利用STAT1/3抑制剂与溶瘤型疱疹病毒的组合物和方法与流程

本发明申请总体上涉及具有溶瘤型hsv和tat1/3抑制剂的组合物，以及用溶瘤型hsv和tat1/3抑制剂治疗癌症。

背景技术：

1、溶瘤病毒(ov)已经成为通过溶瘤效应特异性破坏癌细胞的一种治疗选择，溶瘤效应是一种特征在于通过病毒裂解复制的过程实现癌细胞裂解的杀伤机制。除了通过病毒直接杀死细胞之外，还证实了病毒诱导的免疫应答在ov治疗中起到了关键作用。由于ov能够通过区别于常规化疗和放疗的杀伤效应的机制来杀死癌细胞，因而ov对于治疗对常规治疗无响应的癌症可能是理想的。在各种ov中，1型单纯疱疹病毒系ov是最先进的，例如，美国fda已经批准了疱疹病毒系ov(t-vec)用于治疗黑素瘤。

2、最经常研究的用于治疗癌症(例如多形性胶质母细胞瘤(gbm))的溶瘤病毒是具有γ34.5缺失的突变体hsv-1(1型单纯疱疹病毒)。尽管其具有优异的安全性，但许多ohsv-1的临床功效仍然令人失望。

3、本发明克服了目前商业化溶瘤病毒的缺点，并且进一步提供了另外的不可预期的益处。

技术实现思路

1、简言之，本发明提供了治疗癌症的组合物和方法。在某些实施方式中，提供了包括同时或序贯施用溶瘤病毒和stat1/3抑制剂的方法。在实施方式中，癌症是乳腺癌、脑癌(例如，胶质母细胞瘤)、结肠癌、肺癌或前列腺癌。在实施方式中，溶瘤病毒是单纯疱疹病毒，并且在某些实施方式中，hsv是hsv-1。在本发明的在某些实施方式中，溶瘤病毒是具有缺陷型病毒核糖核酸酶还原酶基因的hsv-1，并且可选地，具有完整icp34.5基因。

2、在实施方式中，溶瘤型单纯疱疹病毒基因组中icp34.5基因的所有拷贝经过修饰，以使得该icp34.5基因不能表达功能性icp34.5基因产物。在其他的实施方式中，icp6基因经过修饰，以使得该icp6基因不能表达功能性icp6基因产物。在其他的实施方式中，icp47基因经过修饰，以使得该icp47基因不能表达功能性icp47基因产物。在一些实施方式中，ohsv具有icp34.5和icp47基因二者的修饰。在实施方式中，溶瘤型单纯疱疹病毒是毒株17的突变体。在另外其他的实施方式中，溶瘤病毒是hsv-1hrr3毒株。在实施方式中，stat1/3抑制剂是硝基呋喃；在某些实施方式中，硝基呋喃是硝呋酚酰肼或其衍生物或类似物。在其他的实施方式中，stat1/3抑制剂是c16或其衍生物或类似物。

3、要求保护的技术方案还涉及包含溶瘤病毒和stat1/3抑制剂的药物组合物。在实施方式中，该溶瘤病毒是单纯疱疹病毒，并且在某些实施方式中，hsv是hsv-1。在本发明的在某些实施方式中，该溶瘤病毒是具有缺陷型病毒核糖核酸酶还原酶基因的hsv-1，并且可选地，具有完整icp34.5基因。在实施方式中，溶瘤型单纯疱疹病毒基因组中icp34.5基因的所有拷贝经过修饰，以使得该icp34.5基因不能表达功能性icp34.5基因产物。在其他的实施方式中，icp6基因经过修饰以使得该icp6基因不能表达功能性icp6基因产物。在其他的实施方式中，icp47基因经过修饰以使得该icp47基因不能表达功能性icp47基因产物。在一些实施方式中，ohsv经过icp34.5和icp47基因二者的修饰。在实施方式中，该溶瘤型单纯疱疹病毒是毒株17的突变体。在实施方式中，stat1/3抑制剂是硝基呋喃；在某些实施方式中，硝基呋喃是硝呋酚酰肼或其衍生物或类似物。在其他的实施方式中，stat1/3抑制剂是c16或其衍生物或类似物。

4、要求保护的技术方案还涉及包含预定量溶瘤病毒和与定量化疗剂的试剂盒，其中该溶瘤病毒可以是单纯疱疹病毒，该化疗剂是stat1/3抑制剂。在实施方式中，该溶瘤病毒是单纯疱疹病毒，并且在某些实施方式中，hsv是hsv-1。在本发明的某些实施方式中，溶瘤病毒是具有缺陷型病毒核糖核酸酶还原酶基因的hsv-1，并且可选地具有完整icp34.5基因。在其他的实施方式中，溶瘤型单纯疱疹病毒基因组中icp34.5基因中的所有拷贝经过修饰，以使得该icp34.5基因不能表达功能性icp34.5基因产物。在其他的实施方式中，icp47基因经过修饰以使得该icp47基因不能表达功能性icp47基因产物。在其他的实施方式中，icp6基因经过修饰以使得该icp6基因不能表达功能性icp6基因产物。在一些实施方式中，ohsv经过icp34.5和icp47基因二者的修饰。在实施方式中，该溶瘤型单纯疱疹病毒是毒株17的突变体。在实施方式中，该stat1/3抑制剂是硝基呋喃；在某些实施方式中，硝基呋喃是硝呋酚酰肼或其衍生物或类似物。在其他的实施方式中，该stat1/3抑制剂是c16或其衍生物或类似物。

5、本文披露内容提供了溶瘤病毒和stat 1/3磷酸化抑制剂的组合，其在预防、治疗和/或缓解癌症(例如，乳腺癌、脑癌(例如，胶质母细胞瘤)、结肠癌、肺癌或前列腺癌)的影响中尤其有效。在一个方面，提供了改善溶瘤病毒治疗效力的方法，包括以下步骤：(a)向受试者施用溶瘤病毒；以及(b)以有效减少小胶质细胞-或巨噬细胞-介导的溶瘤病毒复制的抑制的量施用stat1/3抑制剂。在一些实施方式中，溶瘤病毒和stat1/3抑制剂一起施用；在其他的实施方式中，溶瘤病毒和stat1/3抑制剂连续施用。在某些实施方式中，stat1/3抑制剂是c16、其盐形式、其前药、或其衍生物。在其他的实施方式中，stat1/3抑制剂是硝基呋喃，并且在具体的实施方式中，硝基呋喃是硝呋酚酰肼或其衍生物或类似物。

6、stat 1/3磷酸化抑制剂(例如c16和硝呋酚酰肼)与溶瘤病毒共同施用对于阻止巨噬细胞和小胶质细胞抑制的溶瘤性病毒活性是有效的，从而增强溶瘤病毒的效力。

7、除了本文中所述的组合物之外，还提供了利用这样的组合物的各种方法。例如，提供了改善溶瘤病毒治疗的效力，以及改善癌细胞中溶瘤活性的方法(以及用于阻碍癌细胞中巨噬细胞和小胶质细胞抑制的溶瘤性病毒活性)。

8、参照以下的详细描述和附图将会使得本发明的这些和其他方面变的显而易见。

9、本文提供的简要说明以简化形式引入了某些概念，在下文的具体实施方式部分中将对其进行进一步详细描述。否则除非另有明确描述，该简要说明既不是意在确定所要求保护主题的关键或必需特征，也不是意在限制所要求保护主题的范围。

10、下文的描述提供了一种或多种实施方式的细节。与一种示例性实施方式相关联示出或描述的特征与其他实施方式的特征相组合。因此，能够将本文中任意不同实施方式进行组合以提供其他的实施方式。如果有必要采用如本文中确定的不同专利、申请或公开的概念，则可以改变实施方式的方面以提供另外的实施方式。根据说明书、附图和权利要求书将使得其他特征、目的和优点变得显而易见。

11、序列表的简要描述

12、seq id no 1    icp4的正向pcr引物。

13、seq id no 2    icp4的反向pcr引物。

14、seq id no 3    icp27的正向pcr引物。

15、seq id no 4    icp27的反向pcr引物。

16、seq id no 5    β-肌动蛋白的正向pcr引物。

17、seq id no 6    β-肌动蛋白的反向pcr引物。

18、seq id no 7    icp8的正向pcr引物。

19、seq id no 8    icp8的反向pcr引物。

20、seq id no 9    gc的正向pcr引物。

21、seq id no 10   gc的反向pcr引物。

22、seq id no 11   vp5的正向pcr引物。

23、seq id no 12   vp5的反向pcr引物。

24、seq id no 13   icp27的正向pcr引物。

25、seq id no 14   icp27的反向pcr引物。

26、seq id no 15   β-肌动蛋白的正向pcr引物。

27、seq id no 16   β-肌动蛋白的反向pcr引物。