胞二磷胆碱在调控呼吸链功能相关蛋白水平、制备防治呼吸链功能障碍的药物方面的用途

本发明涉及医药领域，尤其是涉及胞二磷胆碱在调控呼吸链功能相关蛋白水平、制备防治呼吸链功能障碍的药物方面的用途。

背景技术：

1、呼吸链(respiratory chain)是由一系列的递氢反应(hydrogen transferreactions)和递电子反应(electrontransfer reactions)按一定的顺序排列所组成的连续反应体系，它将代谢物脱下的成对氢原子交给氧生成水，同时有atp生成。

2、ndufa8、uqcrc2、coxiv是已知的呼吸链功能相关蛋白。

3、磷脂酰胆碱(1,2-diacyl-sn-glycero-3-phosphocholine,pc)是一种两性分子，由亲水的头部和疏水的尾部组成，是磷脂的一种，在头部插有一个胆碱基团。磷脂酰胆碱是生物膜的重要组成部分。

4、磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine,pe)，又称为脑磷脂，是构成生物膜的重要磷脂之一，主要存在于脑、神经、微生物和大豆中，在信号传导和维持生命功能等方面发挥重要作用。

5、pc和pe在呼吸链功能中也起重要作用。呼吸链功能障碍在分子水平主要表现为机体pc、pe、atp的含量降低。呼吸链功能障碍可能引发多种疾病。

6、因此，本领域需要开发防治呼吸链功能障碍的新药。

7、胞二磷胆碱(citicoline)，是一种核苷衍生物，目前已报道的胞二磷胆碱的治疗用途有：可改善头部外伤后或脑手术后意识障碍的意识状态及脑电图，促进脑卒中偏瘫病人的上肢运动功能的恢复，对促进大脑功能恢复、促进苏醒有一定作用。

8、但本领域目前尚未报道过胞二磷胆碱在调控呼吸链功能相关蛋白水平、防治呼吸链功能障碍方面的应用。

技术实现思路

1、基于本领域的上述需求和空白，本发明提供胞二磷胆碱在调控蛋白水平、制备防治呼吸链功能障碍的药物方面的用途。

2、本发明的技术方案如下：

3、胞二磷胆碱在调控呼吸链功能相关蛋白水平方面的用途。

4、所述呼吸链功能相关蛋白选自由ndufa8、uqcrc2、coxiv组成的组；

5、所述调控指：提高呼吸链功能障碍动物模型体内的ndufa8和/或uqcrc2和/或coxiv的水平；

6、优选地，所述呼吸链功能障碍动物模型通过在动物体内过表达shrna制得；所述shrna的反向互补序列如seq id no.2；

7、优选地，与所述shrna对应的dna序列如seq id no.1所示；

8、优选地，shrna通过下调动物的ndufa8和/或uqcrc2和/或coxiv的水平使动物产生呼吸链功能障碍；

9、优选地，所述呼吸链功能障碍指动物体内pc和/或pe和/或atp含量降低；

10、优选地，所述动物选自：鼠、兔、猴。

11、胞二磷胆碱在制备防治呼吸链功能障碍的药物方面的用途。

12、所述药物包括：药效活性成分；所述药效活性成分包括：胞二磷胆碱；

13、优选地，所述药物还包括：药学上可接受的辅料；

14、优选地，所述防治指：胞二磷胆碱缓解和/或改善呼吸链功能障碍的症状；

15、优选地，所述症状选自：pc和/或pe和/或atp含量降低，和/或，ndufa8和/或uqcrc2和/或coxiv的水平下降。

16、一种可致呼吸链功能障碍的shrna，其反向互补序列如seq id no.2所示。

17、与所述shrna对应的dna序列如seq id no.1所示；

18、优选地，可致呼吸链功能障碍指：在动物体内过表达shrna下调ndufa8和/或uqcrc2和/或coxiv蛋白水平使动物产生呼吸链功能障碍；

19、优选地，所述呼吸链功能障碍指：动物体内pc和/或pe和/或atp含量降低。

20、shrna在制备呼吸链功能障碍动物模型方面的用途，shrna的反向互补序列如seqid no.2。

21、所述shrna对应的dna序列如seq id no.1所示；

22、优选地，shrna通过下调动物的ndufa8和/或uqcrc2和/或coxiv的水平使动物产生呼吸链功能障碍；

23、优选地，所述呼吸链功能障碍指动物体内pc和/或pe和/或atp含量降低；

24、优选地，所述动物选自：鼠、兔、猴。

25、一种呼吸链功能障碍动物模型的制备方法，采用反向互补序列如seq id no.2所示的shrna下调动物的ndufa8和/或uqcrc2和/或coxiv的水平。

26、所述呼吸链功能障碍指动物体内pc和/或pe和/或atp含量降低；

27、优选地，将如seq id no.1所示的shrna对应的dna序列连接表达载体得到重组表达载体；

28、优选地，将重组表达载体转化至宿主中得到转化体；

29、优选地，将转化体转入动物中；

30、优选地，所述表达载体选自paav-tnt载体；

31、优选地，所述宿主选自病毒或细胞；

32、优选地，所述病毒选自腺病毒；

33、优选地，所述细胞选自dh5α感受态细胞或293t细胞；

34、优选地，所述动物选自：鼠、兔、猴。

35、本发明一方面提供胞二磷胆碱在调控蛋白水平方面的用途。

36、本发明另一方面提供胞二磷胆碱在制备防治呼吸链功能障碍的药物方面的用途。

37、在一些国家或地区的专利法允许的情形下，本发明还请求保护胞二磷胆碱在防治呼吸链功能障碍方面的用途。

38、可选地，所述呼吸链功能障碍为ndufa8、uqcrc2和coxiv表达下降导致的呼吸链功能障碍。

39、可选地，所述药物为改善呼吸链功能障碍的药物。

40、改善代谢可体现为磷脂酰胆碱(pc)和磷脂酰乙醇氨(pe)含量的增加。

41、改善呼吸链功能可体现为atp含量的增加。

42、可选地，所述药物为胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂或口服液。

43、可选地，所述药物还包括药学上可接受的辅料或添加剂。

44、上述药物能够显著增加ndufa8蛋白,uqcrc2蛋白和coxiv蛋白的表达。

45、本发明还提供了一种治疗和/或预防和/或缓解和/或改善呼吸链功能障碍的方法，包括给受体动物施用胞二磷胆碱，进行治疗和/或预防和/或缓解和/或改善呼吸链功能障碍。

46、可选地，所述呼吸链功能障碍为ndufa8、uqcrc2和coxiv表达下降导致的呼吸链功能障碍。

47、上述ndufa8、uqcrc2和coxiv表达下降导致的呼吸链功能障碍动物模型可为shrna干预小鼠，所述shrna干预小鼠ndufa8、uqcrc2和coxiv蛋白水平显著下降。例如，通过尾静脉注射将携带shrna的重组腺相关病毒(raav)载体导入小鼠体内。

48、所述shrna是指通过rna干扰技术降低mrna的含量或翻译使蛋白质水平减少的发夹结构核酸。

49、可选地，所述shrna干预小鼠包括采用携带shrna的raav载体降低所述受体小鼠的ndufa8、uqcrc2和coxiv蛋白表达。

50、本发明首次提出将胞二磷胆碱应用于呼吸链功能障碍的治疗，能够改善呼吸链功能障碍。该呼吸链功能障碍由反向互补序列如seq id no.2所示的shrna下调动物的ndufa8和/或uqcrc2和/或coxiv的水平所致，具体表现为动物体内的pc、pe、atp含量降低。经过实验发现，胞二磷胆碱给药治疗后，呼吸链功能障碍动物体内的pc、pe、atp含量得到提升，同时使下降的ndufa8、uqcrc2和coxiv蛋白水平得以恢复。说明胞二磷胆碱可以逆转呼吸链功能障碍的分子水平症状，可做为治疗呼吸链功能障碍的药物。