用于使用利用抗MUC16×CD3多特异性抗体和VEGF抑制剂的组合疗法治疗妇科癌症的方法与流程

本发明技术涉及用于使用抗muc16×cd3多特异性(例如，双特异性)免疫球蛋白相关组合物和vegf抑制剂治疗妇科癌症的方法，所述免疫球蛋白相关组合物与成熟muc16的c末端具114个氨基酸的残基(例如，muc16c114)和t细胞特异性结合。还提供了用于实践所述方法的试剂盒。政府支持声明本发明是在由美国国立卫生研究院(nih)授予的授权号ca190174下由政府支持进行的。政府享有本发明中的某些权利。

背景技术：

1、以下对本发明技术的背景的描述仅帮助理解本发明技术而提供，并且不承认描述或构成本发明技术的现有技术。

2、粘蛋白是细胞稳态和保护上皮表面的重要生物分子。如卵巢癌等癌症中的粘蛋白表达的变化可用作诊断、预后和治疗的生物标志物(singh ap等人,《柳叶刀肿瘤学(lancetoncol)》2008；9(11):1076-85)。muc16是在大多数卵巢癌细胞上过度表达的粘蛋白。由于muc16抗原在其它情况下仅在子宫、子宫内膜、输卵管、卵巢以及腹腔和胸腔的浆膜的正常组织中以低水平表达，因此muc16是基于免疫的疗法，包含妇科癌症的靶向和治疗的潜在有吸引力的靶点。

3、muc16是高度糖基化的粘蛋白，由在切割位点切割并释放的大细胞外结构域区(ca-125)、位于切割位点附近的保留胞外结构域区(muc16ecto)、跨膜结构域和具有潜在磷酸化位点的胞质尾组成(图1(a))。如本文所使用的，muc16c114是指成熟muc16的c末端具114个氨基酸的残基(例如，muc16c114)并且包括muc16ecto、跨膜结构域和胞质尾。释放的细胞外结构域(ca-125)含有156个氨基酸的16-20个串联重复序列，每个串联重复序列具有许多潜在的糖基化位点(o'brien tj等人,《肿瘤生物学(tumor biol)》22(6):348-66(2001))。因为muc16的细胞外结构域的显著部分被切割和分泌(即，ca-125)，所以muc16的该部分作为卵巢癌上的靶抗原的用途受到限制。许多报告的muc16单克隆抗体与存在于糖蛋白的大分泌ca-125部分上的表位结合，而不与保留的muc16胞外结构域结合(bellone s《美国妇产科杂志(am j obstet gynecol)》200(1):75el-10(2009),berek js.《生物治疗专家意见(expert opin biol ther.)》4(7):1159-65(2004)；o'brien tj等人,《国际生物标志物杂志(int j biol markers)》13(4):188-95(1998))。

4、因此，迫切需要有效靶向如卵巢癌等muc16(+)妇科癌症的治疗方法。

技术实现思路

1、一方面，本公开提供了一种用于治疗有需要的受试者的妇科癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的抗muc16×cd3多特异性(例如，双特异性)抗体或其抗原结合片段和有效量的vegf抑制剂，其中所述抗muc16×cd3多特异性(例如，双特异性)抗体或抗原结合片段包括第一抗原结合位点，所述第一抗原结合位点与包括muc16胞外结构域序列的muc16多肽特异性结合，其中所述muc16胞外结构域序列由seq id no:95组成。在一些实施例中，所述muc16多肽具有seq id no:3的氨基酸序列。所述抗muc16×cd3多特异性(例如，双特异性)抗原结合片段可以是fab、fab'、f(ab')2、fv或单链fv(scfv)。

2、另外地或可替代地，在本文所公开的方法的一些实施例中，所述第一抗原结合位点包括重链免疫球蛋白可变结构域(vh)和轻链免疫球蛋白可变结构域(vl)，其中(a)所述vh包括seq id no:4的vh-cdr1序列、seq id no:5的vh-cdr2序列和seq id no:6的vh-cdr3序列；并且所述vl包括seq id no:7的vl-cdr1序列、seq id no:8的vl-cdr2序列和seq id no:9的vl-cdr3序列；或者(b)所述vh包括seq id no:10的vh-cdr1序列、seq id no:11的vh-cdr2序列和seq id no:12的vh-cdr3序列；并且所述vl包括seq id no:13的vl-cdr1序列、seq id no:14的vl-cdr2序列和seq id no:15的vl-cdr3序列；或者(c)所述vh包括seq idno:16的vh-cdr1序列、seq id no:17的vh-cdr2序列和seq id no:18的vh-cdr3序列；并且所述vl包括seq id no:19的vl-cdr1序列、seq id no:20的vl-cdr2序列和seq id no:21的vl-cdr3序列；或者(d)所述vh包括seq id no:22的vh-cdr1序列、seq id no:23的vh-cdr2序列和seq id no:24的vh-cdr3序列；并且所述vl包括seq id no:25的vl-cdr1序列、seq id no:26的vl-cdr2序列和seq id no:27的vl-cdr3序列。

3、另外地或可替代地，在本文所公开的方法的某些实施例中，所述第一抗原结合位点包括：(a)重链免疫球蛋白可变结构域(vh)，所述vh包括seq id no:28或seq id no:29的vh-cdr1序列、vh-cdr2序列和vh-cdr3序列；以及轻链免疫球蛋白可变结构域(vl)，所述vl包括seq id no:30或seq id no:31的vl-cdr1序列、vl-cdr2序列和vl-cdr3序列；或者(b)重链免疫球蛋白可变结构域(vh)，所述vh包括seq id no:32或seq id no:33的vh-cdr1序列、vh-cdr2序列和vh-cdr3序列；以及轻链免疫球蛋白可变结构域(vl)，所述vl包括seq id no:34或seq id no:35的vl-cdr1序列、vl-cdr2序列和vl-cdr3序列；或者(c)重链免疫球蛋白可变结构域(vh)，所述vh包括seq id no:36的vh-cdr1序列、vh-cdr2序列和vh-cdr3序列；以及轻链免疫球蛋白可变结构域(vl)，所述vl包括seq id no:37的vl-cdr1序列、vl-cdr2序列和vl-cdr3序列；或者(d)重链免疫球蛋白可变结构域(vh)，所述vh包括seq id no:38的vh-cdr1序列、vh-cdr2序列和vh-cdr3序列；以及轻链免疫球蛋白可变结构域(vl)，所述vl包括seq idno:39的vl-cdr1序列、vl-cdr2序列和vl-cdr3序列。

4、在本文所公开的方法的任何前述实施例中，所述第一抗原结合位点包括：(a)重链免疫球蛋白可变结构域(vh)，所述vh包括seq id no:28或seq id no:29的氨基酸序列；以及轻链免疫球蛋白可变结构域(vl)，所述vl包括seq id no:30或seq id no:31的氨基酸序列；或者(b)重链免疫球蛋白可变结构域(vh)，所述vh包括seq id no:32或seq id no:33的氨基酸序列；以及轻链免疫球蛋白可变结构域(vl)，所述vl包括seq id no:34或seq id no:35的氨基酸序列；或者(c)重链免疫球蛋白可变结构域(vh)，所述vh包括seq id no:36的氨基酸序列；以及轻链免疫球蛋白可变结构域(vl)，所述vl包括seq id no:37的氨基酸序列；或者(d)重链免疫球蛋白可变结构域(vh)，所述vh包括seq id no:38的氨基酸序列；以及轻链免疫球蛋白可变结构域(vl)，所述vl包括seq id no:39的氨基酸序列。

5、另外地或可替代地，在本文所公开的方法的一些实施例中，所述抗muc16×cd3多特异性(例如，双特异性)抗体或抗原结合片段进一步包括选自由以下组成的组的同种型的fc结构域：igg1、igg2、igg3、igg4、iga1、iga2、igm、igd和ige。在本文所公开的方法的一些实施例中，所述抗muc16×cd3多特异性(例如，双特异性)抗体或抗原结合片段是人的或人源化的。另外地或可替代地，在本文所公开的方法的某些实施例中，所述抗muc16×cd3多特异性(例如，双特异性)抗体或抗原结合片段是串联scfv、双功能抗体(db)、单链双功能抗体(scdb)、双亲和力再靶向(dart)抗体、f(ab')2、双可变结构域(dvd)抗体、杵臼(kih)抗体、对接锁定(dnl)抗体、化学交联抗体、异源多聚体抗体、单克隆抗体、全长抗体或异源缀合物抗体。

6、在本文所公开的方法的任何和所有实施例中，所述抗muc16×cd3多特异性(例如，双特异性)抗体或抗原结合片段包括与t细胞特异性结合的第二抗原结合位点。在某些实施例，所述第二抗原结合位点包括：重链免疫球蛋白可变结构域(vh)，所述vh包括seq id no:70的氨基酸序列；以及轻链免疫球蛋白可变结构域(vl)，所述vl包括seq id no:71的氨基酸序列。另外地或可替代地，在一些实施例中，所述第二抗原结合位点包括seq id no:72的氨基酸序列。在其它实施例中，所述抗muc16×cd3多特异性(例如，双特异性)抗体或抗原结合片段包括seq id no:73-92中的任一者的氨基酸序列。

7、另外地或可替代地，在本文所公开的方法的一些实施例中，所述vegf抑制剂是小分子抑制剂、sirna、反义寡核苷酸、shrna、sgrna、核酶或抗体或其抗原结合片段。vegf抑制剂的实例包含单不限于贝伐单抗(bevacizumab)、兰尼单抗(ranibizumab)、凡努西单抗(vanucizumab)、布洛赛珠单抗(brolucizumab)、hpv19、ibi305、vegf trap、利尼法尼(linifanib)、aee-788、阿昔替尼(axitinib)(ag-13736)、ag-028262、血管抑制素(angiostatin)、康普瑞汀a4(combretastatin a4)、西地尼布(cediranib)、索拉非尼(sorafenib)、沙利度胺(thalidomide)、瓦他拉尼(vatalanib)、dc-101、sns-032、苹果酸舒尼替尼(sunitinib malate)、司马沙尼(semaxanib)、cep-7055、多韦替尼(dovitinib)、cp-547632、cp-564959、乐伐替尼(lenvatinib)、帕唑帕尼(pazopanib)、gw-654652、替伏扎尼(tivozanib)、苯甲酰星形孢菌素(benzoylstaurosporine)、奥兰替尼(orantinib)、特西伐替尼(tesevatinib)、xl-999、福林替尼(foretinib)、凡德他尼(vandetanib)和zk-304709。在一些实施例中，所述妇科癌症是卵巢癌、输卵管癌、子宫癌或子宫内膜癌。

8、另外地或可替代地，在一些实施例中，在施用vegf抑制剂和抗muc16×cd3多特异性(例如，双特异性)抗体或抗原结合片段之后，受试者表现出肿瘤生长减少、肿瘤增殖减少、肿瘤负荷降低或存活率增加。另外地或可替代地，在本文所公开的组合疗法方法的一些实施例中，相对于用vegf抑制剂单一疗法或用抗muc16×cd3多特异性(例如，双特异性)抗体或抗原结合片段的单一疗法观察到的，应答时间和/或应答持续时间得到改善。

9、在本文所公开的方法的任何和所有实施例中，所述vegf抑制剂和所述抗muc16×cd3多特异性(例如，双特异性)抗体或抗原结合片段是单独、依序或同时施用的。抗muc16×cd3多特异性(例如，双特异性)抗体或抗原结合片段和/或vegf抑制剂可以口服、鼻内、肠胃外、静脉内、肌内、腹膜内、肌内、动脉内、皮下、鞘内、囊内、眶内、肿瘤内、皮内、经气管、脑室内、局部或通过植入的储库施用。