大麦苗外泌体在制备具有抗衰老修护作用的产品中的应用

本发明涉及生物，尤其是涉及大麦苗外泌体在制备具有抗衰老修护作用的产品中的应用。

背景技术：

1、外泌体(exosome)是由细胞分泌的一种细胞外囊泡(extracellular vesicles)。植物外泌体的直径约为40～150nm，与动物外泌体形态结构相类似，具有磷脂双分子层结构，呈茶托状或杯状，内部含有植物各种化学成分和大量脂质、微小rna(mirna)、dna和蛋白质等。外泌体所含活性物质(特别是mirna)及其传递是维持细胞间通讯的关键环节。大量的研究已经证明，植物外泌体可实现植物到动物跨物种的物质和信息传递。

2、皮肤衰老是一个复杂的生理过程，其中，过氧化损伤是导致皮肤自然老化和光老化的重要原因之一。皮肤真皮中最重要的细胞成分是成纤维细胞，其数量减少、形态改变、分泌合成功能减弱或衰退与皮肤老化密切相关。研究证实，过氧化对皮肤成纤维细胞功能的损伤可导致其细胞周期变化、凋亡以及胶原代谢功能异常，使皮肤干燥粗糙、皱纹加深、弹性减弱、松弛等。提供一种能够有效减少氧化损伤、促进皮肤修护的药物非常重要。

技术实现思路

1、本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出大麦苗外泌体在制备具有抗衰老修护作用的产品中的应用，大麦苗外泌体能够有效提高细胞的抗氧化能力，减少细胞氧化损伤，促进细胞增殖，提高皮肤成纤维细胞分泌胶原蛋白的能力。

2、本发明还提供一种抗衰老修护组合物。

3、本发明还提供上述抗衰老修护组合物的应用。

4、本发明还提供包括上述抗衰老修护组合物的产品。

5、根据本发明的第一方面实施例的大麦苗外泌体在制备具有抗衰老修护作用的产品中的应用。

6、根据本发明实施例的抗衰老修护组合物，至少具有如下有益效果：

7、本发明发现大麦苗外泌体能够提高细胞在氧化应激下的存活率，促进细胞增殖，提高细胞的抗氧化能力，降低mda水平、升高sod水平；并且还能够提高细胞的胶原合成能力，促进i型胶原蛋白和iii型胶原蛋白的分泌。且大麦苗外泌体不存在有效剂量高，难以保证安全性，易受到血脑屏障阻碍的问题。大麦苗外泌体中的有效成分为天然可溶形式，解决了很多有效成分不溶于水，生理利用度低的问题；并且大麦苗外泌体具有极强稳定性，除含有有效化学成分外，还含有多种活性成分，具有天然复合效应；直径小于150nm，对各种生理屏障(如血脑屏障、皮肤屏障)具有较好的穿透性。

8、根据本发明的一些实施例，所述产品为化妆品、药物或试剂盒。

9、根据本发明的一些实施例，所述产品还包括化妆品学上、药物学、化学上或生物学上可接受的载体。

10、根据本发明的第二方面实施例的一种抗衰老修护组合物，包括大麦苗外泌体和脂肪间充质干细胞外泌体。

11、根据本发明实施例的抗衰老修护组合物，至少具有如下有益效果：

12、实施例的抗衰老修护组合物能够促进细胞增殖，减少细胞氧化损伤，提高细胞的抗氧化能力和胶原蛋白分泌能力。

13、通过利用大麦苗外泌体和脂肪间充质干细胞外泌体之间的协同作用，还能够有效避免因干细胞来源(尤其是人活体组织的干细胞来源)不足而导致脂肪间充质干细胞外泌体获得率低的问题，从而有效减少脂肪间充质干细胞外泌体的使用量，并获得更好的效果。

14、根据本发明的一些实施例，按质量份数计，所述组合物包括0.5～7份大麦苗外泌体和0.5～7份脂肪间充质干细胞外泌体。例如，可以包括0.5、1、2、3、4、5、6或7份大麦苗外泌体，以及0.5、1、2、3、4、5、6或7份脂肪间充质干细胞外泌体。

15、根据本发明的一些实施例，所述抗衰老修护组合物的作用包括提高细胞抗氧化能力和促进细胞胶原蛋白分泌生成中的至少一种。

16、根据本发明的一些实施例，促进细胞胶原蛋白分泌生成包括促进i型胶原蛋白和/或iii型胶原蛋白分泌生成。

17、根据本发明的一些实施例，提高细胞抗氧化能力包括降低mda水平、升高sod水平中的至少一种。

18、根据本发明的一些实施例，所述脂肪间充质干细胞外泌体包括人脂肪间充质干细胞外泌体。

19、根据本发明的一些实施例，所述抗衰老修护组合物可提高细胞抗氧化能力，所述抗衰老修护组合物包括1份大麦苗外泌体与1份脂肪间充质干细胞外泌体；或1份大麦苗外泌体与5份脂肪间充质干细胞外泌体。优选地，所述抗衰老修护组合物的有效作用浓度为1μg/ml大麦苗外泌体与1μg/ml脂肪间充质干细胞外泌体；或1μg/ml大麦苗外泌体和5μg/ml脂肪间充质干细胞外泌体。

20、根据本发明的一些实施例，所述抗衰老修护组合物可提高细胞的胶原蛋白分泌能力，所述抗衰老修护组合物包括1份大麦苗外泌体与5份脂肪间充质干细胞外泌体；或5份大麦苗外泌体与5份脂肪间充质干细胞外泌体。优选地，所述抗衰老修护组合物的有效作用浓度为1μg/ml大麦苗外泌体和5μg/ml脂肪间充质干细胞外泌体；或5μg/ml大麦苗外泌体和5μg/ml脂肪间充质干细胞外泌体。

21、根据本发明的一些实施例，所述大麦苗外泌体的制备方法包括以下步骤：将大麦苗榨汁后，从上清中收集外泌体。

22、根据本发明的一些实施例，所述大麦苗榨汁时还需要加入缓冲液。所述缓冲液为与生理环境等渗的缓冲液。所述缓冲液包括生理盐水、磷酸盐缓冲液、hank’s缓冲液中的至少一种。

23、根据本发明的一些实施例，所述脂肪间充质干细胞外泌体的制备方法包括以下步骤：培养所述脂肪间充质干细胞，从培养得到的所述脂肪间充质干细胞或其培养液上清中收集外泌体。

24、根据本发明的一些实施例，收集外泌体的方法包括密度梯度离心法、尺寸排阻色谱法、差速离心法、聚乙二醇沉淀法、免疫分离法、筛选分离法中的至少一种。

25、根据本发明的一些实施例，收集外泌体的方法包括差速离心法。所述差速离心法包括以下步骤：在0～4℃，200～400g离心5～20min，收集第一上清液；在0～4℃，1500～2500g离心10～30min，收集第二上清液；在0～4℃，10000～14000g离心25～45min，收集第三上清液；在0～4℃，10000～14000g离心25～45min，收集第四上清液；在0～4℃，130000～170000g离心70～90min，弃上清液，获得外泌体。

26、根据本发明的第三方面实施例的上述抗衰老修护组合物在制备具有抗衰老修护作用的产品中的应用。由于采用了上述实施例的抗衰老修护组合物的全部技术方案，因此至少具有上述实施例的技术方案所带来的所有有益效果。

27、根据本发明的一些实施例，所述抗衰老修护作用包括提高细胞抗氧化能力和促进细胞胶原蛋白分泌生成中的至少一种。

28、根据本发明的一些实施例，促进细胞胶原蛋白分泌生成包括促进i型胶原蛋白和/或iii型胶原蛋白分泌生成。

29、根据本发明的一些实施例，提高细胞抗氧化能力包括降低mda水平、升高sod水平中的至少一种。

30、根据本发明的第四方面实施例的一种具有抗衰老修护作用的产品，包括如上述第二方面实施例所述的抗衰老修护组合。由于产品采用了上述实施例的抗衰老修护组合的全部技术方案，因此至少具有上述实施例的技术方案所带来的所有有益效果。

31、根据本发明的一些实施例，所述产品为化妆品、药物或试剂盒。

32、根据本发明的一些实施例，所述产品还包括化妆品学上、药物学、化学上或生物学上可接受的载体。

33、根据本发明的一些实施例，所述的产品的剂型包括凝胶剂、乳剂、溶液、啫喱、气雾剂、粉末剂、颗粒剂、胶囊剂、悬浮液中的至少一种。

34、根据本发明的一些实施例，所述抗衰老修护组合物占所述产品总重量的1～99％。

35、本发明的其它特征和优点将在随后的说明书中阐述，并且，部分地从说明书中变得显而易见，或者通过实施本发明而了解。