用于减少视网膜神经节细胞的变性的方法

背景技术：

1、视觉信息通过视神经从眼睛传输到脑中的高级处理中心，所述视神经是从视网膜的输出神经元(视网膜神经节细胞(rgc))中出现的一束轴突。rgc的丧失是导致各种病理状态下的视觉损伤和失明的主要原因。一些情况会损伤rgc胞体，包含兴奋性毒性和视网膜缺血，而其它情况会损伤rgc轴突，包含视神经切断、压迫、视神经乳头水肿和青光眼。事实上，青光眼是世界范围内不可逆性视觉损伤的主要原因。

2、rgc损伤后恢复视力的障碍是诱导轴突再生。开发有效的神经保护方法来保护rgc以及其功能的临床需求尚未得到满足。对于视网膜缺血和兴奋性毒性的高风险个体，需要早期神经保护治疗来预防急性和大规模rgc丧失。尽管进行了降低眼压的治疗，但仍有相当一部分青光眼患者进展为失明，因此也需要rgc神经保护干预。对于患有外伤性视神经损伤的患者，提高rgc存活率可能有助于视网膜-脑连接的再生。

3、本公开涉及克服本领域中的这些和其它缺陷。

技术实现思路

1、因此，需要鉴定涉及rgc变性或丧失的视觉损伤的治疗方法，如鉴定在广泛的病理学中有效保护rgc胞体和轴突免受不同损伤的靶点。本公开包含鉴定增加ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶活性的药物组合物以及其在治疗rgc变性或丧失和治疗视力损伤中的用途，鉴于现有文献证明camk活性促进兴奋性毒性细胞死亡，包含在rgc中，这是令人惊讶的。本公开还包含鉴定增加环状amp应答元件结合蛋白(creb)的活性的药物组合物，用于治疗rgc变性或丧失和治疗视力损伤。

2、在本文中，一方面，提供了一种减少受试者体内的视网膜神经节细胞的变性的方法，所述方法包含向所述受试者施用组合物以增加camk的活性，其中所述组合物包含所述camk或编码所述camk的多核苷酸。在一个实例中，所述组合物进一步包含载体，例如病毒载体。所述病毒载体可以包含腺相关病毒载体(aav)。

3、在另一个实例中，所述camk选自camki、camkii和camkiv中的一种或多种。在另外的实例中，所述camk选自以下中的一种或多种：camkiiα、camkiiβ、camkiiγ和camkiiδ。在仍另一个实例中，所述camk是组成型活性的。在仍另外的实例中，所述camkii选自包括t286d取代的camkiiα和包括t287d取代的camkiiβ中的一种或两种。

4、在另一个实例中，所述组合物包含编码所述camk的多核苷酸。在另外的实例中，所述多核苷酸进一步包含视网膜神经节细胞启动子。在又另一个实例中，所述视网膜神经节细胞启动子包含γ-突触核蛋白启动子、或突触蛋白1启动子、或神经丝重启动子、或thy-1细胞表面抗原启动子。在仍另一个实例中，所述视网膜神经节细胞启动子包含γ-突触核蛋白启动子。在又另一个实例中，所述组合物包含所述camk。

5、在另一个例子中，所述施用选自眼内施用和全身施用。在又另一个实例中，所述受试者患有或具有患有以下中的一种或多种的风险：青光眼、糖尿病视网膜病变、视网膜缺血和视神经损伤。在仍另一个实例中，预防变性包含预防视网膜神经节细胞胞体和视网膜神经节调用轴突中的一种或两种的减少。

6、另一方面，提供了一种治疗受试者的视力丧失的方法，所述方法包含向所述受试者施用组合物以增加camk的活性，其中所述组合物包含camk或编码所述camk的多核苷酸。在一个实例中，所述组合物进一步包含载体，例如病毒载体。所述病毒载体可以包含aav。

7、在另一个实例中，所述camk选自camki、camkii和camkiv中的一种或多种。在另外的实例中，所述camk选自以下中的一种或多种：camkiiα、camkiiβ、camkiiγ和camkiiδ。在仍另一个实例中，所述camk是组成型活性的。在仍另外的实例中，所述camkii选自包括t286d取代的camkiiα和包括t287d取代的camkiiβ中的一种或两种。

8、在另一个实例中，所述组合物包含编码所述camk的多核苷酸。在另外的实例中，所述多核苷酸进一步包含视网膜神经节细胞启动子。在又另一个实例中，所述视网膜神经节细胞启动子包含γ-突触核蛋白启动子、或突触蛋白1启动子、或神经丝重启动子、或thy-1细胞表面抗原启动子。在仍另一个实例中，所述视网膜神经节细胞启动子包含γ-突触核蛋白启动子。在又另一个实例中，所述组合物包含所述camk。

9、在另一个例子中，所述施用选自眼内施用和全身施用。在又另一个实例中，所述受试者患有或具有患有以下中的一种或多种的风险：青光眼、糖尿病视网膜病变、视网膜缺血和视神经损伤。在仍另一个实例中，预防变性包含预防视网膜神经节细胞胞体和视网膜神经节调用轴突中的一种或两种的减少。在仍另一个实例中，治疗包含预防视力丧失。

10、在又另一方面，提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含多核苷酸和载体，其中所述多核苷酸包含视网膜神经节细胞启动子并编码camk。在又另一个实例中，所述视网膜神经节细胞启动子包含γ-突触核蛋白启动子、或突触蛋白1启动子、或神经丝重启动子、或thy-1细胞表面抗原启动子。在一个实例中，所述视网膜神经节细胞启动子包含γ-突触核蛋白启动子。在另一个实例中，所述载体包含病毒载体。在又另一个实例中，所述载体包含腺相关载体。在另外的实例中，所述camk选自camki、camkii和camkiv中的一种或多种。在又另外的实例中，所述camk选自以下中的一种或多种：camkiiα、camkiiβ、camkiiγ和camkiiδ。

11、在另一个实例中，所述camk是组成型活性的。在仍另一个实例中，所述camkii选自包括t286d取代的camkiiα和包括t287d取代的camkiiβ中的一种或两种。

12、在仍另一方面，提供了一种减少受试者体内的视网膜神经节细胞的变性的方法，所述方法包含向所述受试者施用组合物以增加creb的活性，其中所述组合物包含所述creb或编码所述creb的多核苷酸。在一个实例中，所述组合物进一步包含载体，例如病毒载体。所述病毒载体可以包含腺相关病毒载体(aav)。

13、在另一个实例中，所述creb是组成型活性的。在仍另一个实例中，所述creb包含vp-16creb。在又另一个实例中，所述组合物包含编码所述creb的多核苷酸。在另外的实例中，所述多核苷酸进一步包含视网膜神经节细胞启动子。在又另一个实例中，所述视网膜神经节细胞启动子包含γ-突触核蛋白启动子、或突触蛋白1启动子、或神经丝重启动子、或thy-1细胞表面抗原启动子。在仍另一个实例中，所述视网膜神经节细胞启动子包含γ-突触核蛋白启动子。在又另一个实例中，所述组合物包含所述creb。

14、在另一个例子中，所述施用选自眼内施用和全身施用。在又另一个实例中，所述受试者患有或具有患有以下中的一种或多种的风险：青光眼、糖尿病视网膜病变、视网膜缺血和视神经损伤。在仍另一个实例中，预防变性包含预防视网膜神经节细胞胞体和视网膜神经节调用轴突中的一种或两种的减少。

15、另一方面，提供了一种治疗受试者的视力丧失的方法，所述方法包含向所述受试者施用组合物以增加creb的活性，其中所述组合物包含所述creb或编码所述creb的多核苷酸。在一个实例中，所述组合物进一步包含载体，例如病毒载体。所述病毒载体可以包含aav。

16、在另一个实例中，所述creb是组成型活性的。在仍另一个实例中，所述creb包含vp-16creb。在又另一个实例中，所述组合物包含编码所述creb的多核苷酸。在另外的实例中，所述多核苷酸进一步包含视网膜神经节细胞启动子。在又另一个实例中，所述视网膜神经节细胞启动子包含γ-突触核蛋白启动子、或突触蛋白1启动子、或神经丝重启动子、或thy-1细胞表面抗原启动子。在仍另一个实例中，所述视网膜神经节细胞启动子包含γ-突触核蛋白启动子。在又另一个实例中，所述组合物包含所述creb。

17、在另一个实例中，所述组合物包含编码所述creb的多核苷酸。在另外的实例中，所述多核苷酸进一步包含视网膜神经节细胞启动子。在又另一个实例中，所述视网膜神经节细胞启动子包含γ-突触核蛋白启动子、或突触蛋白1启动子、或神经丝重启动子、或thy-1细胞表面抗原启动子。在仍另一个实例中，所述视网膜神经节细胞启动子包含γ-突触核蛋白启动子。在又另一个实例中，所述组合物包含所述creb。

18、在另一个例子中，所述施用选自眼内施用和全身施用。在又另一个实例中，所述受试者患有或具有患有以下中的一种或多种的风险：青光眼、糖尿病视网膜病变、视网膜缺血和视神经损伤。在仍另一个实例中，预防变性包含预防视网膜神经节细胞胞体和视网膜神经节调用轴突中的一种或两种的减少。在仍另一个实例中，治疗包含预防视力丧失。

19、在又另一方面，提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含多核苷酸和载体，其中所述多核苷酸包含视网膜神经节细胞启动子并编码creb。在又另一个实例中，所述视网膜神经节细胞启动子包含γ-突触核蛋白启动子、或突触蛋白1启动子、或神经丝重启动子、或thy-1细胞表面抗原启动子。在一个实例中，所述视网膜神经节细胞启动子包含γ-突触核蛋白启动子。在另一个实例中，所述载体包含病毒载体。在又另一个实例中，所述creb是组成型活性的。在仍另一个实例中，所述creb包含vp-16creb。