一种化妆品组合物及其制备方法和用途与流程

1.本技术属于化妆品技术领域，具体涉及一种化妆品组合物及其制备方法和用途。


背景技术：

2.皮肤是一个多功能器官，随着皮肤年龄的增长，表皮层逐渐变薄，真-表皮连接区(dej)变扁平，真皮层逐渐变薄，并且胶原蛋白和弹性蛋白含量显著下降。胶原蛋白在皮肤中起着重要的作用，其含量对皮肤正常功能的维持起着重要作用。胶原蛋白为皮肤中主要的结构蛋白质，其主要为ⅰ型胶原蛋白，此外还含少量的ⅲ型或其他型胶原蛋白。ⅰ型和ⅲ型胶原蛋白为皮肤提供强度和弹性。ⅳ型胶原蛋白通过分子间的联系形成连续的三维网络，使dej中的透明板的锚丝及致密板下的锚纤维均附着于致密板。尽管促进胶原蛋白生成是化妆品领域研究的热点之一，但是，如何能够获得一种显著促进胶原蛋白生成的产品，仍是目前需要解决的课题。


技术实现要素：

3.针对现有技术存在的上述问题，本技术提供一种化妆品组合物，其能够有效、甚至显著提高胶原蛋白的生成。本技术还提供上述组合物的制备方法和用途。
4.具体来说，本技术涉及如下方面：
5.1.一种化妆品组合物，其中，所述组合物包括蓝铜肽和透明质酸类物质，其中所述透明质酸类物质的分子量为1kda-900kda。
6.2.根据项1所述的组合物，其中，所述透明质酸类物质与蓝铜肽的质量比为 1:1-50:1。
7.3.根据项1或2所述的组合物，其中，所述透明质酸类物质选自透明质酸或其盐、透明质酸衍生物或其盐中的一种或多种。
8.4.根据项1-3中任一项所述的化妆品组合物，其中，所述组合物还包括化妆品上可接受的辅料。
9.5.一种制备项1-4中任一项所述的化妆品组合物的方法，其中，包括以下步骤：将所述蓝铜肽和所述透明质酸类物质混合；或者将所述蓝铜肽制成第一剂，将所述透明质酸类物质制成第二剂。
10.6.项1-4中任一项所述的化妆品组合物在促进胶原蛋白生成中的用途。
11.7.根据项6所述的用途，其中，所述胶原蛋白包括iv型胶原蛋白。
12.8.根据项6或7所述的用途，所述组合物在抗衰中的用途。
13.9.根据项6-8中任一项所述的用途，所述组合物在促进真表皮连接层结构健康中的用途。
14.10.一种非治疗目的的美容方法，其包括将项1-4中任一项所述的化妆品组合物施用于皮肤表面。
15.本技术提供的化妆品组合物包括蓝铜肽和具有一定分子量的透明质酸或其盐，该
组合物除了具备透明质酸和蓝铜肽各自的功能，例如透明质酸的保湿功能，蓝铜肽的修复功能等以外，蓝铜肽和一定分子量的透明质酸组合使用还能够在促进胶原蛋白产生中发挥协同作用。
具体实施方式
16.下面结合实施例进一步说明本技术，应当理解，实施例仅用于进一步说明和阐释本技术，并非用于限制本技术。
17.除非另外定义，本说明书中有关技术的和科学的术语与本领域内的技术人员所通常理解的意思相同。虽然在实验或实际应用中可以应用与此间所述相似或相同的方法和材料，本文还是在下文中对材料和方法做了描述。在相冲突的情况下，以本说明书包括其中定义为准，另外，材料、方法和例子仅供说明，而不具限制性。以下结合具体实施例对本技术作进一步的说明，但不用来限制本技术的范围。
18.蓝铜肽，也称为三肽-1铜、蓝铜胜肽、三胜肽，结构为铜连接在甘氨酰-l
‑ꢀ
组氨酰-l-赖氨酸上，是一种天然存在于人血浆中的小型铜结合肽。它可以通过化学方法合成，也可以通过蛋白质的酶解产生。这种小分子的蛋白质具有极佳的安全性。大量研究表明，蓝铜肽具有改善皮肤老化状况的卓越功效，这使得蓝铜肽在抗衰老和保护皮肤的护肤品中不可或缺。此外，它还被证实可以极大地改善皮肤多种不良的问题，例如促进皮肤伤口的愈合、恢复受损成纤维细胞的功能、减少瘢痕、减少皱纹和紧致皮肤、减少色素沉着以及刺激胶原蛋白、弹性蛋白和糖胺聚糖的合成等，因此被广泛地应用于化妆品中。
19.透明质酸，是由n-乙酰氨基葡萄糖和葡萄糖醛酸的双糖重复单元构成的粘多糖类物质。透明质酸由于其特殊的分子组成结构和理化性质，对人体发挥着多重生理功能作用。透明质酸具有特殊的保水作用，高分子量的透明质酸在皮肤表面迅速形成一层透气的水化薄膜，水合软化皮肤角质层。低分子量的透明质酸则能直接渗入到真皮层，有效的改善皮肤的生理特性。
20.本技术的发明人经过研究发现，将一定分子量的透明质酸类物质和蓝铜肽组合使用可以协同促进胶原蛋白的生成。
21.基于此，本技术提供一种化妆品组合物，所述组合物包括蓝铜肽和透明质酸类物质。
22.其中，所述透明质酸类物质的分子量≤900kda，或≤800kda，或≤700kda，或≤600kda，或≤500kda，或≤400kda。
23.在一些实施方式中，所述透明质酸类物质的分子量为900kda、300kda、 30kda、或3kda。
24.其中，所述透明质酸类物质选自透明质酸或其盐、透明质酸衍生物或其盐中的一种或多种。
25.所述透明质酸或其盐可以为透明质酸或透明质酸钠、透明质酸钾、透明质酸锌、透明质酸钙、透明质酸银、透明质酸镁、透明质酸金、透明质酸钴等。
26.所述透明质酸衍生物或其盐可以为改性的透明质酸或其盐，例如，可以为乙酰化透明质酸或其盐、羟烷基化透明质酸或其盐、交联透明质酸或其盐等。
27.本技术的蓝铜肽可以是任何一种商购获得的蓝铜肽，也可以是通过本领域已知方
法制备得到的蓝铜肽。
28.在一些实施方式中，所述透明质酸类物质与蓝铜肽的质量比为1:1-50:1，例如可以为1.5:1、2:1、30:1、31:1、32:1、33:1、34:1、35:1、36:1、37:1、38:1、39:1、40:1、41:1、42:1、43:1、44:1、45:1、46:1、47:1、48:1、49:1。
29.在一些实施方式中，所述组合物包括蓝铜肽和透明质酸类物质，其中所述透明质酸类物质的分子量≤500kda，所述透明质酸类物质与蓝铜肽的质量比为2:1-50:1。
30.在一些实施方式中，所述组合物包括蓝铜肽和透明质酸类物质，其中所述透明质酸类物质的分子量≤300kda，所述透明质酸类物质与蓝铜肽的质量比为2.3:1-29:1。
31.在一些实施方式中，所述组合物包括蓝铜肽和透明质酸钠/钾，其中所述透明质酸钠/钾的分子量为300kda，所述透明质酸钠/钾与蓝铜肽的质量比为 2.3:1-29:1。
32.在一些实施方式中，所述组合物包括蓝铜肽和透明质酸钠/钾，其中所述透明质酸钠/钾的分子量为3kda，所述透明质酸钠/钾与蓝铜肽的质量比为 2.3:1-29:1。
33.在一些实施方式中，所述组合物包括蓝铜肽和乙酰化透明质酸钠/钾，其中所述乙酰化透明质酸钠/钾的分子量为30kda，所述乙酰化透明质酸钠/钾与蓝铜肽的质量比为2.3:1-29:1。
34.在一些实施方式中，所述组合物还包括化妆品上可接受的辅料。所述辅料包括但不限于增稠剂、着色剂、防腐剂，洗涤护肤助剂、油脂，乳化剂，保湿剂、肤用功效原料、香料香精等。所述洗涤护肤助剂包括但不限于溶剂、抗氧化剂等。所述肤用功效原料包括但不限于丁二醇、戊二醇、泛醇等。
35.本技术所述的组合物可以制成水剂、油剂、乳液剂、膏霜剂、凝胶剂、贴膜剂、粉剂、固体剂等化妆品领域常用的制剂形式。
36.本技术还提供包括上述任意一种化妆品组合物的制备方法，其步骤包括：将所述蓝铜肽和所述透明质酸类物质混合；或者将所述蓝铜肽制成第一剂，将所述透明质酸类物质制成第二剂。
37.本技术还提供上述化妆品组合物在促进胶原蛋白生成中的用途。
38.在一个或多个实施方式中，所述胶原蛋白包括ⅳ型胶原蛋白。
39.在一个或多个实施方式中，上述化妆品组合物在抗衰中的用途。
40.在一个或多个实施方式中，所述组合物在促进真表皮连接层结构健康中的用途。
41.本技术还提供一种非治疗目的的美容方法，其包括将上述的化妆品组合物施用于皮肤表面。
42.在一个或多个实施方式中，所述蓝铜肽和所述透明质酸类物质可以同时施用，也可以依次施用。例如可以首先施用所述蓝铜肽，之后再施用所述透明质酸类物质，也可以首先施用所述透明质酸类物质，之后再施用所述蓝铜肽。
43.实施例
44.本技术实施例所使用的原料和设备信息分别如表1和表2所示。
45.表1
[0046][0047][0048]
表2
[0049]
主要设备厂家&型号co2培养箱thermo，150i超净工作台苏净安泰，sw-cj-1fuva照射仪博溪生物
恒温箱泰斯特普通pcr仪博日荧光定量pcr仪biorad，cfx-96
[0050]
实施例1
[0051]
配制蓝铜肽和acha的水溶液，其中蓝铜肽的含量为10μg/ml，acha的分子量为30kda，含量为290μg/ml。
[0052]
实施例2
[0053]
配制蓝铜肽和acha的水溶液，其中蓝铜肽的含量为90μg/ml，acha的分子量为30kda，含量为210μg/ml。
[0054]
实施例3
[0055]
配制蓝铜肽和acha的水溶液，其中蓝铜肽的含量为30μg/ml，acha的分子量为30kda，含量为270μg/ml。
[0056]
实施例4
[0057]
配制蓝铜肽和micro-ha的水溶液，其中蓝铜肽的含量为30μg/ml， micro-ha的分子量为3kda，含量为270μg/ml。
[0058]
实施例5
[0059]
配制蓝铜肽和ha-tlm(3-5)的水溶液，其中蓝铜肽的含量为30μg/ml， ha-tlm的分子量为30kda，含量为270μg/ml。
[0060]
实施例6
[0061]
配制蓝铜肽和ha-tlm(20-40)的水溶液，其中蓝铜肽的含量为30μg/ml， ha-tlm(20-40)的分子量为300kda，含量为270μg/ml。
[0062]
实施例7
[0063]
配制蓝铜肽和ha-tlm的水溶液，其中蓝铜肽的含量为30μg/ml，ha-tlm的分子量为900kda，含量为270μg/ml。
[0064]
实施例8
[0065]
配制蓝铜肽和透明质酸钾的水溶液，其中蓝铜肽的含量为30μg/ml，透明质酸钾的分子量为30kda，含量为270μg/ml。
[0066]
实施例9
[0067]
配制蓝铜肽、ha-tlm(3-5)、丁二醇、和戊二醇、和泛醇的水溶液，其中蓝铜肽的含量为30μg/ml，ha-tlm的分子量为30kda，含量为270μg/ml，丁二醇含量为3000μg/ml，戊二醇含量为3000μg/ml，泛醇含量为5000μg/ml
[0068]
对比例1
[0069]
配制蓝铜肽的水溶液，其中蓝铜肽的含量为300μg/ml。
[0070]
对比例2
[0071]
配制micro-ha的水溶液，其中micro-ha的分子量为3kda，含量为300 μg/ml。
[0072]
对比例3
[0073]
配制acha的水溶液，其中acha的分子量为30kda，含量为300μg/ml。
[0074]
对比例4
[0075]
配制ha-tlm的水溶液，其中ha-tlm的分子量为300kda，含量为300 μg/ml。
[0076]
试验例
[0077]
将上述实施例和对比例制备的溶液作为受试物工作液进行细胞学测试，具体步骤如下：
[0078]
1)细胞接种：按4
×
104个/孔的接种密度接种成纤维细胞至24孔板，培养箱(37℃、5％co2)中孵育过夜。
[0079]
2)给药：待24孔板中细胞铺板率达到40％～60％时，将受试物工作液进行分组给药，每孔加样2ml，每组设3个复孔。给药完成后将6孔板放置在培养箱(37℃、5％co2)中培养24h。
[0080]
3)uva辐照：根据试验分组，对需要uva照射的组别进行30j/cm2的 uva辐照，置于培养箱(37℃、5％co2)中继续培养24h。
[0081]
4)收集细胞：培养24h后，收集细胞上清后，1ml/孔pbs清洗两次，每孔加入、1ml rnaiso plus，吹打裂解细胞后，收样。
[0082]
5)基因表达检测：对成纤维细胞进行rnaiso plus处理后收样，依据反转录试剂盒说明书，开展rna提取、反转录及荧光定量pcr操作，获得检测结果，即定量的荧光扩增倍数。
[0083]
6)结果统计分析：各组间比较采用t-test统计分析。置信度为95％。
[0084]
其中，同时进行空白组、阴性对照组和阳性对照组的测试。
[0085]
空白组中的步骤2)中不加入任何样品，并且步骤3)中不进行uva辐照，其他步骤同上。
[0086]
阴性对照组中的步骤2)中不加入任何样品，其他步骤同上。
[0087]
阳性对照组中的步骤2)中的受试物工作液为0.1μg/ml的tgf-β1，其他步骤同上。
[0088]
具体地，各实施例和对比例的反应条件如表3所示。
[0089]
表3
[0090][0091][0092]
测试结果如表4所示，其中，基因扩增倍数的平均值表征iv型胶原蛋白基因扩增倍数。上调率＝(测试样品的基因扩增倍数的平均值
–
阴性对照的基因扩增倍数的平均值)/阴性对照的基因扩增倍数的平均值。
[0093]
表4的结果显示，本技术的含有蓝铜肽和透明质酸的组合物可以使iv型胶原蛋白基因的表达明显提高，并且明显高于单独使用蓝铜肽或透明质酸类物质对iv型胶原蛋白基因表达的提高结果，证明本技术的组合物对于促进iv型胶原蛋白的产生具有协同作用。
[0094]
表4
[0095][0096]
注：na表示不适用。