一种用于治疗炎症性肠病的药物

本发明属于生物医药，具体涉及一种用于治疗炎症性肠病的药物。

背景技术：

1、炎症性肠病(inflammatory bowel disease，ibd)是一种消化道常见的自身免疫性疾病，包括溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，uc)和克罗恩病(crohn's disease，cd)。th17细胞是cd4+t细胞在il-6和tgf-β1共同作用下诱导分化成的一群以分泌高水平il-17a、il-17f、il-21、il-22等细胞因子为主要特征的效应性t细胞，广泛参与感染、肿瘤、自身免疫性疾病等疾病的发生发展。分析ibd患者肠道组织浸润细胞的组成成分以及来自小鼠ibd的研究数据均证实，效应性th17细胞在肠道粘膜炎症中发挥重要作用(jun-binyan，min-min luo，zhi-yun chen，bei-hui he.the functionand role of the th 1 7/treg cell balance in inflammatory bowel disease.j immunol res2020，2020：8813558.)。il-17a一方面招募中性粒细胞至炎症区域，另一方面诱发巨噬细胞释放炎症因子，进一步加重局部炎症(veldhoen m.interleukin 17is a chief orchestrator ofimmunity.nature immunology 2017，18(6)：612-621.)。哺乳动物的肠道定居着微生物群，这些菌群和免疫细胞之间的相互作用对维持肠道免疫稳态至关重要。肠道菌群能促进th17细胞分化和th17细胞因子表达。

2、胞外囊泡(extracellular vesicles，evs)是活细胞分泌的具有脂质双分子结构的小囊泡，可分为外泌体、核外颗粒、凋亡小体和癌小体4个亚群。作为一种天然内源性药物载体，它有其独特的优势：直径为纳米级别，可以穿透包括血脑屏障在内的多种屏障；具有复杂的蛋白质和磷脂双层结构，可以更好地保护药物不被身体清除；免疫原性低，作为载体携带药物或药用蛋白进行治疗时不会引起宿主的免疫反应。

技术实现思路

1、本申请研究发现，肠道菌群通过trim21/fbxw7信号轴促进th17细胞的体外分化，本申请构建了缺失泛素化功能的trim21结构域(tδr)，tδr能有效拮抗trim21与fbxw7结合，从而抑制th17细胞分化。

2、本发明首先提供了装载靶向药物和trim21蛋白结构域的胞外囊泡在制备治疗炎症性肠病的药物中的应用，

3、所述靶向药物为能够将所述胞外囊泡靶向cd4+t细胞的靶向药物，

4、所述trim21蛋白结构域为缺失泛素化功能的trim21蛋白结构域。

5、优选的，所述靶向药物为cd4-scfv，氨基酸序列如seq id no.1所示；

6、缺失泛素化功能的trim21蛋白结构域的氨基酸序列如seq id no.2所示。

7、优选的，所述靶向药物和trim21蛋白结构域均连接有gpi锚定序列，gpi锚定序列的氨基酸序列如seq id no.3所示。

8、所述胞外囊泡为外泌体、凋亡小体、癌小体或核外颗粒；

9、用于荷载药物的胞外囊泡来源于人或其他哺乳动物的乳汁、血液、唾液、尿液或脑脊液。

10、优选的，所述靶向药物和trim21蛋白结构域饱和装载到胞外囊泡中，也即，在装载时，相对于胞外囊泡来说，靶向药物和trim21蛋白结构域添加过量，并且装载后分离出去多余未装载的靶向药物和trim21蛋白结构域。

11、本发明还提供了一种用于治疗炎症性肠病的药物，所述药物为装载靶向药物和trim21蛋白结构域的胞外囊泡，

12、所述靶向药物为能够将所述胞外囊泡靶向cd4+t细胞的靶向药物，

13、所述trim21蛋白结构域为缺失泛素化功能的trim21蛋白结构域。

14、优选的，所述靶向药物为cd4-scfv，氨基酸序列如seq id no.1所示；

15、缺失泛素化功能的trim21蛋白结构域的氨基酸序列如seq id no.2所示。

16、优选的，所述靶向药物和trim21蛋白结构域均连接有gpi锚定序列，gpi锚定序列的氨基酸序列如seq id no.3所示。

17、所述胞外囊泡为外泌体、凋亡小体、癌小体或核外颗粒；

18、用于荷载药物的胞外囊泡来源于人或其他哺乳动物的乳汁、血液、唾液、尿液或脑脊液。

19、优选的，所述靶向药物和trim21蛋白结构域饱和装载到胞外囊泡中，也即，在装载时，相对于胞外囊泡来说，靶向药物和trim21蛋白结构域添加过量，并且装载后分离出去多余未装载的靶向药物和trim21蛋白结构域。

20、外泌体是各种活细胞分泌的直径介于30-150纳米具有脂质双分子层结构的小囊泡。目前，由于外泌体具有更低的免疫原性、更高的生物兼容性、更高的工程化修饰潜能、极易穿透血脑屏障以及逃逸溶酶体降解的特征，因此外泌体己成为一种非常有前景的药物输送载体，获得了研究者们的广泛关注。

21、本申请通过把能够将胞外囊泡靶向cd4+t细胞的靶向药物和缺失泛素化功能的trim21蛋白结构域装载到胞外囊泡中，由靶向药物将整个载药的胞外囊泡靶向运输到cd4+t细胞，再由缺失泛素化功能的trim21蛋白结构域与细胞内宿主trim21竞争性结合fbxw7，从而拮抗肠道菌群促进th17细胞分化的作用，起到治疗炎症性肠病的目的。

技术特征：

1.装载靶向药物和trim21蛋白结构域的胞外囊泡在制备治疗炎症性肠病的药物中的应用，

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述靶向药物为cd4-scfv，氨基酸序列如seq id no.1所示；

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述靶向药物和trim21蛋白结构域均连接有gpi锚定序列，gpi锚定序列的氨基酸序列如seq id no.3所示。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述胞外囊泡为外泌体、凋亡小体、癌小体或核外颗粒；

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述靶向药物和trim21蛋白结构域饱和装载到胞外囊泡中。

6.一种用于治疗炎症性肠病的药物，其特征在于，所述药物为装载靶向药物和trim21蛋白结构域的胞外囊泡，

7.根据权利要求6所述用于治疗炎症性肠病的药物，其特征在于，所述靶向药物为cd4-scfv，氨基酸序列如seq id no.1所示；

8.根据权利要求6所述用于治疗炎症性肠病的药物，其特征在于，所述靶向药物和trim21蛋白结构域均连接有gpi锚定序列，gpi锚定序列的氨基酸序列如seq id no.3所示。

9.根据权利要求6所述用于治疗炎症性肠病的药物，其特征在于，所述胞外囊泡为外泌体、凋亡小体、癌小体或核外颗粒；

10.根据权利要求6所述用于治疗炎症性肠病的药物，其特征在于，所述靶向药物和trim21蛋白结构域饱和装载到胞外囊泡中。

技术总结
本发明公开了一种用于治疗炎症性肠病的药物，所述药物为装载靶向药物和Trim21蛋白结构域的胞外囊泡，所述靶向药物为能够将所述胞外囊泡靶向CD4<supgt;+</supgt;T细胞的靶向药物，所述Trim21蛋白结构域为缺失泛素化功能的Trim21蛋白结构域。本申请通过把能够将胞外囊泡靶向CD4<supgt;+</supgt;T细胞的靶向药物和缺失泛素化功能的Trim21蛋白结构域装载到胞外囊泡中，由靶向药物将整个载药的胞外囊泡靶向运输到CD4<supgt;+</supgt;T细胞，再由缺失泛素化功能的Trim21蛋白结构域与细胞内宿主Trim21竞争性结合FBXW7，从而拮抗肠道菌群促进Th17细胞分化的作用，起到治疗炎症性肠病的目的。

技术研发人员：蔡志坚,沈颖颖,王建莉,马泽宇
受保护的技术使用者：浙江大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13