迷迭香提取物在治疗病毒性肝炎药物中的应用的制作方法

本发明属于医药，具体涉及迷迭香提取物在治疗病毒性肝炎药物中的应用。

背景技术：

1、肝炎病毒是引起人类急性肝病和慢性感染的主要病原，全球约有几亿人口肝炎病毒慢性感染，为肝衰竭、肝硬化和肝癌的好发族群。目前临床治疗方式包括alpha干扰素、核苷酸类药物等，对肝炎病毒治疗效果有限，治疗后常出现抗药性和高复发率等问题。迷迭香提取物中的主要化学成分为鼠尾草酸、鼠尾草酚、迷迭香酚、熊果酸、迷迭香酸等，在食品工业、医药、化妆领域应用广泛。迷迭香提取物具有抗菌、抑制病毒复制、抗肝炎、保护肝损伤、抗氧化还原、降血脂、抗炎镇痛、提高细胞免疫力、防腐、抗血栓等作用，作为药物活性成分使用时，用量小，效果好，耐药发生率低，停药后复发率低，医药领域的需求约占全球迷迭香总需求量的14％。

2、申请号为201810468956.2的专利提供了一种油溶迷迭香提取物及其制备方法与应用，该发明将粉状迷迭香提取物和萃取溶剂混合后萃取，固液分离，取液体浓缩，得到迷迭香提取物浸膏；将迷迭香提取物浸膏预热后加入油溶乳化剂，搅拌乳化，得到油溶迷迭香提取物，该发明制备工艺简单，原材料易得，制得的液态油溶迷迭香提取物体系透明，无沉淀，流动性和稳定性良好，可应用于食品、药品和日化产品；申请号为202110502744.3的专利提供了一种水溶性的迷迭香抗氧化剂及其制备方法和用途，所述抗氧化剂包括油状液体的迷迭香脂溶性抗氧化剂、蛋白质粉末、水、无水乙醇、食用油和乳化剂，该发明利用极性溶剂使蛋白变性，暴露出疏水和氢键位点，并牵引脂溶性的迷迭香抗氧化剂富集于蛋白表面，赋予其一定的水溶性，该方法制备工艺简单，制备出的水溶性的迷迭香抗氧化剂可应用于食品、药品、化妆品。在现有技术中，迷迭香提取物为脂溶性或水溶性，其作为活性成分应用于药物时，也仅能表现出水溶特性或脂溶特性，脂溶性药物可与细胞膜的磷脂双分子层相互融合，易于吸收，与水溶性药物相比，脂溶性药物更易通过肝脏代谢，代谢产物经肾排出，但药物脂溶性较强时，可能会聚积在角质层而不被吸收。皮肤细胞膜是类脂性的，而组织液则又是极性的，故既具有一定脂溶性并有适当水溶性的药物穿透作用最大，作用效果最显著。

3、因此，开发一种含两溶性的迷迭香提取物的药物对于治疗病毒性肝炎具有重要的意义。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种迷迭香提取物的制备方法及其在治疗病毒性肝炎药物中的应用。

2、本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：

3、迷迭香提取物在治疗病毒性肝炎药物中的应用，所述迷迭香提取物的制备方法为：

4、s1、将新鲜的迷迭香枝叶真空冷冻干燥、粉碎，得到迷迭香枝叶粉末；

5、s2、将步骤s1所得迷迭香枝叶粉末用70-80％乙醇进行超声辅助热回流提取，得到提取液，对提取液进行离心，收集上清液浓缩后得到迷迭香提取物浸膏；

6、s3、将单硬脂酸甘油酯与40-50％乙醇混合，于40-50℃搅拌30-35min，得到混合液1；山梨醇溶于水，得到混合液2；将混合液2加入混合液1，于45-50℃继续搅拌40-50min，得到两溶性表面活性剂；

7、s4、将步骤s2所得迷迭香提取物浸膏加热至45-65℃，再加入步骤s3所得两溶性表面活性剂，进行超声辅助表面活性处理，表面活性处理完成后固液分离，取液体喷雾干燥，即得两溶性的迷迭香提取物。

8、本发明所述迷迭香提取物经两溶性表面活性剂处理后，具有良好的水溶性和脂溶性；所述两溶性表面活性剂由单硬脂酸甘油酯和山梨醇制备而成，山梨醇是不含酒精与化学溶剂的植物的混合物，是一种人体能缓慢代谢的糖醇，含有脂溶性及水溶性的表面活性成分，适合作为油脂的表面处理剂，其对单硬脂酸甘油酯进行表面处理后，能够赋予其一定的水溶性，单硬脂酸甘油酯是一种非离子型的表面活性剂，它既有亲水又有亲脂基团，具有润湿、乳化等多种功能，对山梨醇进行表面处理，能够赋予其一定的脂溶性，两者复配得到两溶性表面活性剂，该表面活性剂具有良好的水溶性和脂溶性；同时，山梨醇与单硬脂酸甘油酯协同增效，利用极性亲水基团和非极性疏水基团的作用，使迷迭香提取物具有水溶性和脂溶性，并提高了迷迭香提取物的分散性和稳定性。

9、为了制备出纳米级迷迭香提取物，步骤s1中所述新鲜的迷迭香枝叶在真空冷冻干燥前的预处理为：将新鲜的迷迭香枝叶于-10～-5℃冷冻12-24h；所述真空冷冻干燥的压强为10-15pa，时间为10-12h；所述粉碎采用高压均质法，高压均质操作压力为1100-1300bar，循环12-18次；步骤s2中所述迷迭香枝叶粉末与70-80％乙醇的固液比为1kg:5-10l，超声辅助热回流提取温度为40-70℃，时间为1.0-2.5h，超声功率为110-140w。

10、为了得到两溶性的表面活性处理剂和迷迭香提取物，步骤s3中所述单硬脂酸甘油酯与40-50％乙醇的质量比为1:5-8，山梨醇与水的质量比为1:4-6；步骤s4中所述超声辅助表面活性处理温度为45-65℃，时间为0.5-2.0h，超声功率为100-120w。

11、进一步，以两溶性的迷迭香提取物为原料制备两溶性的迷迭香提取物纳米颗粒，两溶性的迷迭香提取物纳米颗粒的制备方法为：

12、(1)将羧甲基壳聚糖溶解于55-60％乙醇中，滴加庚醛，升温至30-35℃，搅拌0.5-1.5h，再滴加硼氢化钠水溶液，继续搅拌8-10h，盐酸调节ph为7-8，用丙酮沉淀，过滤，取滤渣洗涤、干燥，得到羧甲基壳聚糖衍生物；

13、(2)将两溶性的迷迭香提取物溶解于55-60％乙醇中，得到活性组分溶液；将步骤(1)所得羧甲基壳聚糖衍生物溶解于55-60％乙醇中，得到载体溶液；向载体溶液中滴加活性组分溶液并进行搅拌，滴毕超声20-30min，喷雾干燥，即得。

14、以羧甲基壳聚糖为原料，进行烷基化处理，制备两溶性的羧甲基壳聚糖衍生物，再以两溶性的迷迭香提取物为核，用两溶性的羧甲基壳聚糖衍生物进行包覆，制备出具有核壳结构的迷迭香提取物纳米颗粒，该纳米颗粒不仅具有良好的水溶性和脂溶性，还具有优异的抑菌性能和缓释效果；壳聚糖及其衍生物具有无毒、抑菌、易成膜等优点，山梨醇与羧甲基壳聚糖衍生物具有很好的相容性，能够促使羧甲基壳聚糖衍生物在迷迭香提取物外表面形成连续、均匀的膜；单硬脂酸甘油酯与羧甲基壳聚糖衍生物协同作用能够进一步提高纳米颗粒的控缓释效果。

15、为了制备两溶性的羧甲基壳聚糖衍生物，并保证产物的一致性，步骤(1)中所述羧甲基壳聚糖、庚醛与硼氢化钠的质量比为1:1.0-1.1:0.02-0.05，羧甲基壳聚糖与55-60％乙醇的固液比为1kg:55-70l，硼氢化钠水溶液的质量分数为0.5-2.0％，所述洗涤为依次用正己烷和丙酮-水洗涤，丙酮与水的体积比为80-85:15，所述干燥是于45-55℃真空干燥24-30h。

16、为了得到两溶性的迷迭香提取物纳米颗粒，步骤(2)中所述两溶性的迷迭香提取物与55-60％乙醇的固液比为1kg:8-11l，羧甲基壳聚糖衍生物与55-60％乙醇的固液比为1kg:60-70l。

17、进一步，将两溶性的迷迭香提取物纳米颗粒和药学上可接受的载体制备成口服剂型或注射剂型药物。

18、本发明具有如下有益效果：本发明对迷迭香提取物浸膏进行表面处理，得到两溶性的迷迭香提取物，再以两溶性的迷迭香提取物为核，以两溶性的羧甲基壳聚糖衍生物为壳，制备出具有核壳结构的迷迭香提取物纳米颗粒，该纳米颗粒具有良好的水溶性、脂溶性、分散性和储存稳定性，优异的抑菌性能和控缓释效果，能够与药学上可接受的载体制备成各种口服剂型或注射剂型药物，作为治疗病毒性肝炎药物时易吸收、抗病毒性效果好、副作用小、耐药发生率低、停药后复发率低。