WTAP的抑制剂在制备治疗特应性皮炎药物中的应用

本发明属于生物医药，具体涉及wtap的抑制剂在制备治疗ad药物中的应用。

背景技术：

1、特应性皮炎(atopic dermatitis,ad)是一种慢性复发性炎症性皮肤病，其临床特征包括皮肤屏障受损、强化瘙痒和慢性皮肤炎症，严重影响全球约15％-20％的儿童和1％-3％的成人的生活质量。ad的发病机制涉及屏障功能障碍、免疫细胞异常激活、ige介导的超敏反应和环境因素等等。最近的研究证实了表观遗传变化在ad发展中的关键作用，包括基因组dna修饰和microrna转录后调控。

2、n6-甲基腺嘌呤(m6a)是真核细胞中最丰富的rna动态可逆内部化学修饰，在多种生物功能中起着至关重要的作用。m6a修饰由“writers”、“erasers”和“readers”蛋白共同调控，从而影响rna的转录、加工、翻译和代谢。研究表明，m6a修饰与炎症、癌症、代谢、神经和免疫系统疾病密切相关。

3、研究一种治疗ad的新药物或者新方法具有重要意义。

技术实现思路

1、本发明旨在提供一种可以用于制备治疗ad药物的新靶点。在本研究中，我们研究了m6a修饰在ad发生发展中的潜在作用。我们发现肾母细胞瘤1相关蛋白(wtap)可以通过介导m6a水平增加15-花生四烯酸脂氧合酶(alox15)、钙卫蛋白(s100a9)和丝氨酸蛋白酶抑制剂b3(serpinb3)的表达水平，参与ad的病理生理发展。

2、本发明的技术方案是：

3、wtap的抑制剂在制备治疗特应性皮炎药物中的应用。

4、优选的，所述wtap的抑制剂为sirna。进一步优先的，所述wtap的抑制剂如seq idno.17所示。

5、本发明还提供了wtap作为分子标志物在制备诊断特应性皮炎检测试剂盒中的应用。

6、本发明研究表明，在本研究中通过对m6a转录组芯片数据的分析，我们发现了ad中差异m6a甲基化的基因以及mrna水平差异化表达基因(degs)。我们发现所有筛选的degs和大部分通路同时出现“hypo-down”或“hyper-up”富集，提示m6a修饰与ad中mrna的表达呈正相关。根据富集分数和fisher p value的排序，我们确定了16个感兴趣的差异化通路，包括10个上调通路和6个下调通路，我们分析出了参与这些感兴趣通路的degs的m6a水平和mrna水平的排序。此外，通过测序结果我们发现“writer”wtap的mrna表达差异在正常对照和ad中最为明显。

7、接下来，我们通过临床样本验证证实了与正常皮肤相比，ad病变中wtap的mrna和蛋白水平显著上调。wtap在ad皮损的表皮角质形成细胞中高表达，而在正常皮肤中低表达。我们还证实了，与正常皮肤相比，测序结果中上调最明显的前三个de(alox15、s100a9和serpinb3)在ad病变中s100a9和serpinb3的mrna和蛋白水平显著上调，而alox15只有蛋白水平在ad中显著上调，mrna水平与正常皮肤相比无显著差异。通过免疫荧光检测发现wtap、s100a9和serpinb3在ad患者表皮病变中的荧光强度明显高于正常对照组，而alox15在ad真皮病变中显著升高。

8、根据gse193309数据集结果的相关性分析显示，wtap的表达水平与s100a9和serpinb3呈正相关，而与alox15无显著相关。ad患者皮损比正常对照有更高的总m6a甲基化水平。此外，ad组s100a9和serpinb3 mrna的m6a水平较正常对照组显著升高。然而，我们没有得到alox15在正常对照或ad组中的mrna的m6a水平。这些数据表明，alox15、s100a9和serpinb3是m6a rna甲基化的下游靶点，可能通过wtap进行调控。本发明还在细胞水平上验证了wtap调控alox15、s100a9和serpinb3的表达。

9、总之，本发明描述了m6a修饰在ad的病理发展中起的潜在作用，并证明了wtap通过m6a修饰上调alox15、s100a9和serpinb3的表达，从而在参与ad的病理发展。我们的研究结果支持这样的概念：wtap在皮损中高表达促进特应性皮炎皮损形成，靶向wtap分子可为制备治疗特应性皮炎药物提供新的思路。

技术特征：

1.wtap的抑制剂在制备治疗特应性皮炎药物中的应用。

2.根据权利要求1所述应用，所述wtap的抑制剂为sirna。

3.根据权利要求1所述应用，所述wtap的抑制剂如seq id no.15所示。

4.wtap作为分子标志物在制备诊断特应性皮炎检测试剂盒中的应用。

技术总结
本发明公开了WTAP的抑制剂在制备治疗特应性皮炎药物中的应用，所述抑制剂为siRNA。本发明还公开了WTAP作为分子标志物在制备特应性皮炎检测试剂盒中的应用。我们的研究结果支持：WTAP在皮损中高表达促进特应性皮炎皮损形成，靶向抑制WTAP分子可为制备治疗特应性皮炎药物提供新的思路。

技术研发人员：曾金荣,鲁建云,谭丽娜,陈雪,周璐,童晓亮,闫思聿
受保护的技术使用者：中南大学湘雅三医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13