1.本发明涉及化妆品技术领域，尤其涉及一种美白祛痘面膜及其制备方法。
背景技术：
2.面膜因其携带方便、效果明显等优势，成为深受爱美人士欢迎的护肤产品。面膜作用机制包括以下三个方面：首先，面膜通过阻隔肌肤与空气的接触、抑制汗水蒸发，保持面部皮肤充分的营养和水分，增强皮肤的弹性和活力；其次，面膜中大量水分可以充分滋润皮肤角质层，使角质层的渗透力增强，使面膜中的营养物质能有效地渗进皮肤，促进上皮组织细胞的新陈代谢；此外，面膜具有黏附作用，当揭去面膜时，皮肤污物（表皮细胞代谢物、多余皮脂、残妆等）随面膜一起粘除，使皮肤毛囊通畅，皮脂顺利排出。因此，只要科学合理使用面膜，便可有效改善皮肤缺水和暗哑，减少细纹生成，延缓皮肤衰老，并在一定程度上起到祛除斑和痘的功效。
3.面膜的分类方法有多种，按照面膜功效可将其分为保湿面膜、美白祛斑面膜、抗皱面膜、祛痘面膜、清洁面膜、紧致毛孔面膜等；按照面膜的剂型分类可分为剥离型面膜、膏状面膜、粉状面膜和湿布状面膜；按照面膜载体材质可分为贴式湿布状面膜和非贴式面膜；按照理化性质可分为软膜和硬膜。
4.青春痘是由多种因素单独或相互作用引起的毛囊皮脂腺单位的慢性炎性反应，好发于颜面、胸背部等皮脂腺较丰富的部位。目前祛痘面膜主要通过以下五大类功效性成分发挥作用：第一大类为角质处理剂，如水杨酸（安全使用浓度为0.5%-2%）、α-羟酸（甘醇酸、乳酸、柠檬酸）、白柳提取物、壬二酸、木瓜蛋白酶等成分，以祛除表皮多余的角质细胞，疏通毛孔。第二大类为皮脂分泌抑制剂，如锌盐（硫酸锌、葡萄糖酸锌、甘草酸锌、吡啶硫酮锌）、硫磺、维生素 b6、维生素 b3、烟酰胺、大豆异黄酮、丹参酮提取物，这些成分能减少或抑制皮脂的过度分泌，防止毛囊阻塞，避免痤疮丙酸杆菌大量繁殖。第三大类为杀菌剂，常用的杀菌成分有锌盐（硫酸锌、葡萄糖酸锌、甘草酸锌、吡啶硫酮锌）、硫磺、壬二酸、青蒿挥发油、丁香精油、迷迭香精油、茶树精油、蜂胶、辣椒素、抗菌肽，能迅速杀灭痤疮丙酸杆菌、螨虫、糠秕孢子菌、金黄色葡萄球菌等皮肤寄生菌群，防止细菌原体浸蚀而发炎长痘。第四大类为消炎剂，常用成分有茶树提取物、飞燕草提取物、金缕梅提取物等，能抑制毛囊内的炎症因子，避免丘疹、脓疱、结节严重青春痘产生。第五大类为美白剂，以祛除青春痘残留的疤痕，常用美白剂有熊果苷、壬二酸及其衍生物、葡萄糖胺、甘草提取物、亚油酸、维生素c衍生物、维生素e衍生物、绿茶提取物等。
5.专利cn 108078897 a公开了一种鱼腥草祛痘面膜，按重量份计由如下材料制成：鱼腥草提取液30-50份、海藻提取液5-10份、金银花提取液5-10份、甘菊2-5份、天麻2-5份、芦荟胶5-15份、植物蛋白粉1-5份、蜂蜜15-20份。本发明提供的鱼腥草祛痘面膜纯属天然面膜，无刺激性、无依赖性、原料丰富，有效祛痘、修复细纹、重建肌肤纹理的功效；专利cn 103637968 a公开了一种中药祛痘面膜，包括如下重量含量的成分：白芷粉20-30份，蜂蜜20-30份，大黄粉20-30份，蒲公英粉10-20份，芦荟汁5-30份，绿茶粉3-5份，去离子水10-15
份，该发明所公开的中药祛痘面膜，制作成本低，中药成分不但祛痘效果好，而且长期使用也不会对脸部皮肤有刺激作用。目前大多数祛痘面膜以中药成分为主，追求纯天然成分，因此易出现不稳定且保湿效果较差的问题。因此，研发出一种成分温和无刺激，且性质稳定、祛痘保湿效果好的面膜将具有十分广阔的市场前景。
技术实现要素：
6.有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明的目的在于提供一种美白祛痘面膜及其制备方法。
7.本发明的技术方案：一种美白祛痘面膜，由以下原料组成：壳聚糖，小麦胚芽粉，藻酸钠，黄原胶，黄芩发酵水提液，乙二胺四乙酸二钠，透明质酸，羧甲基纤维素钠，水杨酸，维生素c，水溶性氮酮，防腐剂，多元醇，水。
8.优选的，所述美白祛痘面膜，包括以下重量份数的原料：壳聚糖2~5份，小麦胚芽粉2~3份，海藻酸钠5~7份，黄原胶2~4份，黄芩发酵水提液40~50份，乙二胺四乙酸二钠0.1~0.15份，透明质酸0.05~0.1份，羧甲基纤维素钠0.1~0.2份，水杨酸0.1~0.2份，维生素c 0.1~0.2份，水溶性氮酮0.1~0.2份，防腐剂0.2~0.3份，多元醇8~10份，水20~30份。
9.孜然富集多种生物活性成分，相关研究已经证实孜然中有100多种化合物。研究表明，干燥的孜然种子中含有挥发油（5%）、脂肪（22%）、蛋白质（10%）、糖类、纤维（11%）、游离氨基酸和多种微量元素。孜然种子富含黄酮和多酚类物质，其中包括没食子酸，肉桂酸，迷迭香酸，香豆酸和香草酸，木犀草素，儿茶素，香豆素，槲皮素和槲皮素等。孜然非精油组分中主要有萜、倍半萜、芳香族醛、酮醚类物质。主要包括枯茗醛、枯茗醇、对伞花烃、β-蒎烯、α-蒎烯、γ-萜品烯、水芹烯、月桂烯、松油烯、藏花醛、柠檬烯等多种化学物质，其中枯茗醛的含量最高。其中黄酮类及多酚类由于含有丰富的羟基、酚羟基等活性官能团，因而具有强大的抗氧化性，通过对氧自由基或激发态氧的直接清除、抑制氧化酶的活性以及对金属离子的螯合作用均可以达到很好的抗氧化活性。
10.乌拉尔甘草，甘草中主要含三菇类、黄酮类和多糖类化合物，另外还含有香豆素类、氨基酸类、生物碱、性激素和有机酸等100多种有效化学成分。三菇类化合物主要含甘草甜素、甘草次酸、甘草菇醇、异甘草内脂、齐墩果酸等。黄酮类化合物主要含甘草苷、甘草苷元、异甘草苷、异甘草素(异甘草苷元)、甘草素(甘草苷元)、新异甘草苷、异芒柄花苷、新甘草酚、甘草黄酮a和甘草查尔酮a、b。生物碱类化合物包括四氢喹啉化合物：5,6,7,8-四氢-2,4-二甲基喹啉，5,6,7,3-四氢-4-甲基喹啉。异甘草素作为甘草黄酮中活性最高的成分，由于其结构本身所含有的丰富的酚羟基具有极强的酪氨酸酶抑制活性。
11.进一步的，所述美白祛痘面膜，包括以下重量份数的原料：壳聚糖2~5份，小麦胚芽粉2~3份，海藻酸钠5~7份，黄原胶2~4份，黄芩发酵水提液40~50份，孜然提取物0.3~0.5份，乌拉尔甘草提取物0.4~0.6份，乙二胺四乙酸二钠0.1~0.15份，透明质酸0.05~0.1份，羧甲基纤维素钠0.1~0.2份，水杨酸0.1~0.2份，维生素c 0.1~0.2份，水溶性氮酮0.1~0.2份，防腐剂0.2~0.3份，多元醇8~10份，水20`30份。
12.优选的，所述美白祛痘面膜，包括以下重量份数的原料：壳聚糖2~5份，小麦胚芽粉2~3份，海藻酸钠5~7，黄原胶2~4份，黄芩发酵水提液40~50份，孜然-乌拉尔甘草复合物0.4~
0.6份，乙二胺四乙酸二钠0.1~0.15份，透明质酸0.05~0.1份，羧甲基纤维素钠0.1~0.2份，维生素c 0.1~0.2份，水溶性氮酮0.1~0.2份，防腐剂0.2~0.3份，多元醇8~10份，水60~90份。
13.所述孜然提取物由如下方法制备得到：称取孜然种子200~400g粉碎，过50~60目筛，按照料液比1：（10~15）g/ml加入体积分数为60~70%的乙醇水溶液，于70~80℃下提取2~3h，提取液经4000~5000rpm转速离心10~20min，上清液于40~50℃下旋转蒸发浓缩至干，得孜然提取物。
14.所述乌拉尔甘草提取物由如下方法制备得到：将500~600g乌拉尔甘草根洗净后粉碎，过60~80目筛，加入0.5~1mol/l的hcl水溶液，料液比为1：（5~10）g/ml，在90~100℃下水解2~3h，用0.5~1mol/l的naoh水溶液调节ph至中性，过滤，滤渣加入5~6l体积分数70~80%的乙醇水溶液进行超声提取20~30min，超声功率400~500w，频率30~40hz，提取液经于45~50℃旋转蒸发浓缩至干，得乌拉尔甘草提取物。
15.所述孜然-乌拉尔甘草复合物由如下方法制备得到：取30~50g孜然提取物，40~60g乌拉尔甘草提取物加入到1~2l体积分数70~80%的乙醇水溶液中，加入5~10g水杨酸，在20~30℃下搅拌1~2h，经乙酸乙酯萃取2~4次后，合并萃取液，于40~50℃下旋转蒸发浓缩至干，得孜然-乌拉尔甘草复合物。
16.优选的，所述多元醇为1，2-丙二醇和/或丁二醇；更优选的，所述1，2-丙二醇及丁二醇的重量比为(0.75~1)：1。
17.优选的，所述防腐剂为尼泊金乙酯，卡松，苯氧乙醇中的至少一种。更优选的，所述尼泊金乙酯和卡松的重量比为(0.1~0.15)：0.1。
18.尼泊本发明还提供了上述美白祛痘面膜的制备方法，包括如下步骤：s1 膏体的制备：取配方量的多元醇，透明质酸，羧甲基纤维素钠、尼泊金乙酯，卡松，乙二胺四乙酸二钠、乌拉尔甘草-孜然提取复合物、壳聚糖，小麦胚芽粉，海藻酸钠，黄原胶加入20~30重量份水，于50~60℃下搅拌1~2h得到膏体；s2 面膜成型：将粘稠膏体倒入面膜模具中制成膜，然后在50-60℃干燥至含水量为8~10％，得到膜片；s3 面膜片的制备：将步骤s2所得的膜片在40~50重量份黄芩发酵水提液中浸泡10~12h，然后冷冻干燥，灭菌，包装即得到面膜。
19.所述黄芩发酵水提液的制备方法为：将20~25g黄芩水提物加入到1~1.2l的无糖的pdb培养基中，再接种2~3wt%的草酸青霉菌种控制温度为28~30℃发酵70~72h，再于36~37℃转化20~24h，再于2800~3000rpm下离心10~15min后取上清液，再于0.22μm下过滤后冷冻干燥即得黄芩发酵水提物，再取5~10g黄芩发酵水提物加入到100~120ml水中混匀即得黄芩发酵水提液。
20.所述无糖的pdb培养基采用如下方法配制：将200ｇ新鲜土豆清洗干净，削去表皮并切成小粒，加热沸腾30min，并滤去土豆渣，定容到1ｌ。将配制完成的pdb培养基在115℃灭菌30min。
21.本发明提供了一种美白祛痘面膜。与现有技术相比，本发明解决了现有技术中遇到的困难，具有如下有益效果：(1)本发明制备的美白祛痘面膜配方简单，原料成本低，且制备方法简单，条件易控，工艺稳定，可工业化生产，能够推广应用；
(2)本发明中的美白祛痘面膜可很好地润养肌肤，有较好的美白祛痘效果，同时还能保持肌肤的水分，且ph值为弱酸性，能够温和地护理皮肤，不会产生刺激性反应；(3)本发明中的美白祛痘面膜使用了乌拉尔甘草提取物与孜然提取物进行混合，孜然提取物中的枯茗醛与甘草中酸水解后产生的异甘草素进行结合，增加了黄酮类化合物的含量，结合后形成共轭烯烃结构且酚羟基不会受到影响，结构稳定的同时活性更强，在抑制酪氨酸酶活性及黑色素合成方面具有很好的效果，能够很好地美白肌肤，同时黄芩作为一种经典的中草药，有抗菌、抗过敏、抗炎和抗肿瘤的功效。而再经过发酵处理进一步能增强黄芩中部分功能化物质的转化，将其添加在本发明的面膜中与各类有效成分共同作用可发挥较好的美白祛痘功效。且成分温和刺激性低，因此将具有良好的市场前景和推广价值。
具体实施方式
22.下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。实施例中涉及的操作如无特殊说明，均为本领域常规技术操作。
23.本发明实施例中部分原料参数如下：水溶性氮酮，cas号：59227-89-3，来源于西安交大科创药业有限责任公司。
24.卡松，cas号：26172-55-4，来源于湖北齐飞医药化工有限公司。
25.黄芩水提物，购于山西瑜莱生物科技有限公司。
26.小麦胚芽粉，100目，购于河北创之源生物科技有限公司。
27.草酸青霉，penicillium oxalicum ，cicc 41676，来源于中国工业微生物菌种保藏管理中心对比例1一种美白祛痘面膜的制备，包括如下步骤：s1 膏体的制备：取1，2-丙二醇3g，透明质酸0.1g，羧甲基纤维素钠0.1g、尼泊金乙酯0.15g，卡松0.1g，乙二胺四乙酸二钠0.1g、壳聚糖2g，小麦胚芽粉3g，海藻酸钠6g，黄原胶2g加入20ml水，于60℃下搅拌2h得到膏体；s2 面膜成型：将粘稠膏体倒入面膜模具中制成膜，然后在60℃干燥至含水量为8％得到膜片，然后于﹣40℃下冷冻干燥6h，再于110℃下灭菌15min冷却后包装即得面膜。
28.对比例2一种美白祛痘面膜的制备，包括如下步骤：s1 膏体的制备：取1，2-丙二醇3g，透明质酸0.1g，羧甲基纤维素钠0.1g、尼泊金乙酯0.15g，卡松0.1g，乙二胺四乙酸二钠0.1g、乌拉尔甘草-孜然提取复合物0.4g、壳聚糖2g，小麦胚芽粉3g，海藻酸钠6g，黄原胶2g加入20ml水，于60℃下搅拌2h得到膏体；s2 面膜成型：将粘稠膏体倒入面膜模具中制成膜，然后在60℃干燥至含水量为8％得到膜片，然后于﹣40℃下冷冻干燥6h，再于110℃下灭菌15min冷却后包装即得面膜。
29.所述乌拉尔甘草-孜然复合物采用如下方法制备：（1）称取孜然种子200g粉碎，过60目筛，加入3l体积分数为70%的乙醇水溶液，于70℃下提取2h，提取液经4000rpm转速离心10min，上清液于50℃下浓缩至干，得孜然提取物；（2）将500g乌拉尔甘草根洗净后粉碎，过60目筛，加入3l 0.5mol/l的hcl溶液，在
90℃下水解2h，用0.5mol/l的naoh水溶液调节ph至中性，过滤，滤渣加入5l体积分数80%的乙醇水溶液进行超声提取20min，超声功率400w，频率40hz，提取液在50℃浓缩至干得乌拉尔甘草提取物；（3）取30g孜然提取物，40g乌拉尔甘草提取物加入到1l体积分数80%的乙醇水溶液中，加入5g水杨酸，在20℃下搅拌2h，用500ml*3乙酸乙酯萃取，合并萃取液，于45℃下浓缩至干，得孜然-乌拉尔甘草复合物。
30.实施例1一种美白祛痘面膜的制备，包括如下步骤：s1 膏体的制备：取1，2-丙二醇3g，透明质酸0.1g，羧甲基纤维素钠0.1g、尼泊金乙酯0.15g，卡松0.1g，乙二胺四乙酸二钠0.1g、孜然提取物0.4g、壳聚糖2g，小麦胚芽粉3g，海藻酸钠6g，黄原胶2g加入20ml水，于60℃下搅拌2h得到膏体；s2 面膜成型：将粘稠膏体倒入面膜模具中制成膜，然后在60℃干燥至含水量为8％得到膜片，然后于﹣40℃下冷冻干燥6h，再于110℃下灭菌15min冷却后包装即得面膜。
31.所述孜然提取物采用如下方法制备：称取孜然种子200g粉碎，过60目筛，加入3l体积分数为70%的乙醇水溶液，于70℃下提取2h，提取液经4000rpm转速离心10min，上清液于50℃下浓缩至干，得孜然提取物。
32.实施例2一种美白祛痘面膜的制备，包括如下步骤：s1 膏体的制备：取1，2-丙二醇3g，透明质酸0.1g，羧甲基纤维素钠0.1g、尼泊金乙酯0.15g，卡松0.1g，乙二胺四乙酸二钠0.1g、乌拉尔甘草-孜然提取复合物0.4g、壳聚糖2g，小麦胚芽粉3g，海藻酸钠6g，黄原胶2g加入20ml水，于60℃下搅拌2h得到膏体；s2 面膜成型：将粘稠膏体倒入面膜模具中制成膜，然后在60℃干燥至含水量为8％得到膜片，然后于﹣40℃下冷冻干燥6h，再于110℃下灭菌15min冷却后包装即得面膜。
33.所述乌拉尔甘草-孜然复合物采用如下方法制备：（1）称取孜然种子200g粉碎，过60目筛，加入3l体积分数为70%的乙醇水溶液，于70℃下提取2h，提取液经4000rpm转速离心10min，上清液于50℃下浓缩至干，得孜然提取物；（2）将500g乌拉尔甘草根洗净后粉碎，过60目筛，加入3l 0.5mol/l的hcl水溶液，在90℃下水解2h，用0.5mol/l的naoh水溶液调节ph至中性，过滤，滤渣加入5l体积分数80%的乙醇水溶液进行超声提取20min，超声功率400w，频率40hz，提取液在50℃下浓缩至干，得乌拉尔甘草提取物；（3）取30g孜然提取物，40g乌拉尔甘草提取物加入到1l无水甲醇中，再加入25wt%的naoh水溶液100ml，避光，在50℃下搅拌50h，静置10min，加入2mol/l hcl水溶液调节ph至中性，再加入500ml乙酸乙酯萃取，萃取液再用400ml*3水洗三次，于45℃下除去乙酸乙酯后得到粗产物，进一步加入100ml甲苯洗涤，100ml*3水洗3次除去甲苯，经60℃真空干燥得乌拉尔甘草-孜然提取复合物。
34.在弱碱性条件下，孜然提取物中的醛类如枯茗醛可与甘草提取物酸水解后的异甘草素进行偶联，形成不饱和的共轭双键，所形成的黄酮类化合物结构更为稳定，且由于共轭双键的加持活性更高。同时本发明将孜然提取物中无抗氧化活性的醛类利用起来，增强了复配物的抗氧化活性，将其运用到化妆品中可显著提升产品的抗氧化活性，美白功效也将
得到显著提升。
35.实施例3一种美白祛痘面膜的制备，包括如下步骤：s1 膏体的制备：取1，2-丙二醇3g，透明质酸0.1g，羧甲基纤维素钠0.1g、尼泊金乙酯0.15g，卡松0.1g，乙二胺四乙酸二钠0.1g、乌拉尔甘草提取物0.4g、壳聚糖2g，小麦胚芽粉3g，海藻酸钠6g，黄原胶2g加入20ml水，于60℃下搅拌2h得到膏体；s2 面膜成型：将粘稠膏体倒入面膜模具中制成膜，然后在60℃干燥至含水量为8％得到膜片，然后于﹣40℃下冷冻干燥6h，再于110℃下灭菌15min冷却后包装即得面膜。
36.所述乌拉尔甘草提取物采用如下方法制备：将500g乌拉尔甘草根洗净后粉碎，过60目筛，加入3l 0.5mol/l的hcl水溶液，在90℃下水解2h，用0.5mol/l的naoh水溶液调节ph至中性，过滤，滤渣加入5l体积分数80%的乙醇水溶液进行超声提取20min，超声功率400w，频率40hz，提取液在50℃浓缩至干，得乌拉尔甘草提取物。
37.实施例4一种美白祛痘面膜的制备，包括如下步骤：s1 膏体的制备：取1，2-丙二醇3g，透明质酸0.1g，羧甲基纤维素钠0.1g、尼泊金乙酯0.15g，卡松0.1g，乙二胺四乙酸二钠0.1g、乌拉尔甘草-孜然提取复合物0.4g、壳聚糖2g，小麦胚芽粉3g，海藻酸钠6g，黄原胶2g加入20ml水，于60℃下搅拌2h得到膏体；s2 面膜成型：将粘稠膏体倒入面膜模具中制成膜，然后在60℃干燥至含水量为8％，得到膜片；s3 面膜片的制备：将步骤s2所得的膜片在黄芩发酵水提液中浸泡12h，然后于﹣40℃下冷冻干燥6h，再于110℃下灭菌15min冷却后包装即得面膜。
38.所述黄芩发酵水提液的制备方法为：将20g黄芩水提物加入到1l的无糖的pdb培养基中，再接种2wt%的草酸青霉菌种控制温度为28℃发酵72ｈ，再于37℃转化24h，再3000rpm下离心10min后取上清液，再于0.22μm下过滤后冷冻干燥即得黄芩发酵水提物，再取8g黄芩发酵水提物加入到100ml水中混匀即得黄芩发酵水提液。
39.所述无糖的pdb培养基采用如下方法配制：将200ｇ新鲜土豆清洗干净，削去表皮并切成小粒，加热沸腾30min，并滤去土豆渣，定容到1ｌ；将配制完成的pdb培养基在115℃灭菌30min。
40.所述乌拉尔甘草-孜然复合物采用如下方法制备：（1）称取孜然种子200g粉碎，过60目筛，加入3l体积分数为70%的乙醇水溶液，于70℃下提取2h，提取液经4000rpm转速离心10min，上清液于50℃下浓缩至干，得孜然提取物；（2）将500g乌拉尔甘草根洗净后粉碎，过60目筛，加入3l 0.5mol/l的hcl水溶液，在90℃下水解2h，用0.5mol/l的naoh水溶液调节ph至中性，过滤，滤渣加入5l体积分数80%的乙醇水溶液进行超声提取20min，超声功率400w，频率40hz，提取液在50℃下浓缩至干，得乌拉尔甘草提取物；（3）取30g孜然提取物，40g乌拉尔甘草提取物加入到1l无水甲醇中，再加入25wt%的naoh水溶液100ml，避光，在50℃下搅拌50h，静置10min，加入2mol/l hcl水溶液调节ph至中性，再加入500ml乙酸乙酯萃取，萃取液再用400ml*3水洗三次，于45℃下除去乙酸乙酯后得到粗产物，进一步加入100ml甲苯洗涤，100ml*3水洗3次除去甲苯，经60℃真空干燥得乌
拉尔甘草-孜然提取复合物。
41.在弱碱性条件下，孜然提取物中的醛类如枯茗醛可与甘草提取物酸水解后的异甘草素进行偶联，形成不饱和的共轭双键，所形成的黄酮类化合物结构更为稳定，且由于共轭双键的加持活性更高。同时本发明将孜然提取物中无抗氧化活性的醛类利用起来，增强了复配物的抗氧化活性，将其运用到化妆品中可显著提升产品的抗氧化活性，美白功效也将得到显著提升。
42.测试例1对对比例及实施例进行了抑制酪氨酸酶活性测试，参考(上海日用化学品行业协会团体标准t/shrh 015-2018)中的测试方法进行测试。具体步骤为：设立样品管（t）、样品本底（t0）、酶反应管（c）和溶剂本底（c0），每组设立三支平行管。在样品管（t）和样品本底（t0）中各加入1ml相同浓度的样品溶液，酶反应管（c）和溶剂本底（c0）则分别加入1ml磷酸盐缓冲溶液，在样品管和酶反应管中各加入0.5ml酪氨酸酶溶液，样品本底和溶剂本底则以0.5ml磷酸盐缓冲溶液代替，混匀，在35℃下孵育10min，依次在各管中加入2ml的左旋多巴溶液，控制没管反应时间为5min，迅速转移至比色皿中，立即用紫外可见分光光度计于475 nm处测定各样品的反应溶液的吸光度，再计算出抑制率。
43.抑制率（%）=（1－（t－t0）/（c－c0））*100%t—样品管吸光值，即样品与酪氨酸酶反应后溶液吸光值；t0—样品本底吸光值；c—未加样品时酪氨酸酶和多巴反应的吸光值；c0—溶剂本底吸光值。
44.表1-抑制酪氨酸酶活性的抑制率结果表实验方案抑制率/%对比例146.50%对比例274.98%实施例155.80%实施例286.32%实施例356.62%实施例486.50%由表1可知，乌拉尔甘草及孜然提取物均可提高面膜对于酪氨酸酶的活性，然而二者复合后抑制效果更为明显，实施例2相对于对比例2而言孜然-乌拉尔甘草提取物复配采用的是碱性条件下发生c-c偶联反应，这种结合更为紧密，所生成的复合物具有黄酮类结构，共轭双键和丰富的酚羟基使得其的抗氧化能力更强，因此对于酪氨酸酶催化活性有更好的抑制效果，酪氨酸酶是黑色素生物合成过程中的第一限速酶，对其的抑制效果越好即可以越好地抑制黑色素的合成从而达到祛斑，提亮肤色的功效，而实施例4在此基础上进一步加入了黄芩发酵提取物能提升面膜的美白效果。
45.测试例2对对比例及实施例进行了抑制黑色素合成的活性测试，黑色素是由黑色素细胞产生的一种生物色素，广泛存在于人的皮肤，头发和视网膜等，正常含量的黑色素能够帮助皮肤免受紫外线的伤害，但黑色素分泌过多，会导致皮肤色素沉着过度，容易引起雀斑、黄褐
斑和皮肤癌等。因此，抑制黑色素的生成或是加速已有黑色素的分解对改善肤色问题是至关重要的。测试方法参考t/zhca 012-2020《化妆品美白功效测试 斑马鱼胚胎黑色素抑制功效测试方法》团体标准，“水中小白鼠”斑马鱼，作为一种与人类基因相似度高达87%的模式生物，以斑马鱼胚胎为基础的实验结果一般情况下均适用于人体，斑马鱼在发育初期全身透明，胚胎发育至24h事黑色素开始从视网膜上皮生长。色素细胞起源于背部外胚层分化的神经嵴细胞，然后增值、迁徙、分化成色素母细胞。用受试物干预斑马鱼的黑色素形成过程，可抑制黑色素的形成，通过与正常对照组的比较可以计算受试物对于黑色素的抑制效率。选取发育正常的6hpf的斑马鱼胚胎，放入六孔板中，每孔15枚，在不伤害胚胎的情况下除去六孔板中的标准稀释水，向每孔中迅速加入3ml受试物溶液。孵育结束后，从表型和行为正常的斑马鱼中随机选取至少12尾斑马鱼，用3#甲基纤维素固定，在体视显微镜下观察并拍照，所有斑马鱼拍照时体位保持一致。照片使用图像分析软件进行分析，选取定量区域为斑马鱼头部边缘（除眼睛部分）至与卵黄囊相切部分。将分析参数校准为od值，以此来计算斑马鱼头部黑色素信号强度，每组的有效数据不少于10个。将黑色素信号强度记为s，计算受试物的祛斑作用即黑色素抑制率，公式如下：黑色素抑制率%=（s
（正常对照组）-s
（供试品组）
）/s
（正常对照组）
表2-黑色素抑制功效测试结果表实验方案黑色素抑制率/%对比例150.02%对比例273.48%实施例160.56%实施例286.30%实施例367.47%实施例487.78%酪氨酸酶是黑色素合成过程中的关键酶，抑制酪氨酸酶活性，可以直接抑制黑色素的合成，然而黑色素是由黑色素细胞分泌产生的，抑制黑色素细胞的增殖，能直接减少黑色素的生成，因此，抑制黑色素的生成或是加速已有黑色素的分解对改善肤色问题的效果更为直接。由表可知，在孜然提取物和乌拉尔提取物进行复合后，由于黄酮类化合物含量的增加，其清除自由基和抑制酪氨酸酶的活性能力均有提升，自由基可以上调酪氨酸酶mrna的表达，使酪氨酸酶的活性增强，因此，清除氧自由基，也会间接抑制酪氨酸酶的催化活性，抑制黑色素的生成，实施例2和4中的复合物中形成的黄酮类物质由于其独特的结构，与酪氨酸酶活性中心的金属离子的螯合能力也大大增强，可以与底物竞争结合酪氨酸酶，因此会阻止酪氨酸酶催化氧化酪氨酸的过程，减少黑色素的生成。
46.测试例3对对比例及实施例进行了抑制祛痘效果测试，选取120位面部有明显的粉刺和痘痘的志愿者，年龄在18-25岁之间，随机分为6组，每组20人，分别使用本发明实施例和对比例制备的祛痘面膜；每天使用一次，在晚上清洁面部后，敷面膜5~10min；三个月后，统计使用后的效果，结果如表3所示。
47.表3-面膜祛痘效果测试结果表实验方案有效率/%
对比例130.98%对比例235.60%实施例150.45%实施例275.34%实施例372.98%实施例490.20%有效：脸上粉刺和痘痘得到减少，没有或有极少新的粉刺和痘痘长出；痘印颜色明显变浅。
48.无效：粉刺和痘痘无明显变化，偶尔有新的粉刺和痘痘长出，痘印颜色无变化或者变深。
49.由表3可知，加入了黄芩发酵水提液的美白面膜具备较好的祛痘效果，黄芩作为一种经典的中草药，有抗菌、抗过敏、抗炎和抗肿瘤的功效。黄芩中的活性物质主要为黄酮类化合物，如黄芩苷，黄芩素，汉黄芩苷和汉黄芩素，而发酵处理能增强黄芩中部分功能化物质的转化，本发明中采用特定的菌群对黄芩进行发酵处理后再添加到面膜中，与其他成分共同作用使得其具备极好的祛痘美白效果，且黄芩发酵物成分天然无刺激适宜长期使用。