一种具有缓解糖尿病足痛功效的制剂与制备方法和应用与流程

1.本发明属于外用制剂领域，具体涉及一种具有缓解糖尿病足痛功效的制剂与制备方法和应用。


背景技术：

2.糖尿病是由于胰腺胰岛素产生减少，或细胞对胰岛素不能正确反应而导致的疾病，其典型症状包括尿频、口渴和食欲增加等，甚至还会引起各种器官的长期损伤、功能障碍和衰竭。糖尿病的严重长期并发症会引起糖尿病周围神经病变，可导致疼痛、麻木、酸痛和皮肤对温度变化的敏感性降低的症状，常见于足部皮肤。糖尿病患者因下肢远端神经异常和不同程度的血管病变导致的足部感染、溃疡和深层组织破坏称之为糖尿病足。
3.糖尿病足患者常伴随着神经性疼痛，一般以双足对称出现，以肢体远端多见，或感觉烧灼样疼痛，或呈刀绞样或电击样的疼痛，更严重者甚至会造成肌无力、肌肉萎缩、进而造成足部溃疡、坏疽以至截肢，给患者带来极大的肉体和精神痛苦，对患者的生活质量和生存期造成了严重的影响。
4.目前市面上能够缓解糖尿病足神经性疼痛的产品主要以药物为主，包括营养神经类药物如甲钴胺、维生素b1、维生素b6，改善微循环类药物如胰激肽原酶，以及止痛类药物如阿米替林，双氯芬酸等，但这些药物具有不同程度的副作用，使用安全性低。
5.然而，现有的缓解糖尿病足患者神经痛类产品存在以下缺陷：
6.专利文件cn108567852b提供了一种防治糖尿病神经病变的药物组合物，以花椒或藤椒、辣椒及川芎或者其提取物为原料，按照一定的重量份计比例配伍组成。该药物组合物直接以花椒、藤椒、辣椒等多种植物为原料制备提取物，其安全性难以得到保障，且可能造成人体产生不适感。
7.专利文件wo2022053820a1提供了一种利用辣椒碱或辣椒碱样物质或trpv1激动剂预防糖尿病周围神经病变患者的糖尿病足溃疡的方法，其中辣椒碱或辣椒碱样物质或trpv1激动剂局部给予皮肤的一个或多个区域，主要以皮肤贴剂的形式给药，每平方厘米皮肤约350至约1000pg辣椒碱。该专利中提到可在使用辣椒碱前进行局部麻醉或服用口服镇痛剂，这说明所施加辣椒碱的剂量较高，若不使用显影的镇痛剂或麻醉剂可能会对人体产生较大的灼热感。
8.现有技术中针对糖尿病足神经病变的产品多存在使用刺激性强、安全性难以保证等问题，因此探索人体使用安全、舒适感强的制剂对缓解患者的神经性疼痛是十分有意义的。


技术实现要素：

9.针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种具有缓解糖尿病足痛功效的制剂与制备方法和应用。
10.为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
11.第一方面，本发明提供一种具有缓解糖尿病足痛功效的制剂，其特征在于，所述制剂的活性成分包括皮肤trpv通道激动剂和一氧化氮供体。
12.本发明创造性地将皮肤trpv通道激动剂和一氧化氮供体联合应用于缓解糖尿病足痛中，其中皮肤trpv通道激动剂可以与trpv受体结合，激活细胞膜离子通道，促进钙离子内流，胞内钙离子浓度升高，进而促进神经元及其纤维释放神经肽，如神经激肽、血管活性肠肽以及兴奋性氨基酸等，待神经肽耗竭可抑制神经肽的形成，并进一步抑制神经元的传导作用，阻断疼痛由外周神经向中枢神经的传导通路，使伤害性神经元末端脱敏，起到止痛作用，此外，皮肤trpv通道激动剂可以与trpv受体结合还会降低局部皮肤的温度，减少局部红肿热痛造成的细胞内氧气及营养物质不足的胁迫现象，进一步加快患处的恢复；一氧化氮供体释放的一氧化氮具有脂溶性，其不需要任何中介机制就可快速扩散通过生物膜，在血管内皮细胞里产生的一氧化氮气体，可以快速渗透出细胞膜向下扩散进入平滑肌细胞，作用于平滑肌细胞，使其松弛，扩张血管，促进微循环，增加血流量，减轻炎症反应，降低肿胀，辅助提高缓痛作用。皮肤trpv通道激动剂和一氧化氮供体二者联合应用，相辅相成，在神经元末端脱敏，痛觉神经钝化，缓解糖尿病足痛，改善微循环，缓解局部皮肤热感、肿胀等方面具有协同增效作用。
13.优选地，所述制剂的剂型包括乳液、乳膏剂、膏霜剂、凝胶、喷剂或液体敷料。
14.优选地，所述制剂以质量份数计包括活性成分0.01-35份和助剂50-150份。
15.所述活性成分的质量份数可以选择0.01份、0.1份、0.5份、1份、5份、10份、15份、20份、25份、30份或35份等。
16.所述助剂的质量份数可以选择50份、60份、70份、80份、90份、100份、110份、120份、130份、140份或150份等。
17.上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
18.优选地，所述助剂包括保湿剂、增稠剂、油相、乳化剂、ph调节剂、抗氧化剂或防腐剂中的任意一种或至少两种的组合，所述至少两种的组合包括保湿剂和增稠剂的组合、油相和乳化剂的组合或增稠剂和ph调节剂的组合等，其他任意的组合方式均可选择，在此便不再一一赘述。
19.优选地，所述保湿剂包括甘油、己二醇或透明质酸钠中的任意一种或至少两种的组合，所述至少两种的组合包括甘油和己二醇的组合、己二醇和透明质酸钠的组合、甘油和透明质酸钠的组合等，其他任意的组合方式均可选择，在此便不再一一赘述。
20.优选地，所述增稠剂包括卡波姆940、卡波姆941或芦荟胶中的任意一种或至少两种的组合，所述至少两种的组合包括卡波姆940和卡波姆941的组合、卡波姆941和芦荟胶的组合或卡波姆940和芦荟胶的组合，其他任意的组合方式均可选择，在此便不再一一赘述。
21.优选地，所述油相包括硬脂酸甘油酯、辛酸葵酸甘油三酯、硬脂酸或甜杏仁油中的任意一种或至少两种的组合，所述至少两种的组合包括硬脂酸甘油酯和辛酸葵酸甘油三酯的组合，辛酸葵酸甘油三酯和硬脂酸的组合，硬脂酸和甜杏仁油的组合等，其他任意的组合方式均可选择，在此便不再一一赘述。
22.优选地，所述乳化剂包括聚山梨醇酯-20、聚氧乙烯硬脂酸酯或失水山梨醇单油酸酯中的任意一种或至少两种的组合，所述至少两种的组合包括聚山梨醇酯-20和聚氧乙烯硬脂酸酯的组合、聚氧乙烯硬脂酸酯和失水山梨醇单油酸酯的组合或聚山梨醇酯-20和失
水山梨醇单油酸酯的组合，其他任意的组合方式均可选择，在此便不再一一赘述。
23.优选地，所述ph调节剂包括氢氧化钠、碳酸氢钠或三乙醇胺中的任意一种或至少两种的组合，所述至少两种的组合包括氢氧化钠和碳酸氢钠的组合、碳酸氢钠和三乙醇胺的组合、氢氧化钠和三乙醇胺的组合等，其他任意的组合方式均可选择，在此便不再一一赘述。
24.优选地，所述抗氧化剂包括丁羟基甲苯、苯氧乙醇或没食子酸丙酯中的任意一种或至少两种的组合，所述至少两种的组合包括二丁羟基甲苯和苯氧乙醇的组合、苯氧乙醇和没食子酸丙酯的组合、二丁羟基甲苯和没食子酸丙酯的组合等，其他任意的组合方式均可选择，在此便不再一一赘述。
25.优选地，所述防腐剂包括苯甲酸钠、苯甲酸或山梨酸钾中的任意一种或至少两种的组合，所述至少两种的组合包括苯甲酸钠和苯甲酸的组合、苯甲酸钠和山梨酸钾的组合、苯甲酸和山梨酸钾的组合等，其他任意的组合方式均可选择，在此便不再一一赘述。
26.优选地，所述制剂为乳膏剂，所述助剂以质量份数计包括保湿剂1-20份、增稠剂0.1-3份、油相5-30份、乳化剂1-8份、ph调节剂0.1-3份、抗氧化剂0.01-0.5份和防腐剂0.01-1份。
27.本发明所述制剂中保湿剂添加过多，添加量高于20份时，制剂体系过于黏稠，不易涂抹和皮肤吸收；当制剂中增稠剂添加较多，超过3份时，也会造成不易涂抹，并影响皮肤吸收，当增稠剂添加过少，低于0.1份时，制剂较稀，产品稳定性差；当制剂中添加油相过少低于5份时，复合油相不能和水相发生乳化作用，若油相添加量过多，高于30份时，制剂厚重难推开；当制剂中乳化剂添加过少，低于1份时水相和复合油相无法乳化，制剂体系不稳定，若添加乳化剂过多，超过8份时，乳化后体系较稀，后续产品稳定性低，因此，所述制剂以质量份数计包括保湿剂1-20份、增稠剂0.1-3份、油相5-30份、乳化剂1-8份、ph调节剂0.1-3份、抗氧化剂0.01-0.5份和防腐剂0.01-1份时，制剂产品易涂抹、稳定性高，使用后皮肤易吸收。
28.所述保湿剂的质量份数可以选择1份、3份、5份、7份、9份、11份、13份、16份、19份或20份等。
29.所述增稠剂的质量份数可以选择0.1份、0.5份、1份、1.5份、2份、2.5份或3份等。
30.所述油相的质量份数可以选择5份、10份、15份、20份、25份或30份等。
31.所述乳化剂的质量份数可以选择1份、2份、3份、4份、5份、6份、7份或8份等。
32.所述ph调节剂的质量份数可以选择0.1份、0.5份、1份、1.5份、2份、2.5份或3份等。
33.所述抗氧化剂的质量份数可以选择0.01份、0.05份、0.1份、0.2份、0.3份、0.4份或0.5份等。
34.所述防腐剂的质量份数可以选择0.01份、0.05份、0.1份、0.2份、0.3份、0.4份、0.5份、0.6份、0.7份、0.8份、0.9份或1份等。
35.上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
36.优选地，所述制剂为乳膏剂，所述助剂以质量份数计包括保湿剂1-20份、增稠剂0.1-1份、油相5-30份、乳化剂1-8份、ph调节剂0.1-3份、抗氧化剂0.01-0.5份和防腐剂0.01-1份。
37.本发明所述制剂中增稠剂的质量份数范围进一步缩小为0.1-1份时，所述制剂粘
稠度适宜、产品稳定性高，且产品肤感清爽易吸收的效果更强
38.所述保湿剂的质量份数可以选择1份、3份、5份、7份、9份、11份、13份、16份、19份或20份等。
39.所述增稠剂的质量份数可以选择0.1份、0.2份、0.3份、0.4份、0.5份、0.6份、0.7份、0.8份、0.9份或1份等。
40.所述油相的质量份数可以选择5份、10份、15份、20份、25份或30份等。
41.所述乳化剂的质量份数可以选择1份、2份、3份、4份、5份、6份、7份或8份等。
42.所述ph调节剂的质量份数可以选择0.1份、0.5份、1份、1.5份、2份、2.5份或3份等。
43.所述抗氧化剂的质量份数可以选择0.01份、0.05份、0.1份、0.2份、0.3份、0.4份或0.5份等。
44.所述防腐剂的质量份数可以选择0.01份、0.05份、0.1份、0.2份、0.3份、0.4份、0.5份、0.6份、0.7份、0.8份、0.9份或1份等。
45.上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
46.优选地，所述皮肤trpv通道激动剂包括胡椒碱、辣椒素、hepoxilin、20-羟基-二十烷四烯酸、20-羟基二十碳五烯酸、22-羟基二十二碳六烯酸、n-酰基γ-氨基丁酸、n-二十二碳六烯基γ-氨基丁酸、n-亚油酰基γ-氨基丁酸或n-花生四烯基γ-氨基丁酸中的任意一种或至少两种的组合。所述至少两种的组合包括胡椒碱和辣椒素的组合、20-羟基二十碳五烯酸和辣椒素的组合、20-羟基二十碳五烯酸和22-羟基二十二碳六烯酸的组合等，其他任意的组合方式均可选择，在此便不再一一赘述。
47.优选地，所述皮肤trpv通道激动剂包括胡椒碱。
48.优选地，所述皮肤trpv通道激动剂包括胡椒碱和辣椒素的组合。
49.优选地，所述胡椒碱与辣椒素的质量比为(10-1000):1。
50.所述(10-1000)中的具体数值可以选择10、100、200、300、400、500、600、700、800、900或1000等。
51.上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
52.本发明所涉及的皮肤trpv通道激动剂特定选择胡椒碱时，制剂中的胡椒碱可以与其受体(trpv1)结合，激活细胞膜离子通道，钙离子内流，胞质中钙离子浓度升高，神经元及其纤维释放神经肽的作用增强，促进神经递质耗竭，抑制外周神经向中枢神经的传导痛觉的通路，使伤害性神经元末端脱敏，起较好的止痛作用。当皮肤trpv通道激动剂包括胡椒碱，进一步地包括胡椒碱和辣椒素的组合时，辣椒素与受体(trpv1)结合，加强钙离子内流作用，提高神经元末端脱敏的强度，增强产品的止痛效果。
53.优选地，所述一氧化氮供体包括外源性一氧化氮供体和/或内源性一氧化氮供体。
54.优选地，所述外源性一氧化氮供体包括s-亚硝基谷胱甘肽、s-亚硝基-n-乙酰青霉胺、s-亚硝基三苯基甲基硫醇、s-亚硝基-n-乙酰半胱氨酸、s-亚硝基半胱氨酸、s-亚硝基硫代甘油、s-亚硝基甲巯丙脯酸、s-亚硝基巯基乙胺、s-亚硝基-3-巯基丙酸或s-亚硝基-d-硫代葡萄糖中的任意一种或至少两种的组合。所述至少两种的组合包括s-亚硝基谷胱甘肽和s-亚硝基-n-乙酰青霉胺的组合、s-亚硝基-n-乙酰青霉胺和s-亚硝基-n-乙酰半胱氨酸的组合、s-亚硝基-n-乙酰半胱氨酸和s-亚硝基巯基乙胺的组合等，其他任意的组合方式均可选择，在此便不再一一赘述。
55.优选地，所述内源性一氧化氮供体包括硝酸酯、l-精氨酸或l-瓜氨酸中的任意一种或至少两种的组合，所述至少两种的组合包括硝酸酯和l-精氨酸的组合、l-精氨酸和l-瓜氨酸的组合、硝酸酯和l-瓜氨酸的组合等，其他任意的组合方式均可选择，在此便不再一一赘述。
56.本领域技术人员公知s-亚硝基谷胱甘肽、s-亚硝基-n-乙酰青霉胺、s-亚硝基三苯基甲基硫醇、s-亚硝基-n-乙酰半胱氨酸、s-亚硝基半胱氨酸、s-亚硝基硫代甘油、s-亚硝基甲巯丙脯酸、s-亚硝基巯基乙胺、s-亚硝基-3-巯基丙酸、s-亚硝基-d-硫代葡萄糖、硝酸酯、l-精氨酸或l-瓜氨酸是常用的一氧化氮供体，可在多种体系中发生反应供应一氧化氮。
57.优选地，所述内源性一氧化氮供体包括l-精氨酸。
58.优选地，所述内源性一氧化氮供体包括l-精氨酸和硝酸酯的组合。
59.本发明所涉及的内源性一氧化氮供体特定选择l-精氨酸，l-精氨酸是人体内的一种氨基酸，可以安全长效的释放一氧化氮，一氧化氮气体可以渗透至平滑肌细胞中，使其松弛，扩张血管，促进微循环，增加血流量，减轻炎症反应，降低肿胀，具有更安全且更强的止痛效果。当所述内源性一氧化氮供体包括l-精氨酸和硝酸酯的组合时，所述舒张血管效果更好，消肿止痛效果更优。
60.优选地，所述制剂的活性成分以质量份数计包括皮肤trpv通道激动剂0.0001-0.1份、内源性一氧化氮供体10-30份。
61.本发明所涉及的活性成分选择皮肤trpv通道激动剂和内源性一氧化氮供体的组合时，且所述皮肤trpv通道激动剂的质量份数选择0.0001-0.1份、内源性一氧化氮供体的质量份数选择10-30份时，制得产品具有更高效的止痛作用。
62.所述皮肤trpv通道激动剂的质量份数可以选择0.0001份、0.001份、0.01份、0.03份、0.06份、0.09份或0.1份等。
63.所述内源性一氧化氮供体的质量份数可以选择10份、12份、14份、16份、18份、20份或30份等。
64.上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
65.优选地，所述制剂的活性成分以质量份数计包括皮肤trpv通道激动剂0.0001-0.1份、外源性一氧化氮供体0.01-10份。
66.本发明所涉及的活性成分选择皮肤trpv通道激动剂和外源性一氧化氮供体的组合时，且所述皮肤trpv通道激动剂的质量份数选择0.0001-0.1份、外源性一氧化氮供体的质量份数选择0.01-10份时，制得产品的止痛效果更优。
67.所述皮肤trpv通道激动剂的质量份数可以选择0.0001份、0.001份、0.01份、0.03份、0.06份、0.09份或0.1份等。
68.所述外源性一氧化氮供体的质量份数可以选择0.01份、0.1份、1份、3份、6份、9份或10份等。
69.上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
70.第二方面，本发明提供一种如第一方面所述的具有缓解糖尿病足痛功效的制剂的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：
71.(1)制备含有一氧化氮供体的水相；制备含有皮肤trpv通道激动剂的复合油相；
72.(2)混合所述水相和复合油相，乳化，制得具有缓解糖尿病足痛功效的制剂。
73.本发明涉及的如第一方面所述的具有缓解糖尿病足痛功效的制剂的制备方法仅需先制备水相和复合油相，随后混合乳化即可制得所述制剂，制备方法简便易操作，适宜工业放大。
74.优选地，步骤(1)中所述水相包括保湿剂、增稠剂、乳化剂或ph调节剂中任意一种或至少两种的组合，所述至少两种的组合包括ph调节剂和乳化剂的组合、乳化剂和保湿剂的组合、增稠剂和乳化剂的组合等，其他任意的组合方式均可选择，在此便不再一一赘述。
75.优选地，步骤(1)中所述复合油相包括一氧化氮供体、油相或抗氧化剂中任意一种或至少两种的组合，所述至少两种的组合包括一氧化氮供体和油相的组合、油相和抗氧化剂的组合、抗氧化剂和一氧化氮供体的组合等，其他任意的组合方式均可选择，在此便不再一一赘述。
76.优选地，步骤(2)中所述混合置于70-90℃的水浴条件下混合。
77.所述70-90℃中的具体数值可以选择70℃、73℃、76℃、79℃、82℃、85℃、88℃或90℃等。
78.上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
79.优选地，步骤(2)中所述乳化的均质速度为8000-12000rpm，均质时间为3-15min。
80.所述8000-12000rpm中的具体数值可以选择8000rpm、8500rpm、9000rpm、9500rpm、10000rpm、10500rpm、11000rpm、11500rpm或12000rpm等。
81.所述3-15min中的具体数值可以选择3min、6min、9min、12min或15min等。
82.上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
83.第三方面，本发明提供一种如第一方面所述的具有缓解糖尿病足痛功效的制剂在制备具有缓解糖尿病足痛功效药品中的应用。
84.相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：
85.1.本发明创造性地将皮肤trpv通道激动剂和一氧化氮供体联合应用于缓解糖尿病足痛中，其中皮肤trpv通道激动剂可以与trpv受体结合，激活细胞膜离子通道，促进钙离子内流，胞内钙离子浓度升高，进而促进神经元及其纤维释放神经肽，如神经激肽、血管活性肠肽以及兴奋性氨基酸等，待神经肽耗竭可抑制神经肽的形成，并进一步抑制神经元的传导作用，阻断疼痛由外周神经向中枢神经的传导通路，使伤害性神经元末端脱敏，起到止痛作用，此外，皮肤trpv通道激动剂可以与trpv受体结合还会降低局部皮肤的温度，减少局部红肿热痛造成的细胞内氧气及营养物质不足的胁迫现象，进一步加快患处的恢复；一氧化氮供体释放的一氧化氮具有脂溶性，其不需要任何中介机制就可快速扩散通过生物膜，在血管内皮细胞里产生的一氧化氮气体，可以快速渗透出细胞膜向下扩散进入平滑肌细胞，作用于平滑肌细胞，使其松弛，扩张血管，促进微循环，增加血流量，减轻炎症反应，降低肿胀，辅助提高缓痛作用。二者联合应用，相辅相成，在神经元末端脱敏，痛觉神经钝化，缓解糖尿病足痛，改善微循环，缓解局部皮肤热感、肿胀等方面具有协同增效作用。
86.2.本发明涉及的如第一方面所述的具有缓解糖尿病足痛功效的制剂的制备方法仅需先制备水相和复合油相，随后混合乳化即可制得所述制剂，制备方法简便易操作，适宜工业放大。
附图说明
87.图1为本发明所述制剂缓解糖尿病足痛的原理图。
具体实施方式
88.下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
89.下述实施例、对比例、测试例所涉及的聚山梨醇酯-20为购自阿拉丁的产品；聚氧乙烯硬脂酸酯为购自阿拉丁的产品。
90.实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道商购获得的常规产品。
91.实施例1
92.本实施例提供一种制得所述具有缓解糖尿病足痛功效的制剂(乳膏剂)，所述制剂是具体制备方法如下所示：
93.将0.2份卡波姆940加入19.8份去离子水中，8小时后至其完全溶胀，制得卡波姆940溶液。
94.将18份l-精氨酸盐酸盐、4份甘油、20份卡波姆940溶液、0.3份三乙醇胺、4份聚山梨醇酯-20、2份聚氧乙烯硬脂酸酯、40份去离子水，制得水相；
95.将4份胡椒碱溶于96份无水乙醇中，取1份胡椒碱乙醇溶液，即取0.04份胡椒碱，将4份辣椒素溶于996份无水乙醇中，取0.1份辣椒素乙醇溶液，即取0.0004份辣椒素，将1份二硝酸异山梨酯溶于9份无水乙醇中，取1份二硝酸异山梨酯乙醇溶液，即取0.1份二硝酸异山梨酯；
96.将配置好的1份胡椒碱乙醇溶液、0.1份辣椒素乙醇溶液、1份二硝酸异山梨酯乙醇溶液与0.02份丁羟基甲苯、0.4份苯氧乙醇混匀，完全溶解，确保无固体物质析出，制得组合物；
97.将上述组合物、4份硬脂酸甘油酯、3份辛酸葵酸甘油三酯、0.2份硬脂酸、8份甜杏仁油混匀，制得复合油相；
98.将两相分别置于80℃水浴中，待其完全溶解，随后乳化：两相完全溶解后，将水相缓慢倒于复合油相中，打开ika t18数显型高速分散机在80℃条件下进行均质乳化，均质条件为10000rpm，5min，均质完成后，待制剂温度降至30℃时加入0.4份山梨酸钾、0.3份苯甲酸钠，制得所述具有缓解糖尿病足痛功效的制剂。
99.实施例2
100.本实施例提供一种制得所述具有缓解糖尿病足痛功效的制剂(乳膏剂)，所述制剂是具体制备方法如下所示：
101.将0.5份卡波姆940加入19.5份去离子水中，8小时后至其完全溶胀，制得卡波姆940溶液。
102.将15份l-精氨酸盐酸盐、2份甘油、20份卡波姆940溶液、0.1份三乙醇胺、1份聚山梨醇酯-20、1份聚氧乙烯硬脂酸酯、50份去离子水，制得水相；
103.将3份胡椒碱溶于97份无水乙醇中，取1份胡椒碱乙醇溶液，即取0.03份胡椒碱，将
3份辣椒素溶于997份无水乙醇中，取0.1份辣椒素乙醇溶液，即取0.0003份辣椒素，将0.5份二硝酸异山梨酯溶于9.5份无水乙醇中，取1份二硝酸异山梨酯乙醇溶液，即取0.05份二硝酸异山梨酯；
104.将配置好的1份胡椒碱乙醇溶液、0.1份辣椒素乙醇溶液、1份二硝酸异山梨酯乙醇溶液与0.01份丁羟基甲苯、0.2份苯氧乙醇混匀，完全溶解，确保无固体物质析出，制得组合物；
105.将上述组合物、2份硬脂酸甘油酯、5份辛酸葵酸甘油三酯、0.4份硬脂酸、6份甜杏仁油混匀，制得复合油相；
106.将两相分别置于82℃水浴中，待其完全溶解，随后乳化：两相完全溶解后，将水相缓慢倒于复合油相中，打开ika t18数显型高速分散机在80℃条件下进行均质乳化，均质条件为11000rpm，5min，均质完成后，待制剂温度降至30℃时加入0.5份山梨酸钾，制得所述具有缓解糖尿病足痛功效的制剂。
107.实施例3
108.本实施例提供一种制得所述具有缓解糖尿病足痛功效的制剂(乳膏剂)，所述制剂是具体制备方法如下所示：
109.将0.8份卡波姆940加入19.2份去离子水中，8小时后至其完全溶胀，制得卡波姆940溶液。
110.将25份l-精氨酸盐酸盐、8份甘油、20份卡波姆940溶液、0.8份三乙醇胺、8份聚山梨醇酯-20、8份聚氧乙烯硬脂酸酯、30份去离子水，制得水相；
111.将5份胡椒碱溶于95份无水乙醇，取1份胡椒碱乙醇溶液，即取0.05份胡椒碱，将5份辣椒素溶于995份无水乙醇，取0.1份辣椒素乙醇溶液，即取0.0005份辣椒素，将1.5份二硝酸异山梨酯溶于8.5份无水乙醇中，取0.1份二硝酸异山梨酯乙醇溶液，即取0.15份二硝酸异山梨酯；
112.将配置好的1份胡椒碱乙醇溶液、0.1份辣椒素乙醇溶液、0.1份二硝酸异山梨酯乙醇溶液与0.02份丁羟基甲苯、0.4份苯氧乙醇混匀，完全溶解，确保无固体物质析出，制得组合物；
113.将上述组合物、6份硬脂酸甘油酯、5份辛酸葵酸甘油三酯、0.6份硬脂酸、12份甜杏仁油混匀，制得复合油相；
114.将两相分别置于80℃水浴中，待其完全溶解，随后乳化：两相完全溶解后，将水相缓慢倒于复合油相中，打开ika t18数显型高速分散机在85℃条件下进行均质乳化，均质条件为12000rpm，4min，均质完成后，待制剂温度降至30℃时加入0.5份苯甲酸钠，制得所述具有缓解糖尿病足痛功效的制剂。
115.实施例4
116.本实施例提供一种制得所述具有缓解糖尿病足痛功效的乳膏剂，其制备方法与实施例1的区别仅在于制备原料中不含辣椒素，辣椒素的质量份数分配至胡椒碱，其余均与实施例1相同。
117.实施例5
118.本实施例提供一种制得所述具有缓解糖尿病足痛功效的乳膏剂，其制备方法与实施例1的区别仅在于制备原料中不含胡椒碱，其余均与实施例1相同。
119.实施例6
120.本实施例提供一种制得所述具有缓解糖尿病足痛功效的乳膏剂，其制备方法与实施例1的区别仅在于制备原料中不含l-精氨酸盐酸盐，其余均与实施例1相同。
121.实施例7
122.本实施例提供一种制得所述具有缓解糖尿病足痛功效的乳膏剂，其制备方法与实施例1的区别仅在于制备原料中不含二硝酸异山梨酯，并将二硝酸异山梨酯的质量份数分配至l-精氨酸盐酸盐，其余均与实施例1相同。
123.实施例8
124.本实施例提供一种制得所述具有缓解糖尿病足痛功效的乳膏剂，其制备方法与实施例1的区别仅在于将制备原料中18份l-精氨酸盐酸盐、0.1份二硝酸异山梨酯替换为9份l-精氨酸盐酸盐、0.05份二硝酸异山梨酯，其余均与实施例1相同。
125.实施例9
126.本实施例提供一种制得所述具有缓解糖尿病足痛功效的乳膏剂，其制备方法与实施例1的区别仅在于将制备原料中0.04份胡椒碱、0.0004份辣椒素替换为0.1份胡椒碱、0.001份辣椒素，其余均与实施例1相同。
127.实施例10
128.本实施例提供一种制得所述具有缓解糖尿病足痛功效的乳膏剂，其制备方法与实施例1的区别仅在于将0.2份卡波姆940加入19.8份去离子水中替换为将4份卡波姆940加入16份去离子水，其余均与实施例1相同。
129.实施例11
130.本实施例提供一种制得所述具有缓解糖尿病足痛功效的乳膏剂，其制备方法与实施例1的区别仅在于将0.2份卡波姆940加入19.8份去离子水中替换为将0.5份卡波姆940加入199.5份去离子水，其余均与实施例1相同。
131.对比例1
132.本对比例提供一种制得所述具有缓解糖尿病足痛功效的乳膏剂，其制备方法与实施例1的区别仅在于制备原料中不含胡椒碱和辣椒素，将其质量份数分配至l-精氨酸盐酸盐和二硝酸异山梨酯，其余均与实施例1相同。
133.对比例2
134.本对比例提供一种制得所述具有缓解糖尿病足痛功效的乳膏剂，其制备方法与实施例1的区别仅在于制备原料中不含l-精氨酸盐酸盐和二硝酸异山梨酯，其余均与实施例1相同。
135.对比例3
136.本对比例提供一种制得所述具有缓解糖尿病足痛功效的乳膏剂，其制备方法与实施例1的区别仅在于制备原料中不含l-精氨酸盐酸盐、二硝酸异山梨酯、胡椒碱、辣椒素，其余均与实施例1相同。
137.测试例1
138.对实施例1、10、11制得产品的粘度进行评价。具体评价方法为：(1)取各实施例或对比例中的产品各三份，置于烧杯中；(2)使用应力控制型流变仪(physical mcr 101，安东帕，奥地利)进行检测，夹具选用角度为1
°
、直径为50mm的锥板，测量温度为28℃，稳态剪切
速率范围为1-100s-1
。粘度结果取3组样品的平均值。
139.表1
[0140] 粘度(pa
·
s)实施例110.74实施例10230.20实施例111.06
[0141]
由表1数据可知，实施例11的制备原料的水相中加入了0.05份卡波姆940，其粘度较实施例1低，表明增稠剂过少会造成制剂的粘度不足，不利于涂抹位置的固定，容易造成实际涂抹范围与预期涂抹范围不符；实施例10的制备原料的水相中加入了4份卡波姆940，其粘度较实施例1高，表明增稠剂过多，制剂粘度过大，涂抹时不利于制剂涂抹均匀，造成有效成分不能充分被皮肤吸收。
[0142]
测试例2
[0143]
对实施例1-11和对比例1-3制得产品的皮肤吸收时间、热感测试和肤感测试进行评价。将140名志愿者分为14组，每组10名志愿者，1组对应1个实施例或对比例；
[0144]
皮肤吸收时长的具体评价方法为：令对应实施例1、10、11组别的志愿者分别取实施例1、10、11制得的产品2ml涂于左手手背上，右手进行涂抹，观察完全吸收的时长，以白色乳液完全消失作为吸收完全的标准。
[0145]
热感测试的具体方法为：在每组志愿者的左手手掌(暴露)、右手手掌(暴露)分别涂抹3ml制得产品，在左侧大腿外侧(衣服内)、右侧大腿外侧(衣服内)涂抹10ml制得产品，并依次按摩30-45s，记录涂抹后1h内是否出现热感。
[0146]
肤感测试的具体方法为：各组志愿者依据制得产品的外观、气味及肤感进行评价。
[0147]
表2
[0148] 皮肤吸收时长(秒)实施例15.17实施例10176.32实施例110.53
[0149]
表3
[0150]
[0151][0152]
由表2数据可知，实施例11的制备原料的水相中加入了0.05份卡波姆940，其皮肤吸收时间较实施例1低，表明增稠剂过少会造成制剂的粘度不足，不利于涂抹位置的固定，容易造成实际涂抹范围与预期涂抹范围不符，且皮肤吸收的时间短、吸收到的有效成分少；实施例10的制备原料的水相中加入了4份卡波姆940，其皮肤吸收时间较实施例1长，表明增稠剂过多，制剂粘度过大，制剂难以涂抹均匀，较长时间皮肤才能吸收完全。
[0153]
由表3数据可知，实施例9中的皮肤trpv通道激动剂的质量份数超过0.1份，其热感较重，表明过多的皮肤trpv通道激动剂的加入会产生辛辣刺激，增加热感等不适感；对比例1、2仅含皮肤trpv通道激动剂或一氧化氮供体，热感较实施例1不明显，表明皮肤trpv通道激动剂和一氧化氮供体二者组合具有协同增效作用，具有更好的透皮效果和治疗效果；对比例3不含皮肤trpv通道激动剂和一氧化氮供体两种成分，与实施例1相比几乎无热感，表明皮肤trpv通道激动剂和一氧化氮供体两种成分的联用对糖尿病足痛具有优异的皮肤渗透效果。
[0154]
根据肤感测试结果可知，本发明制备的乳膏产品外观：质地细腻、醇厚，气味：清淡不刺激、肤感：涂抹时有轻微油腻感，吸收后皮肤保持水润不油腻。
[0155]
测试例3
[0156]
对实施例1-11和对比例1-3制得产品的止痛效果进行评价。具体评价过程为：(1)选取140名糖尿病足患者分为14组，每组10名志愿者，1组对应1个实施例或对比例；
[0157]
志愿者选取标准：(a)糖尿病患者(1型或2型)；(b)年龄18岁至85岁；(c)糖尿病足溃疡的分级为wagner分级1-3级；(d)糖尿病病程5年以上，足溃疡在12周以上；(e)能够并愿
意知情同意；(f)患者的踝肱指数(abi)在0.7-1.2之间(轻度缺血)。
[0158]
排除标准：(a)单纯缺血性溃疡；(b)溃疡在踝关节以上，或在踝关节以下，但合并严重的、威胁生命的感染需要截肢者；(c)妊娠、准备妊娠或哺乳期妇女；(d)严重心肾功能衰竭，或患有精神疾病不能参加治疗和随访者；(e)合并威胁生命的严重原发性疾病如恶性肿瘤、血液系统疾病、hiv阳性者；(f)合并有严重的营养不良或有出血性疾病史者；(g)对乳膏剂中某种成分过敏者。
[0159]
(2)每位志愿者依据数字疼痛评分表(nprs)进行疼痛评分，记为使用前nprs评分。
[0160]
(3)在每组志愿者的患处均匀轻柔的涂抹5ml的乳膏，涂抹范围为10cm的圆形，涂抹时轻柔地揉涂30s，每隔8h涂抹一次，共涂抹3次，第3次涂抹1h后再次使用数字疼痛评分表(nprs)评分，记为使用后nprs评分，计算各组的使用前减去使用后nprs评分的差值。
[0161]
表4
[0162] nprs评分差值实施例16实施例24实施例35实施例44实施例54实施例64实施例75实施例85实施例92实施例103实施例114对比例11对比例22对比例30
[0163]
实施例1制得的产品，糖尿病足神经痛患者使用后，患处涂抹10-20min内痛感减轻至消失。此外，由表4数据可知，实施例4、5的皮肤trpv通道激动剂中分别缺少辣椒素或者胡椒碱中的一种，其疼痛评分差值较实施例1小，表明疼痛缓解效果较实施例1差，即皮肤trpv通道激动剂中含有辣椒素和胡椒碱两种成分时，制剂的止痛效果更强；实施例6、7的一氧化氮供体中分别缺少l-精氨酸盐酸盐或者二硝酸异山梨酯中的一种，其疼痛评分差值较实施例1小，表明疼痛缓解效果较实施例1差，即一氧化氮供体中含有l-精氨酸和硝酸酯两种成分时，制剂的止痛效果更显著；实施例8中的一氧化氮供体的质量份数低于10份，其nprs疼痛评分差值较实施例1小，表明内源性一氧化氮供体的质量份数在10-30份时，止痛效果最优；实施例9中的皮肤trpv通道激动剂的质量份数超过0.1份，其nprs疼痛评分差值较实施例1小，表明过多的皮肤trpv通道激动剂的加入会产生辛辣刺激，增加疼痛不适感，影响止痛效果；
[0164]
对比例1、2仅含皮肤trpv通道激动剂或一氧化氮供体，其nprs疼痛评分差值较实施例1更小，表明皮肤trpv通道激动剂和一氧化氮供体二者具有协同增效作用，二者联用具
有更强的止痛效果；对比例3不含皮肤trpv通道激动剂和一氧化氮供体两种成分，其nprs疼痛评分差值较对比例1、2更小，即止痛效果更差，表明皮肤trpv通道激动剂和一氧化氮供体两种成分的联用对糖尿病足痛具有优异的止痛效果。
[0165]
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的工艺方法，但本发明并不局限于上述工艺步骤，即不意味着本发明必须依赖上述工艺步骤才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明所选用原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。