜菜碱的1h nmr分析结果。
[0025]
图5显示了根据实验例5的由维生素c和甜菜碱形成的低共熔混合物的1h nmr分析结果。
[0026]
图6显示了根据实验例6的维生素c的低共熔混合物的皮肤亮度和皮肤均匀度改善率图。
[0027]
图7显示了根据实验例6的维生素c的低共熔混合物的皱纹和弹性改善率图。
具体实施方式
[0028]
在下文中，将详细说明本发明。
[0029]
本发明可以进行各种变更，可以具有各种形态，因此旨在示例特定实施例并在下文中进行详细说明。然而，这并非旨在将本发明限定为特定的公开形态，并且应当理解为包括本发明的思想和技术范围中包含的所有变更、等同物乃至替代物。
[0030]
本发明提供了一种化妆料组合物，其包含含有维生素c和甜菜碱的低共熔混合物(eutectic mixture)。
[0031]
如本发明一样，当维生素c和甜菜碱形成低共熔混合物时，通过氢键可以具有比各自的熔点低得多的熔点。本发明的发明人确认了可以利用这种低共熔混合物，使得在水性溶剂以及各种非水性溶剂或水性/非水性混合溶剂中具有显著高的溶解度，即使在各种环境中也可以保持稳定的组合物的形态，并且皮肤渗透性良好，大量的维生素c能够透过皮肤。
[0032]
在本发明中，“维生素c(vitamin c)”也称为l-抗坏血酸(l-ascorbic acid)，或抗坏血酸(ascorbic acid)，具有以下化学结构。
[0033]
[化学式1]
[0034][0035]
在本发明中，与维生素c形成低共熔混合物的“甜菜碱(betaine,trimethylglycine(三甲基甘氨酸))”作为从甜菜中提取的氨基酸衍生物，具有保湿、镇定和消炎效果，具有以下化学结构。
[0036]
[化学式2]
[0037][0038]
在本发明中，低共熔混合物可以由维生素c和甜菜碱制备，优选地可以由维生素c、甜菜碱和纯净水制备。
[0039]
在本发明中，形成低共熔混合物的维生素c和甜菜碱的摩尔比可以为1:0.1至1:10，但不限于此。具体地，维生素c和甜菜碱的摩尔比可以为1:0.1至1:9、1:0.1至1:8、1:0.1至1:7、1:0.1至1:6、1:0.2至1:10、1:0.2至1:9、1:0.2至1:8、1:0.2至1:7、1:0.2至1:6、1:0.25至1:10、1:0.25至1:9、1:0.25至1:8、1:0.25至1:7、1:0.25至1:6、1:0.3至1:10、1:0.3至1:9、1:0.3至1:8、1:0.3至1:7、或1:0.3至1:6，优选地维生素c和甜菜碱的摩尔比可以为1:0.3至1:6。当维生素c和甜菜碱的摩尔比超出上述范围时，可能不容易制备低共熔混合物。
[0040]
在本发明中，当制备维生素c和甜菜碱的低共熔混合物时，考虑到相应成分的官能团的类型和个数、相应成分的电荷等，可以导出最适合的比例以制备溶解度和稳定性优异的低共熔混合物。
[0041]
在本发明中，基于100重量份的整体低共熔混合物，低共熔混合物中维生素c的含量可以为6重量份以上、10重量份以上、11重量份以上、13重量份以上、18重量份以上、19重量份以上、或23重量份以上，并且可以为94重量份以下、86重量份以下、81重量份以下、79重量份以下、76重量份以下、74重量份以下、70重量份以下、68重量份以下、64重量份以下、47重量份以下、43重量份以下、或40重量份以下。
[0042]
更具体地，可以为13至94重量份、13至86重量份、13至79重量份、23至94重量份、23
至86重量份、23至79重量份、11至81重量份、11至74重量份、11至68重量份、19至81重量份、19至74重量份、19至68重量份、10至76重量份、10至70重量份、10至64重量份、18至76重量份、18至70重量份、18至64重量份、6至47重量份、6至43重量份、6至40重量份、11至47重量份、11至43重量份或11至40重量份。
[0043]
在本发明中，基于100重量份的整体低共熔混合物，低共熔混合物中甜菜碱的含量可以为3重量份以上、5重量份以上、6重量份以上、7重量份以上、10重量份以上、11重量份以上、12重量份以上、14重量份以上、17重量份以上、18重量份以上、或21重量份以上，并且可以为87重量份以下、77重量份以下、75重量份以下、71重量份以下、67重量份以下、63重量份以下、44重量份以下、或39重量份以下。
[0044]
更具体地，可以为6至77重量份、6至87重量份、14至77重量份、14至87重量份、21至77重量份、21至87重量份、5至67重量份、5至75重量份、12至67重量份、12至75重量份、18至67重量份、18至75重量份、5至63重量份、5至71重量份、11至63重量份、11至71重量份、17至63重量份、17至71重量份、3至44重量份、3至39重量份、7至44重量份、7至39重量份、10至44重量份、或10至39重量份。
[0045]
根据本发明的低共熔混合物可以进一步包含纯净水。通过纯净水可以降低维生素c和甜菜碱的低共熔混合物的熔点，可以稳定地保持组合物中的维生素c，并且即使在各种环境变化中也可以均匀稳定地保持性状而不会析出维生素c。
[0046]
在本发明中，基于100重量份的整体低共熔混合物，低共熔混合物中纯净水的含量可以为0.00001重量份至50重量份、0.00001至40重量份、0.01至30重量份、或1至20重量份，但不限于此。当纯净水的含量超过上述范围时，低共熔混合物中维生素c的氧化稳定性可能降低。
[0047]
为了改善诸如涂布于皮肤时的皮肤刺激等不快感，含有根据本发明的低共熔混合物的化妆料组合物可以调节以使具有ph 3.0至7.0的值。
[0048]
为了将ph调节在上述范围内，化妆料组合物可以进一步包含氢氧化钾或氨丁三醇等的ph调节剂。
[0049]
在本发明中，上述低共熔混合物可以以高含量添加到化妆料组合物中，并且即使在室温和冷藏保管时也可以稳定地溶解，从而保持维生素c的功效，因此可以保持产品的品质。
[0050]
在本发明的包含维生素c的低共熔混合物的化妆料组合物中，基于100重量份的整体化妆料组合物，维生素c的含量可以为0.00001重量份以上、0.01重量份以上、1重量份以上、5重量份以上、8重量份以上、10重量份以上、12重量份以上、15重量份以上、18重量份以上、20重量份以上，并且可以为65重量份以下、60重量份以下、55重量份以下、52重量份以下、50重量份以下、48重量份以下、45重量份以下、40重量份以下、35重量份以下、33重量份以下，但不限于此。
[0051]
具体地，基于100重量份的整体化妆料组合物，维生素c可以以0.00001至65重量份、1至60重量份、5至55重量份、5至50重量份、10至45重量份、10至40重量份、15至40重量份、20至40重量份、20至35重量份的量包含。
[0052]
基于100重量份的整体化妆料组合物，根据本发明的化妆料组合物可以包含0.00001至80重量份、例如0.001至75重量份、0.1至70重量份、或0.5至60重量份、或0.1至50
重量份的上述低共熔混合物，但不限于此。上述低共熔混合物的含量可以根据化妆料组合物的剂型适当调节。
[0053]
除了低共熔混合物之外，本发明的化妆料组合物还可以包含溶剂。此处，上述溶剂可以是水性溶剂、非水性溶剂或它们的混合物。
[0054]
在本发明中，“非水性溶剂”可以是指包含除水以外的溶剂的溶剂。作为除水以外的溶剂，可以是多元醇，特别是选自由乙二醇(ethylene glycol)、1,2-丙二醇(丙二醇，propylene glycol)、1,3-丙二醇(1,3-propanediol)、1,3-丁二醇(1,3-butylene glycol)、戊二醇(pentylene glycol)、己二醇(hexylene glycol)、甘油(glycerin)、双甘油(diglycerin)、二丙二醇(dipropylene glycol)及其混合物组成的组中的一种以上，更具体地，可以是选自由丙二醇、丁二醇、二丙二醇、甘油及其混合物组成的组中的一种以上。
[0055]
在本发明中，溶剂与类型无关，最多可包含相对于整体组合物的重量的90重量％。
[0056]
具体地，在本发明中，相对于整体组合物的重量，溶剂的含量可以为10重量％以上、15重量％以上、25重量％以上、30重量％以上、35重量％以上、或40重量％以上，并且可以为90重量％以下、80重量％以下、70重量％以下、65重量％以下、60重量％以下、或55重量％以下。更具体地，相对于整体组合物的重量，溶剂的含量可以为30至70重量％、35至70重量％、35至65重量％、40至65重量％、35至60重量％、40至60重量％、35至55重量％、或40至55重量％，但不限于此。
[0057]
当本发明的化妆料组合物包含非水性溶剂时，相对于整体组合物的重量，非水性溶剂中所含的除水以外的溶剂的含量可以为10重量％以上、15重量％以上、25重量％以上、30重量％以上、或40重量％以上，并且可以为80重量％以下、70重量％以下、或60重量％以下。
[0058]
在本发明中，当使用水作为组合物中的溶剂时，相对于整体组合物的重量，水的含量可以为1重量％以上、10重量％以上、15重量％以上、20重量％以上、或25重量％以上，并且可以为80重量％以下、70重量％以下、60重量％以下或55重量％以下。
[0059]
维生素c可以较大量地溶解在水中，但存在因快速氧化作用而容易分解的问题，因此，为了提高氧化稳定性，使用非水性溶剂或者将维生素c低温保管，但存在使用非水性溶剂时溶解度降低，并且低温保管时发生维生素c的析出的担忧。因此，如本发明一样，当将维生素c与甜菜碱一起以低共熔混合物的形态包含时，可以提高氧化稳定性，防止在室温和低温下的析出，进而可以提高难以渗透皮肤角质层的维生素c的皮肤透过度。
[0060]
在本发明中，“氧化稳定性”是指i)防止维生素c被光、热、水或组成中的其他成分分解，具体地防止被水或热分解。特别是，在本发明中，氧化稳定的情况可以是指在30至60℃下保管4周时，与初始浓度相比，维生素c的浓度保持在例如70％以上、75％以上、80％以上、85％以上、87％以上、88％以上、89％以上、或90％以上。更具体地，在本发明中，氧化稳定的情况可以是指在40至50℃下保管4周时，与初始浓度相比，保持在85％以上、86％以上、87％以上、88％以上、89％以上、90％以上、91％以上、92％以上、93％以上、94％以上、95％以上、96％以上。
[0061]
在本发明中，“低温析出”可以是指溶解的成分在低温下保管1周时析出，此处，低温可以为10℃以下、8℃以下、6℃以下、4℃以下、2℃以下、0℃以下，具体地，可以为5℃以下、4℃以下、3℃以下。
[0062]
本发明还可以提供用于美白皮肤、改善肤色或改善色素沉着的化妆料组合物，其包含上述低共熔混合物。
[0063]
另外，本发明可以提供一种用于改善皮肤皱纹或弹性的化妆料组合物，其包含上述低共熔混合物。
[0064]
作为另一种实施方式，本发明提供一种美白皮肤方法、改善肤色方法或改善色素沉着方法，包括将包含含有维生素c和甜菜碱的低共熔混合物的化妆料组合物涂布或投放到皮肤的步骤。
[0065]
作为另一种实施方式，本发明提供一种皮肤皱纹改善方法或皮肤弹性改善方法，包括将包含含有维生素c和甜菜碱的低共熔混合物的化妆料组合物涂布或投放到皮肤的步骤。
[0066]
作为另一种实施方式，本发明提供一种含有维生素c和甜菜碱的低共熔混合物在制备用于美白皮肤、改善肤色或改善色素沉着的化妆料组合物中的用途。
[0067]
作为另一种实施方式，本发明提供一种含有维生素c和甜菜碱的低共熔混合物在制备用于皮肤皱纹改善或皮肤弹性改善的化妆料组合物中的用途。
[0068]
此处，“皮肤美白”、“肤色改善”和“色素沉着改善”均是指防止黑色素色素的沉着、抑制黑斑或雀斑的生成或者提亮肤色等的所有作用。
[0069]
另外，“皮肤皱纹改善”是指抑制皮肤上生成皱纹或者缓解生成的皱纹，“皮肤弹性改善”是指缓解皮肤下垂或松弛的程度。
[0070]
如本发明一样，当以低共熔混合物的形态包含维生素c时，除了维生素c的氧化稳定性和皮肤透过度之外，还可以改善诸如皮肤美白、皮肤皱纹或弹性改善等化妆学上有效的效果。
[0071]
本发明的化妆料组合物还可以包含常规化妆品中可以使用的所有类型的成分，例如保湿剂，例如甘油、丁二醇、丙二醇、己二醇、甲基葡糖醇聚醚-20、双甘油、乙基己基甘油；紫外线阻断剂，例如甲氧基肉桂酸乙基己酯、水杨酸乙基己酯、乙基己基三嗪酮、奥克立林、双乙基己氧苯酚甲氧苯基三嗪；ph调节剂，例如三乙醇胺；增稠剂，例如卡波姆、黄原胶、丙烯酸酯/c10-30烷基丙烯酸酯交联聚合物、透明质酸；防腐剂，例如苯氧乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯；抗氧化剂，例如bht、乙基抗坏血酸醚、抗坏血酸；皮肤调理剂，例如β-葡聚糖；表面活性剂，例如鲸蜡硬脂基葡糖苷和脱水山梨糖醇硬脂酸酯；香料或色素，并且对其成分没有限制。
[0072]
根据本发明的化妆料组合物还可以制备成本领域常规制备的任何剂型。例如，上述化妆料组合物可以具有诸如柔肤水或营养化妆水等化妆水、喷雾型化妆水、诸如面部露、身体露等乳液、诸如营养霜、保湿霜、眼霜等霜、棒(stick)、精华素、化妆软膏、喷雾、凝胶、面膜、防晒霜、妆前底乳、液体型或喷雾型等的粉底、粉末、诸如清洁露、清洁油等卸妆剂、诸如清洁泡沫、皂、沐浴露等清洁剂等的剂型，但不限于此。
[0073]
在一个具体例中，上述化妆料组合物的剂型可以是膏(balm)、油包水型(w/o)、水包油型(o/w)、可溶化剂型或油剂型。
[0074]
另外，本发明提供了一种上述化妆料组合物的制备方法。
[0075]
具体地，包括混合维生素c和甜菜碱来制备低共熔混合物的步骤；以及制备包含上述低共熔混合物的化妆料组合物的步骤。
[0076]
上述低共熔混合物的制备步骤可以包括进一步添加纯净水的步骤。
[0077]
在上述制备方法中，维生素c、甜菜碱和纯净水、低共熔混合物和化妆料组合物可以直接应用前述内容。
[0078]
另外，上述低共熔混合物的制备步骤可以包括：混合维生素c和甜菜碱的步骤；以及将混合物在100至5000rpm和45至95℃的温度条件下搅拌的步骤。
[0079]
此处，上述搅拌步骤可以搅拌至形成低共熔混合物的成分均匀为止。更优选地，在确认低共熔混合物的均匀性之后，可以再搅拌0.5至2分钟。
[0080]
另外，作为确认低共熔混合物的均匀性的方法，可以利用：
[0081]
i)将熔解至各成分的熔解度以上的过熔溶液即低共熔混合物置于黑色背景前并通过照射光确认时，确认是否在没有沉淀物的情况下形成透明混合物的方法，以及
[0082]
ii)形成低共熔混合物时，在低于各成分熔点的温度下形成单一熔点，因此利用dsc(差示扫描量热法，differential scanning calorimetry)装置确认熔点的方法。
[0083]
上述化妆料组合物的制备步骤可以包括与用于制备化妆料剂型的成分混合的步骤。上述成分没有限制，只要其是通常添加到化妆料剂型中的成分即可。
[0084]
本发明还提供一种包含含有维生素c和甜菜碱的低共熔混合物(eutectic mixture)的医药外品组合物。
[0085]
在本发明的医药外品组合物中，维生素c、甜菜碱、低共熔混合物、它们的含量等可以直接应用所有化妆料组合物中记述的内容。
[0086]
另外，本发明提供一种含有上述低共熔混合物的用于美白皮肤、改善肤色或改善色素沉着的医药外品组合物。
[0087]
另外，本发明提供一种包含上述低共熔混合物的用于皮肤皱纹改善或皮肤弹性改善的医药外品组合物。
[0088]
作为另一种实施方式，本发明提供一种美白皮肤方法、改善肤色方法或改善色素沉着方法，包括将包含含有维生素c和甜菜碱的低共熔混合物的医药外品组合物涂布或投放到皮肤的步骤。
[0089]
作为另一种实施方式，本发明提供一种皮肤皱纹改善方法或皮肤弹性改善方法，包括将包含含有维生素c和甜菜碱的低共熔混合物的医药外品组合物涂布或投放到皮肤的步骤。
[0090]
作为另一种实施方式，本发明提供一种含有维生素c和甜菜碱的低共熔混合物在制备用于美白皮肤、改善肤色或改善色素沉着的医药外品组合物中的用途。
[0091]
作为另一种实施方式，本发明提供一种含有维生素c和甜菜碱的低共熔混合物在制备用于皮肤皱纹改善或皮肤弹性改善的医药外品组合物中的用途。
[0092]
另外，本发明提供一种上述医药外品组合物的制备方法。
[0093]
具体地，包括：混合维生素c和甜菜碱来制备低共熔混合物的步骤；以及添加上述低共熔混合物来制备医药外品组合物的步骤。
[0094]
在上述医药外品组合物的制备方法中，关于维生素c、甜菜碱、纯净水、低共熔混合物及医药外品组合物，可以直接应用前述的内容。
[0095]
根据本发明的化妆料组合物及医药外品组合物中包含的上述成分各自优选地，可以在不超过中国政府制定的《化妆品安全技术规范》中规定的最大使用量的范围内包含在
本发明的化妆料组合物中。
[0096]
在下文中，将通过以下实验例详细说明本发明。但，以下实验例仅用于示例本发明，并且本发明的内容不受以下实验例的限制。另外，这些实验例只是为了帮助理解本发明，因此本发明的范围在任何意义上均不受其限制。
[0097]
实施例
[0098]
实验例1.确认包含维生素c的低共熔混合物的室温和低温稳定性
[0099]
根据表1和2的摩尔比准备抗坏血酸和甜菜碱作为构成低共熔混合物的成分，并添加纯净水使得相对于低共熔混合物的总重量，纯净水的含量为14重量％。将根据表1和2的成分在80℃下以500rpm搅拌5分钟，确认形成液体状态的低共熔混合物后，停止加热，进行自然冷却。
[0100]
为了评价低共熔混合物的稳定性，将制备的低共熔混合物在室温和低温(4℃)下分别保管1周，确认是否稳定地保持低共熔混合物的形态而不会发生析出。抗坏血酸与甜菜碱的摩尔比及其稳定性的比较结果示于下表1及表2和图1中。
[0101]
[低共熔混合物稳定性评价标准]
[0102]
x:没有析出
[0103]
o:发生析出
[0104]
[表1]
[0105] 制备例1制备例2制备例3制备例4制备例5制备例6抗坏血酸：甜菜碱的摩尔比2.5:12:11:11:21:41:5抗坏血酸64.060.851.636.923.519.9甜菜碱17.020.234.449.162.566.1氢氧化钾5.05.00.00.00.00.0纯净水14.014.014.014.014.014.0共计100100100100100100室温析出xxxxxx
[0106]
[表2]
[0107] 制备例2制备例3制备例4制备例5抗坏血酸：甜菜碱的摩尔比2:11:11:21:4抗坏血酸60.851.636.923.5甜菜碱20.234.449.162.5氢氧化钾5.00.00.00.0纯净水14.014.014.014.0共计100100100100低温(4℃)析出xxxx
[0108]
如上表1和2所示，抗坏血酸和甜菜碱的低共熔混合物即使在室温下保管1周也很稳定而没有析出，并且即使在4℃下保管1周也没有析出，因此可以确认即使在低温下也很稳定。
[0109]
实验例2.评价包含维生素c的低共熔混合物的组合物的稳定性
[0110]
使用如下表3所示的组成和含量制备实施例和比较例组合物。
[0111]
首先，实施例组合物通过根据上述实验例1形成制备例2的低共熔混合物，然后投入表3的所有剩余成分，再搅拌5分钟，然后自然冷却来制备。比较例组合物通过投入下表3的所有成分，搅拌5分钟，然后自然冷却来制备。
[0112]
以与上述实验例1相同的方式评价组合物的稳定性。具体地，确认了将制备的实施例和比较例组合物在4℃下保管1周时是否发生析出。
[0113]
[表3]
[0114][0115]
如表3所示，仅包含抗坏血酸的比较例1或简单混合不是低共熔混合物形态的抗坏血酸和甜菜碱的比较例2均在低温下析出，维生素c没有稳定熔解。
[0116]
然而，可以确认，以低共熔混合物形态包含维生素c和甜菜碱的实施例1至4均在低温下稳定地溶解而没有析出。
[0117]
特别是，以往在包含大量多元醇作为溶剂的组合物中，维生素c具有低的溶解度，因此在低温下保管时存在析出的问题，但当将维生素c以低共熔混合物的形态包含时，如在实施例1至4中可以确认，即使在包含多元醇(丙二醇、丁二醇、二丙二醇或甘油)的组合物中，在低温下也稳定地溶解而不会析出。
[0118]
实验例3.确认皮肤透过效果
[0119]
为了确认低共熔混合物的皮肤透过提高效果，制备了将维生素c以低共熔混合物形态包含的实施例组合物和以简单混合物的形态包含的比较例组合物。
[0120]
此处，为了将简单混合物和低共熔混合物中的维生素c的含量设定为相同，计算低共熔混合物中的维生素c的浓度，并添加适当含量的低共熔混合物。使用实验例1中制备的制备例3的低共熔混合物作为低共熔混合物，将其与根据下表4的组成的成分混合，并在室温(25度)下以500rpm搅拌5分钟来制备。
[0121]
对于制备的实施例组合物和比较例组合物，通过以下方法确认皮肤透过度。
[0122]
《测量皮肤透过度》
[0123]
将由角质、表皮和一部分的真皮构成的猪皮(面积：2.5cm
×
2.5cm，厚度：1mm，apures co.,ltd.)放置在受体(receptor)被2.5ml磷酸盐缓冲盐水(phosphate-buffered saline)(pbs,ph 7.4,gibco)填充的弗兰兹池(franz cell)中。分别准备各100μl的组合
物，涂布于均匀面积的猪皮上，然后在37℃的温度和50％湿度条件下放置8小时。之后，去除未吸收的溶液，分析渗透到皮肤和受体中的维生素c的量。首先，为了定量吸收于角质层的维生素c的量，将角质采集用剥离胶带(d-squame,cuderm)贴在猪皮表面，用d-squame压力施加器(d-squame pressure applicator)(cuderm)按压10秒，然后摘除并装入1.5ml管中，在同一皮肤部位再重复进行两次该过程。在各管中放入1ml pbs溶液，以溶出吸收于采集的角质的维生素c。将剩余的猪皮(表皮和真皮的一部分)切细，放入pbs溶液(1ml)中，然后用组织破碎机均质化以溶出皮肤内吸收的维生素c。为了测量渗透到角质、表皮、真皮和受体中的维生素c的量，利用了megazyme公司的抗坏血酸检测试剂盒(ascorbic acid assay kit)(k-asco)。这是利用了l-抗坏血酸还原mtt(3-(4,5-二甲基噻唑基-2)-2,5-二苯基溴化四唑，3-(4,5-dimethylthiazolyl-2)-2,5-diphenyltetrazolium bromide)形成mtt-甲臜(mtt-formazan)，同时在578nm波长处的吸光度与l-抗坏血酸的量定量成比例增加的原理。因此，维生素c的皮肤透过量是通过将角质、表皮、真皮和受体中测量的维生素c量全部加起来计算的。
[0124]
[表4]
[0125] 实施例5实施例6实施例7比较例3比较例4制备例3的低共熔混合物48.448.448.4
‑‑
抗坏血酸
‑‑‑
2525纯净水51.61.31.375-丙二醇-50.3
‑‑
75甘油
‑‑
50.3
‑‑
共计100100100100100透过量(μg)1138680953626376
[0126]
如表4所示，可以确认在相同的维生素c的含量下，以低共熔混合物形态包含维生素c的实施例5至7与简单混合维生素c的比较例3和4相比，维生素c向皮肤内传递的量更多。
[0127]
同时，以与上述实施例5至7以及比较例3和4的组合物相同的方式，根据下表5的组成制备实施例8以及比较例5和6的组合物，并确认其皮肤透过度。
[0128]
此处，使用实验例1中制备的制备例2的低共熔混合物作为低共熔混合物，将其添加到甘油中并在室温下搅拌以制备实施例8的组合物。比较例5和6的组合物通过将根据下表5的组成的成分投入甘油中并在室温(25度)下以500rpm搅拌5分钟来制备。
[0129]
[表5]
[0130] 实施例8比较例5比较例6制备例2的低共熔混合物49.3
‑‑
抗坏血酸-30.030.0甜菜碱-10.0-纯净水0.16.96.9甘油50.650.650.6氢氧化钾-2.52.5共计10010090透过量(μg)351163103
[0131]
如表5所示，可以确认包含制备例2的低共熔混合物的实施例8与简单混合维生素c的比较例5和6相比，维生素c向皮肤内传递的量更多。
[0132]
因此，可以看出，对于只是将维生素c和甜菜碱简单一起使用(比较例5)，无法获得与通过制备成低共熔混合物而包含的相同的效果，并且通过以低共熔混合物的形态包含，从而显示出高的皮肤透过量。
[0133]
实验例4.评价维生素c的效力保持
[0134]
使用下表6的组成制备包含高浓度的维生素c的低共熔混合物或简单维生素c的化妆料组合物。具体地，将实验例1中制备的制备例3的低共熔混合物与根据下表6的组成的成分混合以制备实施例9的组合物。对于比较例组合物，作为简单维生素c的形态，通过在不包含水的情况下制备，从而制备成非水性组合物。对于制备的实施例和比较例组合物，比较了维生素c在高温下的稳定性。
[0135]
[表6]
[0136][0137]
为了确认在以低共熔混合物的形态包含维生素c的化妆料组合物中维生素c的高温稳定性，将上述实施例9和比较例7的组合物在40℃和50℃下保管4周后，确认维生素c的效力，其结果示于表7中。
[0138]
[表7]
[0139]
保管温度实施例9比较例740℃93.3％87.1％50℃90.1％69.2％
[0140]
如上表7所示，可以确认以低共熔混合物的形态包含维生素c的实施例9的组合物
尽管在包含大量水(即维生素c容易被氧化的环境)的组成下，与作为非水性组合物的比较例7相比，维生素c也更稳定地保持在组合物中而没有分解。
[0141]
实验例5.确认维生素c-甜菜碱低共熔混合物的结构
[0142]
在本实验中，为了确认表1的制备例2的低共熔混合物的具体结构，实施了红外光谱分析和nmr分析。
[0143]
1)红外光谱分析
[0144]
抗坏血酸-甜菜碱低共熔混合物的形成和相互作用可以通过测量红外光谱法(infrared spectroscopy)来确认。据悉，低共熔混合物的形成依赖于氢键，在红外光谱法中，可以通过键长的变化和对应于氢键的振动来解释氢键。为了与低共熔混合物进行比较，还同时测量了与低共熔混合物相同组成的简单混合物(物理混合物，physical mixture)。简单混合物通过将与表1的抗坏血酸-甜菜碱低共熔混合物(摩尔比2:1)相同组成的材料在室温(25度)下以500rpm搅拌5分钟，并确认充分均匀混合而制备。另外，通过参考数据测量并比较了抗坏血酸和甜菜碱水溶液各自的红外光谱。首先，在图3a的红外光谱中，对应于抗坏血酸的特征性c＝c和c＝o的伸缩振动的谱带分别在1679cm-1
和1758cm-1
处得到确认。相反，在甜菜碱的红外光谱中，在1621cm-1
和1399cm-1
处分别观察到对应于羧酸酯基(coo-)和c-n的伸缩振动的特征性谱带。在图3a和b中，示出了在1000-2000cm-1
和2000-4000cm-1
的波数领域测量的低共熔混合物和简单混合物的红外光谱。简单混合物和低共熔混合物的光谱虽然是抗坏血酸和甜菜碱重叠的形态，但与简单混合物相比，在低共熔混合物中确认了几个振动谱带的移动。如图3a所示，甜菜碱的coo-振动谱带从1623cm-1
(简单混合物)红移(red shift)至1603cm-1
。这种红移现象是分子内键长增加，意味着形成了抗坏血酸和甜菜碱之间的物理键。不仅如此，在图3b中，在简单混合物中出现的抗坏血酸的尖锐(sharp)o-h伸缩振动峰(3212,3311,3406,3523cm-1
)显示为峰宽非常宽的一个谱带((3260-3356cm-1
)。这种谱带的加宽也表明，当形成低共熔混合物时，在简单的抗坏血酸和甜菜碱之间形成了许多氢键。
[0145]
2)nmr分析
[0146]
为了进一步验证抗坏血酸和甜菜碱之间的相互作用，进行了抗坏血酸、甜菜碱和抗坏血酸-甜菜碱低共熔混合物的1h核磁共振光谱分析(nuclear magnetic resonance spectroscopy,nmr)。
[0147]
如图4所示，即使在形成低共熔混合物时，对应于抗坏血酸和甜菜碱的化学位移(chemical shift)也仍然存在，这表明形成低共熔混合物时不涉及化学反应并且仅应用物理相互作用。因此，通过构成低共熔混合物的材料之间形成的氢键，存在于抗坏血酸和甜菜碱中的质子(proton)的电子密度发生了变化，其结果出现了化学位移的移动。
[0148]
特别是，在抗坏血酸的内酯(lactone)环结构中连接至4c的质子峰(proton peak)(4.958-4.955ppm)的情况下，出现了高磁场位移(upfield shift)，如图5所示，随着抗坏血酸的比例增加，观察到更大的位移(抗坏血酸:甜菜碱的摩尔比分别为图5的(a)为1:1，(b)为1.5:1，(c)为2:1，在抗坏血酸:甜菜碱＝1:1摩尔比下移动至4.894-4.890ppm，在1.5:1下移动至4.857-4.854ppm，在2:1下移动至4.812-4.808ppm)。这种高磁场位移表示分子间相互作用使质子周围的电子密度增加，可以证明抗坏血酸和甜菜碱之间的氢键形成。
[0149]
实验例6：评价皮肤美白、肤色均匀度、皱纹和弹性改善效果
[0150]
让10名20～30多岁的女性受试者，将包含上述实验例1中制备的制备例2的低共熔混合物的安瓿(23％维生素c)每晚一次涂抹于整体面部皮肤4周后，测量4周的皮肤亮度、肤色均匀度、皮肤皱纹和弹性程度来确认皮肤改善效果。安瓿的组成和含量如下表8所示。
[0151]
[表8]
[0152] 安瓿剂型例制备例2的低共熔混合物37.80纯净水18.40丙二醇26.40二丙二醇10.50甘油3.00右泛醇1.50edta二钠0.051,2-己二醇1.50焦亚硫酸钠0.20黄原胶0.15氢氧化钾0.50共计100.00
[0153]
所有测量均在恒温恒湿环境中通过20分钟受试者的皮肤适应达到相同的皮肤条件后进行。
[0154]
对于皮肤亮度，利用色度计(chroma meter)cr-400装置在使用安瓿前(0周)和使用安瓿2周及4周后分别测量l值，即面部同一部位的亮度。
[0155]
对于肤色均匀度和皱纹，利用了anteracs(miravex)装置。对于皮肤均匀度，在同一脸颊部位使用安瓿2周及4周后测量皮肤的均匀度(uniformity)值，并且肤色均匀度改善率是基于使用安瓿前的均匀度值计算使用后均匀度增加的程度的值。
[0156]
皱纹改善率是以相对于法令纹部位的antera 3d测量值(压痕指数，indentation index)的第0周值的2周及4周的皱纹压痕指数的减少度计算的值。对于皮肤弹性，利用mpa580(courage and khazaka electronic gmbh)装置，在实验开始前和使用安瓿2周及4周后的同一脸颊部位测量皮肤的弹性度(r5,净弹性(net elasticity))。皮肤弹性改善率是计算相对于使用安瓿前r5值的使用安瓿后r5值的增加程度的值。上述测量结果分别示于图6和7中。
[0157]
如图6和7所示，可以看出，当将维生素c的低共熔混合物涂布于皮肤时，在皮肤美白、肤色均匀度、皮肤皱纹和弹性方面显示出改善的效果。