用于治疗脊髓损伤的组合物和方法与流程

文档序号:37314530发布日期:2024-03-13 21:07阅读:52来源:国知局

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::1、脊髓损伤(sci)是一种毁灭性且目前无法治疗的病况,除了某些由此产生的并发症的对症治疗外。脊髓损伤导致运动、感觉和自主功能的完全或部分丧失。结果,除了遭受许多医疗并发症之外,患者还经常失去行动能力,并且可能需要坐轮椅。每年有超过12,000名美国人遭受脊髓损伤(sci),据估计,美国有约130万人患有脊髓损伤。创伤性sci最常影响二三十岁的个体,导致年轻人和以前健康的个体中高水平的永久性残疾。患有sci的个体不仅具有受损的肢体功能,而且遭受受损的肠道和膀胱功能、减退的感觉、痉挛、自主神经反射异常、血栓、性功能障碍、增加的感染、褥疮溃疡和慢性疼痛,这些可能各自严重影响生活质量,并且在一些情况下甚至可能危及生命。20岁时患有颈脊髓损伤的个体的预期寿命比没有sci的同龄个体低20-25年(nscisc spinal cord injury facts and figures2013)。迄今为止,尚无美国食品药品监督管理局(fda)批准用于诱导脊髓损伤(sci)后的神经学恢复的治疗。包括糖皮质激素、电压门控通道调节、四环素抗生素和基于细胞的疗法在内的几种干预措施已在临床试验中进行了研究,但迄今为止尚未达到关键的注册终点。2、脊髓损伤的临床效果随损伤的部位和程度而不同。可能被永久性破坏到损伤水平以下的神经系统不仅牵涉肢体肌肉的控制以及温度和痛觉的保护作用的丢失,还影响心血管系统、呼吸、出汗、肠道控制、膀胱控制和性功能(anderson kd,friden j,lieberrl.acceptable benefits and risks associated with surgically improving armfunction in individuals living with cervical spinal cord injury.spinalcord.2009apr;47(4):334-8)。这些损失导致一系列继发性问题,例如压疮和尿路感染,在现代医学之前,这些问题很快就会致命。脊髓损伤通常消除维持脊髓神经回路的适当兴奋性水平的那些无意识控制机制。结果,脊髓运动神经元可自发地过度活跃,产生令人衰弱的僵硬和不受控制的肌肉痉挛或僵直状态。这种过度活跃还可导致感觉系统产生慢性神经源性疼痛和感觉异常,不愉快感觉包括麻木、刺痛、疼痛和烧灼感。在最近对脊髓损伤患者的民意调查中,行走功能的恢复并不是这些患者希望恢复的最高排名的功能,而在许多情况下,自发性多动后遗症的缓解是最重要的(anderson kd,friden j,lieber rl.acceptablebenefits and risks associated with surgically improving arm function inindividuals living with cervical spinal cord injury.spinal cord.2009apr;47(4):334-38)。3、存在对于脊髓损伤和相关病理的治疗的需求。技术实现思路1、本文提出的实施例和实施方案描述了用于治疗脊髓损伤(sci)的人胚胎干细胞(hesc)来源的细胞,如本文更详细地描述的。2、例如,根据本公开内容获得的opc组合物可用于细胞治疗中以改善需要治疗的受试者中的一种或多种神经功能。在一个实施方案中,根据本公开内容的opc细胞群可以被注射、植入或以其他方式递送至有需要的受试者中。在一个实施方案中,根据本公开内容的细胞群可以被植入或以其他方式递送至有需要的受试者中以治疗脊髓损伤、中风或多发性硬化症。3、lctopc1是一个细胞群,其含有在已建立且良好表征的hesc系的定向分化后获得的少突胶质细胞祖细胞和其他特征细胞类型的混合物。ast-opc1(以前称为grnopc1)是一个细胞群,其包含在未分化的人胚胎干细胞(uhesc)的分化后获得的少突胶质细胞祖细胞(opc)和其他特征细胞类型的混合物。少突胶质细胞祖细胞(opc)是中枢神经系统(cns)中神经胶质细胞的一种亚型,其在大脑和脊髓的心室区中产生,并在成熟为少突胶质细胞之前迁移到整个发育中的cns。成熟的少突胶质细胞产生髓鞘,该髓鞘隔离神经元轴突,并在髓鞘丢失的cns病变处进行髓鞘再生。少突胶质细胞还通过其他机制促成神经保护,包括产生促进神经元存活的神经营养因子(wilkins等人,2001glia 36(1):48-57;dai等人,2003jneurosci.23(13):5846-53;du和dreyfus,2002j neurosci res.68(6):647-54)。与大多数祖细胞不同,opc在成体cns中仍然丰富,在那里它们保留了生成新少突胶质细胞的能力。因此,opc和源自opc的成熟少突胶质细胞是用于脱髓鞘和髓鞘形成障碍病症(例如多发性硬化症、肾上腺脑白质营养不良和肾上腺脊髓神经病)、其他神经退行性病症(例如阿尔茨海默病、肌萎缩侧索硬化症和亨廷顿病)和急性神经系统损伤(例如中风和脊髓损伤(sci))的重要治疗靶点。4、根据本公开内容获得的opc组合物可用于细胞疗法中以改善需要治疗的受试者中的一种或多种神经功能。在一个实施方案中,根据本公开内容的opc细胞群可以被注射或植入到有需要的受试者中。在一个实施方案中,根据本公开内容的细胞群可以被植入到有需要的受试者中以治疗脊髓损伤、中风或多发性硬化症。5、在某些实施方案中,opc1组合物在受试者遭受创伤性脊髓损伤后施用。在一些实施方案中,opc1组合物在脊髓损伤后14-90天之间,例如在脊髓损伤后14-75天之间,例如在脊髓损伤后14-60天之间,例如在损伤后14-30天之间,例如在损伤后20-75天之间,例如在损伤后20-60天之间,例如在损伤后20-40天之间施用。在某些实施方案中,opc1组合物在损伤后约14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、5,、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89或90天施用。在某些实施方案中,opc1组合物在14天至受试者的终生之间施用。6、用于从未分化的人多能干细胞获得包含背神经祖细胞(dnpc)的细胞群的方法和组合物可见于wo/2020/154533、wo/2020/061371、美国专利号10,286,009、wo/2017/031092、wo/2017/173064和wo/2018/053210,其各自对于其中提供的所有方法、组合物、细胞、数据、定义、用途和所有其他信息通过引用以其整体并入本文。7、在一个方面,提供了一种改善患有脊髓损伤(sci)的受试者中的一种或多种神经功能的方法,该方法包括:向受试者施用第一剂量的组合物,该组合物包含人多能干细胞来源的少突胶质细胞祖细胞(opc);和任选地施用两个或更多个剂量的所述组合物。8、在一些实施方案中,该方法还包括向受试者施用第二剂量的组合物。在一些实施方案中,该方法还包括向受试者施用第三剂量的组合物。在一些实施方案中,每次施用包括例如通过注射将组合物递送至受试者的脊髓中。在一些实施方案中,每次施用包括递送剂量的两个或更多个部分。在一些实施方案中,sci是亚急性颈部sci。在一些实施方案中,sci是慢性颈部sci。在一些实施方案中,sci是亚急性胸部sci。在一些实施方案中,sci是慢性胸部sci。在一些实施方案中,组合物的第一剂量、第二剂量和/或第三剂量包含约1×106至约3×107个opc细胞。在一些实施方案中,组合物的第一剂量包含约2×106个opc细胞。在一些实施方案中,组合物的第一剂量或第二剂量包含约1×107个opc细胞。在一些实施方案中,组合物的第二剂量或第三剂量包含约2×107个opc细胞。在一些实施方案中,组合物的第一剂量、第二剂量和第三剂量各自在sci后约20至约45天施用。在一些实施方案中,组合物的第一剂量、第二剂量和第三剂量各自在sci后约14至约90天施用。在一些实施方案中,组合物的第一剂量、第二剂量和第三剂量各自在sci后约14至约75天施用。在一些实施方案中,组合物的第一剂量、第二剂量和第三剂量各自在sci后约14至约60天施用。在一些实施方案中,组合物的第一剂量、第二剂量和第三剂量各自在sci后约14至约30天施用。在一些实施方案中,组合物的第一剂量、第二剂量和第三剂量各自在sci后约20至约75天施用。在一些实施方案中,组合物的第一剂量、第二剂量和第三剂量各自在sci后约20至约60天施用。在一些实施方案中,组合物的第一剂量、第二剂量和第三剂量各自在sci后约20至约40天施用。在一些实施方案中,组合物的第一剂量、第二剂量和第三剂量各自在sci后约14天至受试者的终生之间施用。在一些实施方案中,注射在sci的中心的尾半部进行。在一些实施方案中,注射进入受试者的脊髓约6mm。在一些实施方案中,注射进入受试者的脊髓约5mm。9、在另一个方面,提供了一种改善患有脊髓损伤(sci)的受试者中的一种或多种神经功能的方法,该方法包括:向受试者施用一定剂量的组合物,该组合物包含人多能干细胞来源的少突胶质细胞祖细胞(opc)。10、在一些实施方案中,组合物的剂量包括约1×106至约3×107个opc细胞。在一些实施方案中,组合物的剂量包括约2×106个opc细胞。在一些实施方案中,组合物的施用包括将组合物注射、植入或以其他方式递送至受试者的脊髓中。在一些实施方案中,组合物的剂量在sci后约7至约14天施用。在一些实施方案中,注射在sci的中心的尾半部进行。在一些实施方案中,注射进入受试者的脊髓约6mm。在一些实施方案中,注射进入受试者的脊髓约5mm。在一些实施方案中,sci是亚急性胸部sci。在一些实施方案中,sci是慢性胸部sci。在一些实施方案中,sci是亚急性颈部sci。在一些实施方案中,sci是慢性颈部sci。在一些实施方案中,改善一种或多种神经功能包括isncsci检查上肢运动评分(uems)的改善。在一些实施方案中,uems的改善发生在注射后约6个月、约12个月、约18个月、约24个月或更长时间内。在一些实施方案中,改善是与基线相比,uems增加至少10%。在一些实施方案中,改善一种或多种神经功能包括改善下肢运动评分(lems)。在一些实施方案中,lems的改善发生在注射后约6个月、约12个月、约18个月、约24个月或更长时间内。在一些实施方案中,改善是至少一种运动水平改善。在一些实施方案中,改善是至少两种运动水平的改善。在一些实施方案中,改善是在受试者身体的一侧。在一些实施方案中,改善是在受试者身体的两侧。在一些实施方案中,组合物的剂量在sci后约14至90天施用。在一些实施方案中,组合物的剂量在sci后约14至约75天施用。在一些实施方案中,组合物的剂量在sci后约14至约60天施用。在一些实施方案中,组合物的剂量在sci后约14至约30天施用。在一些实施方案中,组合物的剂量在sci后约20至约75天施用。在一些实施方案中,组合物的剂量在sci后约20至约60天施用。在一些实施方案中,组合物的剂量在sci后约20至约40天施用。在一些实施方案中,组合物的剂量在sci后约14天至受试者的终生之间施用。11、在另一个方面,提供了一种细胞群,该细胞群包括增加比例的少突胶质细胞祖细胞标志物ng2阳性细胞和减少的非opc标志物cd49f、cldn6和epcam的表达,其中该细胞群是按照以下方法制备:在含有mapk/erk抑制剂、bmp信号传导抑制剂和视黄酸的神经胶质祖细胞培养基中培养未分化的人胚胎干细胞(uhesc),以获得神经胶质限制性细胞;将神经胶质限制性细胞分化为具有增加比例的少突胶质细胞祖细胞标志物ng2阳性细胞和减少的非opc标志物cd49f、cldn6和epcam的表达的少突胶质细胞祖细胞(opc)。12、在一些实施方案中,细胞群用于治疗受试者的胸脊髓损伤(sci)。在一些实施方案中,胸部sci是亚急性胸部sci。在一些实施方案中,胸部sci是慢性胸部sci。在一些实施方案中,细胞群用于治疗受试者的颈脊髓损伤(sci)。在一些实施方案中,颈部sci是亚急性颈部sci。在一些实施方案中,颈部sci是慢性颈部sci。在一些实施方案中,通过植入或其他递送方法施用组合物。在一些实施方案中,在sci后通过注射将组合物施用至受试者。在一些实施方案中,注射在sci的中心的尾半部进行。在一些实施方案中,注射进入受试者的脊髓约6mm。在一些实施方案中,注射进入受试者的脊髓约5mm。在一些实施方案中,注射在sci后约14至约90天进行。在一些实施方案中,注射在sci后约14至约75天进行。在一些实施方案中,注射在sci后约14至约60天进行。在一些实施方案中,注射在sci后约14至约30天进行。在一些实施方案中,注射在sci后约20至约75天进行。在一些实施方案中,注射在sci后约20至约60天进行。在一些实施方案中,注射在sci后约20至约40天进行。在一些实施方案中,注射在sci后约14天至受试者的终生之间进行。13、在另一个方面,提供了一种改善患有脊髓损伤(sci)的受试者中的一种或多种神经功能的方法,该方法包括:向受试者施用第一剂量的权利要求54的细胞群;向受试者施用第二剂量的细胞群;以及任选地向受试者施用第三剂量的细胞群。14、在一些实施方案中,sci是亚急性颈部sci。在一些实施方案中,sci是慢性颈部sci。在一些实施方案中,sci是亚急性胸部sci。在一些实施方案中,sci是慢性胸部sci。在一些实施方案中,组合物的第一剂量、第二剂量和第三剂量各自在sci后约14至约90天施用。在一些实施方案中,组合物的第一剂量、第二剂量和第三剂量各自在sci后约14至约75天施用。在一些实施方案中,组合物的第一剂量、第二剂量和第三剂量各自在sci后约14至约60天施用。在一些实施方案中,组合物的第一剂量、第二剂量和第三剂量各自在sci后约14至约30天施用。在一些实施方案中,组合物的第一剂量、第二剂量和第三剂量各自在sci后约20至约75天施用。在一些实施方案中,组合物的第一剂量、第二剂量和第三剂量各自在sci后约20至约60天施用。在一些实施方案中,组合物的第一剂量、第二剂量和第三剂量各自在sci后约20至约40天施用。在一些实施方案中,组合物的第一剂量、第二剂量和第三剂量各自在sci后约14天至受试者的终生之间施用。当前第1页12当前第1页12
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