EZH2抑制剂在提高维甲酸受体γ的表达水平中的应用

本发明属于生物医药，涉及ezh2抑制剂在提高维甲酸受体γ的表达水平中的应用。

背景技术：

1、原发性肝癌是世界范围内常见的恶性肿瘤之一，对于中晚期失去手术机会的肝癌患者，药物治疗仍是治疗的重要手段。然而，由于肝癌的高度异质性，使得肝癌病人对用药方案的敏感性差异较大。

2、全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid，atra)是维生素a的天然代谢产物，atra有着广泛的生理学和药理学活性，atra作为第一代可用于口服的维甲酸类物质，对携带染色体易位rar/pml重排导致的早幼粒细胞白血病有较强的诱导分化作用，使之形成成熟的粒细胞，是治疗急性早幼粒细胞白血病的临床首选药物，初治的单药完全缓解率可达90％。其机制是通过与作为核受体的维甲酸受体结合从而激活维甲酸受体的转录因子活性并激活下游靶基因的表达水平。维甲酸受体包括两类类固醇受体家族即rars和rxrs，其中，rars和rxrs又分别包括3种亚型：rarα、rarβ和rarγ；rxrα、rxrβ和rxrγ。然而atra治疗其他白血病和实体瘤的临床效用的证据有限，一个主要原因是实体瘤的遗传和病理机制不像早幼粒细胞白血病那么清晰，实体瘤单药应用的效果并不理想。但是，atra因其对细胞增殖、分化和凋亡的作用及其低毒性等优势是药物联合疗法的理想药物。例如：atra与紫杉醇、激酶抑制剂、天然化合物、类视黄醇、er或者her2抑制剂、化疗药物、蛋白酶体抑制剂和维甲酸纳米制剂的组合在抗癌活性中表现出协同作用。

3、组蛋白甲基化等表观遗传修饰在药理上是可逆的。ezh2是prc2复合物的催化亚基，他通过其c端set结构域催化组蛋白h3k27me3以促进染色质压缩并沉默其靶基因，ezh2的过度表达和突变被证实与肿瘤进展高度相关，被普遍认为是增殖标志物和真正的致癌基因。目前有5个ezh2的抑制剂包括tazemetostat(tazverik，美国)；gsk-126(葛兰素史克，英国)；cpi-1205(星座，美国)；shr2554(中国恒瑞医药有限公司)；和pf-06821497(pfizer，美国)已进入临床试验。ezh2抑制剂与其他疗法的组合显示出更强大的互补或者协同抗肿瘤作用，如cn111420059a公开了一种克服肝癌和肾癌肿瘤耐药性的药物组合及其应用，将乙酰化酶抑制剂anacardic acid(aa)与ezh2抑制剂gsk-126联合使用，这一药物组合从降低ezh2自身稳定性和抑制ezh2活性的两个方面来联合增强ezh2抑制剂的肿瘤敏感度，效果显著。

4、然而，目前在临床给药治疗(如治疗肝癌)的过程中，仍有部分患者对atra参与的联合用药或者ezh2抑制剂参与的联合用药方案并不敏感，治疗效果较差，综上所述，研究影响肿瘤对atra敏感性的关键分子机制对于肿瘤的个体化治疗至关重要。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足和实际需求，本发明提ezh2抑制剂在提高维甲酸受体γ的表达水平中的应用，研究影响肿瘤对全反式维甲酸敏感性的关键分子机制，为开发有效的新型药物联用策略提供基础。

2、为达上述目的，本发明采用以下技术方案：

3、第一方面，本发明提供ezh2抑制剂在提高维甲酸受体γ的表达水平中的应用。

4、本发明中，在临床工作的基础上选取了10例全反式维甲酸(atra)联合folfox4化疗方案的肝癌合并pvtt患者(5例为使用联合化疗方案效果较好的患者，5例为疗效较差的患者)的肝癌组织进行转录组学分析，发现少数肝癌患者对atra产生耐药的主要原因是rarγ受体的低表达，即atra抗癌作用的发挥受制于rarg(rarγ受体的编码基因)的表达，chip-seq分析发现：rarg启动子上游富集h3k27me3，ezh2抑制剂能够减少rarg启动子区域h3k27me3的富集程度并激活rarg的表达，提高rarγ受体的表达水平，从而提高肿瘤细胞对atra的敏感性。

5、优选地，所述ezh2抑制剂包括gsk-126、tazemetostat、cpi-1205、shr2554或pf-06821497中任意一种或至少两种的组合。

6、第二方面，本发明提供一种以非疾病诊断和/或治疗为目的的提高维甲酸受体γ的表达水平的方法，所述方法包括：

7、对目标对象施用ezh2抑制剂，提高其维甲酸受体γ的表达水平。

8、本发明中，可利用ezh2抑制剂作为促进剂，提高其维甲酸受体γ的表达水平，应用于维甲酸受体γ相关行为的基础研究中，如构维甲酸受体γ高表达模型等。

9、优选地，所述目标对象包括体外细胞、体外器官或实验动物等。

10、可以理解，所述实验动物指本领域用于药物实验的动物，包括大鼠、小鼠或兔等等。

11、优选地，所述ezh2抑制剂包括gsk-126、tazemetostat、cpi-1205、shr2554或pf-06821497中任意一种或至少两种的组合。

12、第三方面，本发明提供ezh2抑制剂在制备提高维甲酸受体γ的表达水平的制剂中的应用。

13、优选地，所述制剂还包括辅料。

14、优选地，所述辅料包括药学上可接受的载体、润湿剂、崩解剂、乳化剂、增溶剂、渗透压调节剂、表面活性剂、包衣材料、着色剂、ph调节剂、抗氧化剂、抑菌剂或缓冲剂中的任意一种或至少两种的组合。

15、第四方面，本发明提供以非治疗为目的的ezh2抑制剂在制备提高维甲酸受体γ的表达水平的制剂中的应用。

16、本发明中，发现ezh2抑制剂能够减少rarg启动子区域h3k27me3的富集程度并激活rarg的表达，提高rarγ受体的表达水平，可作为rarγ受体表达促进剂，应用于维甲酸受体γ相关行为的基础研究中。

17、第五方面，本发明提供一种药物组合物，所述药物组合物包括ezh2抑制剂和全反式维甲酸。

18、本发明发现rarγ是介导atra发挥抑癌作用的主要受体，且ezh2抑制剂能够通过减少h3k27me3的修饰促进rarγ的表达，进一步开发ezh2抑制剂联合atra使用策略，发现ezh2抑制剂联合atra具有协同抑制肿瘤增殖的作用，能够促进肿瘤细胞凋亡并且阻滞细胞在g1期，且能够抑制肿瘤细胞迁移，对于肿瘤治疗领域具有重要意义。

19、可以理解，所述药物组合物中ezh2抑制剂和全反式维甲酸可以以独立的形式存在，使用时同时施用给目标对象即可。

20、优选地，所述药物组合物中ezh2抑制剂的施用浓度为5μm～10μm，包括但不限于6μm、7μm、8μm或9μm全反式维甲酸的施用浓度为20μm～50μm，包括但不限于21μm、22μm、23μm、24μm、25μm、26μm、27μm、28μm、29μm、35μm、40μm、45μm、46μm、47μm、48μm或49μm。

21、优选地，所述所述ezh2抑制剂包括gsk-126、tazemetostat、cpi-1205、shr2554或pf-06821497中任意一种或至少两种的组合。

22、第六方面，本发明提供第五方面所述的药物组合物在制备治疗肿瘤药物中的应用。

23、优选地，所述肿瘤包括肝癌。

24、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

25、本发明创造性发现rarγ是介导atra发挥抑癌作用的主要受体，且ezh2抑制剂能够通过减少h3k27me3的修饰促进rarγ的表达，进一步开发ezh2抑制剂联合atra使用策略，发现ezh2抑制剂联合atra具有协同抑制肿瘤增殖的作用，提高了肿瘤对atra的敏感性，能够促进肿瘤细胞凋亡并且阻滞细胞在g1期，且能够抑制肿瘤细胞迁移，为两药协同抗肿瘤效应提供了实验基础和理论基础，对于肿瘤治疗领域具有重要意义。