一种复方抗HPV生物蛋白凝胶敷料及其制备方法和应用与流程

本发明属于生物医药，具体涉及一种复方抗hpv生物蛋白凝胶敷料及其制备方法和应用。

背景技术：

1、人乳头瘤状病毒(hpv)的传播途径主要是性传播，人类是唯一的宿主。hpv 可分为高危型hpv(hr-hpv)和低危型(lr-hpv)。世界卫生组织(who)已确认hr-hpv感染是宫颈癌的首要病因及发生的必要条件。目前针对hpv感染的治疗较多，其中局部用药为常用方法之一，药物种类繁多，但临床治愈率均不理想。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种复方抗hpv生物蛋白凝胶敷料，该凝胶敷料是通过在阴道壁形成一层保护性凝胶膜，将阴道壁与病原微生物进行物理隔离，同时通过酸酐化牛β-乳球蛋白和β-葡聚糖复方混合，均提高抗病毒和隔离病毒的特性，从而达到预期用途，用于解决现有技术多是以单纯靠药物治疗的方法或物理疗法为主导致的治疗效果较差，且容易出现副作用带来的其他新的病症。

2、本发明通过以下技术方案实现：

3、一种复方抗hpv生物蛋白凝胶敷料，所述复方抗hpv生物蛋白凝胶敷料主要由以下质量分数的原料制备得到：

4、酸酐化牛β-乳球蛋白0.1wt％-0.3wt％、卡波姆0.3wt％-0.9wt％、甘油1 wt％-8wt％、β-葡聚糖0.05wt％-0.2wt％、三乙醇胺0.01wt％-0.05wt％、余量为纯化水。

5、上述提供了一种复方抗hpv生物蛋白凝胶敷料，该凝胶敷料是由酸酐化牛β-乳球蛋白、卡波姆、甘油、β-葡聚糖、三乙醇胺和纯化水组成。该凝胶敷料中酸酐化牛β-乳球蛋白作为病毒进入的抑制剂应用于复方抗hpv感染；卡波姆作为增稠剂；甘油作为保湿剂；β-葡聚糖起增强皮肤免疫力；三乙醇胺作为酸碱调节剂。酸酐化牛β-乳球蛋白和β-葡聚糖复合使用，再搭配其他原料，能够具有的功效如下：a.阻断生殖道高危hpv感染，用于降低hpv载量，预防宫颈病变发生。b.阻断hpv感染，用于hpv感染引起的皮肤病变，降低物理治疗后尖锐湿疣复发率。c.通过在阴道壁形成一层保护性凝胶膜。将阴道壁与外界细菌物理隔离，从而阻止病原微生物定植。d.用于缓解阴道炎引起的分泌物增多、瘙痒、疼痛，以及宫颈炎、宫颈柱状上皮异位引起的充血、水肿、分泌物增多的症状；葡聚糖也具有隔离病毒，降低hpv载量功能。

6、上述除纯化水外，原材料酸酐化牛β-乳球蛋白、卡波姆、甘油、β-葡聚糖、三乙醇胺均来源于正规的生产企业，在使用前均进行所有项目检验合格后方可使用。纯化水符合《中华人民共和国药典》标准的要求(详见检测报告)，为保证产品质量，纯化水应为最新制备。

7、作为优选地，所述复方抗hpv生物蛋白凝胶敷料主要由以下质量分数的原料制备得到：

8、酸酐化牛β-乳球蛋白0.2wt％、卡波姆0.6wt％、甘油5wt％、β-葡聚糖0.1 wt％、三乙醇胺0.03wt％、余量为纯化水。

9、酸酐化的β-乳球蛋白液，用磷酸盐缓冲液透析3-5次，就可以得到修饰β-乳球蛋白。因为β乳球蛋白在酸酐化修饰后，其表面净值负电荷明显增加，具有了阻断hpv假病毒感染细胞的能力。上述将酸酐化牛β-乳球蛋白作为病毒进入的抑制剂应用于复方抗hpv感染。酸酐化是采用4-羟基苯酐、4-羟基苯酐的衍生物、琥珀酸酐或马来酸酐对蛋白进行修饰而得。复方抗hpv功能性妇科敷料中β-乳球蛋白的含量为2‰。

10、β-葡聚糖是一种广泛存在于细菌、真菌、藻类和植物(如：大麦和燕麦) 细胞壁中的多醣，由几种不同类型的beta-糖苷键连接在一起，形成线状或分枝状结构。例如，谷物(燕麦和大麦)具有(1,3/1,4)连接模式，而来自真菌来源(蘑菇和酵母)的β-葡聚醣具有(1,3/1,6)连接模式，各自有不同程度的侧链分支附着在主干上。侧链分支的次数和长度已被证明对生物活性具有重要意义，一般来说，分支程度越高，生物活性就越强，常被宣称的效果有：增强免疫、抗肿瘤、抗菌、抗病毒和伤口愈合等。β–葡聚糖通过结合巨噬细胞、树状细胞等自然免疫系统细胞受体，将信息传递到细胞内，促进产生细胞分裂素，结果将激活t细胞、hk细胞等活性，增强人体免疫力。β-葡聚糖除了能促进朗格罕氏细胞增殖从而能增强皮肤的免疫能力,临床研究也表明β-葡聚糖还具有显著的消炎、抗过敏活性,并能有助于皮肤抵御外源性的各种机械和化学刺激。0.2％浓度β-葡聚糖与含有1.0％氢化可的松的化妆品中可具有同样的消炎作用。同时，β-葡聚糖还可以明显降低由果酸等有刺激性的活性成分所引起的皮肤过敏炎症的作用。

11、一种复方抗hpv生物蛋白凝胶敷料的制备方法，包括如下步骤：

12、(1)按照相应质量分数选取β-葡聚糖和甘油分散均匀后留作备用物a；

13、(2)按照相应质量分数选取酸酐化牛β-乳球蛋白和纯化水充分混匀，获得备用物b；

14、(3)按照相应质量分数选取纯化水后置于乳化装置中进行均质处理，将乳化装置升温至80-90℃后，保温20-30min之后降温至50-60℃，加入步骤(1) 的备用物a混匀处理；

15、(4)待步骤(3)处理结束降温至40-50℃时，加入三乙醇胺搅拌；

16、(5)待步骤(4)处理结束降温至不高于40℃时，加入备用物b搅拌至料体透明无杂质，过滤，放料，获得成品。

17、作为优选地，所述步骤(3)中，纯化水置于乳化装置中进行均质处理时，采用均质速度为20-30hz进行。

18、作为优选地，所述步骤(3)中，加入步骤(1)的备用物a混匀处理时，采用均质速度为20-30hz，均质时长为2-3min。

19、作为优选地，所述步骤(4)中，加入三乙醇胺搅拌时，搅拌时长为2-3min，搅拌速度为15-20hz。

20、作为优选地，所述步骤(5)中，加入备用物b搅拌时，搅拌时长为3-5min，搅拌速度为15-20hz。

21、作为优选地，所述步骤(5)中，过滤时采用200-400目滤布。

22、一种复方抗hpv生物蛋白凝胶敷料在制备复方抗hpv生物蛋白凝胶产品中的应用，其特征在于，采用所述的复方抗hpv生物蛋白凝胶敷料或如所述的复方抗hpv生物蛋白凝胶敷料的制备方法获得。

23、上述复方抗hpv生物蛋白凝胶产品对hpv病毒抑制的一个作用原理：利用正负电荷非特异性相互。具体为：

24、a、经过修饰后的酸酐化牛β-乳球蛋白/β-葡聚糖表面带有非常多负电荷与 hpv衣壳蛋白的l1的c端和l2肽段的n端的正电荷区域结合，阻断病毒侵入宿主细胞，从而达到阻断hpv感染的目的。

25、b、酸酐化牛β-乳球蛋白/β-葡聚糖表面的负电荷与人类乳头瘤病毒(hpv) 颗粒上的正电荷相互络合，从而导致hpv蛋白构象变化而失活。同时胶状卡波姆可将失活的hpv病毒吸附、包裹排出体外，并加快糜烂组织快速修复与再生，促进愈合。

26、c、通过上述作用机理与工作原理在阴道壁形成一层保护性凝胶膜。将阴道壁与外界进行物理隔离，从而阻止病原微生物定植。

27、与现有技术相比，本发明至少具有如下技术效果：

28、本发明提供了一种复方抗hpv生物蛋白凝胶敷料，该凝胶敷料中酸酐化牛β-乳球蛋白作为病毒进入的抑制剂应用于复方抗hpv感染；卡波姆作为增稠剂；甘油作为保湿剂；β-葡聚糖起增强皮肤免疫力；三乙醇胺作为酸碱调节剂。酸酐化牛β-乳球蛋白和β-葡聚糖复合使用，再搭配其他原料，能够具有的功效如下：a.阻断生殖道高危hpv感染，用于降低hpv载量，预防宫颈病变发生。 b.阻断hpv感染，用于hpv感染引起的皮肤病变，降低物理治疗后尖锐湿疣复发率。c.通过在阴道壁形成一层保护性凝胶膜。将阴道壁与外界细菌物理隔离，从而阻止病原微生物定植。d.用于缓解阴道炎引起的分泌物增多、瘙痒、疼痛，以及宫颈炎、宫颈柱状上皮异位引起的充血、水肿、分泌物增多的症状；葡聚糖也具有隔离病毒，降低hpv载量功能。

29、该生物蛋白凝胶敷料通过在阴道壁形成一层保护性凝胶膜，将阴道壁与病原微生物进行物理隔离，阻止病原微生物定植，从而达到预期用途，它一改常规技术以单纯靠药物治疗的方法，以物理疗法为主，辅助药物的方法对hpv感染者提供了一个新的选择。通过上述作用机理用于降低hpv载量，缓解阴道炎引起的分泌物增多、瘙痒、疼痛，以及宫颈炎等引起的充血、水肿等症状。

30、该生物蛋白凝胶敷料利用经过修饰后的酸酐化牛β-乳球蛋白/β-葡聚糖表面带有非常多负电荷与hpv衣壳蛋白的l1的c端和l2肽段的n端的正电荷区域结合，阻断病毒侵入宿主细胞，从而达到阻断hpv感染的目的。酸酐化牛β-乳球蛋白/β-葡聚糖表面的负电荷与人类乳头瘤病毒(hpv)颗粒上的正电荷相互络合，从而导致hpv蛋白构象变化而失活。同时胶状卡波姆可将失活的 hpv病毒吸附、包裹排出体外，并加快糜烂组织快速修复与再生，促进愈合。