过表达PLUNC试剂和/或NLRP3抑制剂在制备治疗鼻咽癌肺转移制剂中的应用

本发明属于鼻咽癌肺转移治疗，具体涉及过表达plunc试剂和/或nlrp3抑制剂在制备治疗鼻咽癌肺转移制剂中的应用。

背景技术：

1、鼻咽癌起源于鼻咽上皮，是一种常见的头颈部恶性肿瘤。鼻咽癌具有非常独特的地理分布，通常认为，饮食习惯、生活方式和暴露于有害环境因素的差异可能是鼻咽癌发病率在地理上差异的根本原因。鼻咽癌被认为是由ebv感染、遗传和环境因素之间的相互作用引起，其中，ebv感染被认为是鼻咽癌最常见的致病因素。

2、鼻咽癌初诊时约有70％左右存在头痛症状，且多为偏头痛、颈项部疼痛或颅顶枕后疼痛，早期头痛症状多为间歇性发作，随着病情发展可能发展为持续性头痛发作。涕血、耳鸣、听力下降以及淋巴结肿大等在鼻咽癌早期时有发生。但是早期鼻咽癌起病隐匿，被发现时通常处于鼻咽癌中晚期。晚期鼻咽癌临床表现为肿瘤转移至颈淋巴结导致颈部淋巴结肿大，肿瘤侵犯眼眶或眼球相关的神经导致视力障碍、视野缺损、复视、眼球突出及活动受限，转移到肺会引起呼吸系统症状，如咳嗽、呼吸困难等。

3、世界卫生组织(who)将鼻咽癌分为三种组织学亚型，角化鳞状细胞癌，非角化癌和基底样鳞状细胞癌。其中，非角化癌占我国鼻咽癌的绝大多数，可进一步细分为分化和未分化非角化癌。明确的病理分类对于准确分期和评估最佳治疗方案至关重要，同时，疾病的阶段是影响结果和生存的关键预后因素，因此，需要高效准确的实验室诊断方法来对鼻咽癌患者进行早期筛查，尽早发现隐匿患者，并及时进行干预，从而改善患者的预后。磁共振成像是确定局部肿瘤分期的最准确方法，它对描述小黏膜增厚、咽旁和咀嚼间隙受累以及颅底和颅神经浸润敏感，检测淋巴结受累的准确性高。正电子发射断层扫描(pet)-ct具有较高的鼻咽癌识别准确性和敏感性，可为原发部位不明的颈部淋巴结转移的诊断和治疗提供重要线索，特别是隐匿性鼻咽癌的活检。并且pet-ct进一步提高了淋巴结分期的准确性，是检测远处转移的最佳影像学方法。临床上，鼻咽癌患者放化疗后复发是不可避免的，这也是癌症治疗预后不良的主要原因之一。因此，全面了解促进鼻咽癌进展和转移的分子机制可能有助于开发更有效的治疗策略。

4、鼻咽癌是一种对放射线和化学高度敏感的肿瘤，放疗或放化疗联合治疗是早期和局部晚期鼻咽癌患者的主要治疗方法。尽管放化疗联合治疗产生了令人满意的生存率，但对于复发性和转移性鼻咽癌，单独放化疗的临床效果不尽人意，局部复发和远处转移成为治愈鼻咽癌患者的一大障碍。尤其是当鼻咽癌患者出现肺转移进展时，仍然是鼻咽癌患者治疗失败的主要原因。此外，鼻咽癌生长和转移的分子机制在很大程度上仍然未知。因此，需要有效的治疗策略来治疗鼻咽癌患者。

5、本发明针对鼻咽癌肺转移的治疗难点，发现plunc可以抑制鼻咽癌细胞emt、迁移和侵袭能力，研究进一步发现，plunc通过抑制nlrp3炎性小体活化抑制鼻咽癌肺转移，过表达plunc联合nlrp3炎性小体活化抑制剂mcc950共同作用鼻咽癌可以有效抑制鼻咽癌肺转移，这为发生肺转移的鼻咽癌患者提供了潜在的治疗策略。

6、鉴于此，特提出本发明。

技术实现思路

1、本发明的首要目的在于提供过表达plunc试剂、敲除nlrp3试剂、抑制nlrp3表达的试剂、nlrp3炎性小体抑制剂中的至少一种在制备治疗鼻咽癌和/或鼻咽癌肺转移制剂中的应用。该应用为鼻咽癌患者提供新的治疗方法。

2、进一步优选，过表达plunc试剂联合lrp3炎性小体抑制剂制备治疗鼻咽癌和/或鼻咽癌肺转移制剂。

3、本发明实验过程中发现，过表达plunc抑制鼻咽癌肺转移，干扰plunc促进鼻咽癌肺转移。

4、同时，还发现nlrp3基因可以作为治疗鼻咽癌的潜在靶点。通过特异性敲除nlrp3基因来抑制鼻咽癌进展，或者通过特异性敲低nlrp3抑制鼻咽癌细胞emt、克隆形成能力、迁移和侵袭能力，显著抑制鼻咽癌细胞肺转移。

5、通过过表达plunc联合敲除nlrp3来抑制鼻咽癌进展。

6、本发明经实验验证，过表达plunc联合nlrp3炎性小体抑制剂作用过程中，其以nlrp3炎性小体活化为靶点。机制研究发现，plunc通过促进nlrp3的泛素化来加速nlrp3的蛋白降解，从而抑制nlrp3炎性小体活化，进而抑制nlrp3炎性小体活化诱导的鼻咽癌细胞肺转移。

7、更进一步地，所述nlrp3炎性小体抑制剂为mcc950。

8、在本发明的实施过程中，选用的nlrp3炎性小体活化的抑制剂是mcc950。

9、但需要说明的是，本发明的nlrp3炎性小体抑制剂并不局限于mcc950，使用其他的nlrp3炎性小体抑制剂来靶向治疗鼻咽癌，其也是本发明的保护范围。

10、本发明首次发现，nlrp3炎性小体活化促进鼻咽癌肺转移，过表达plunc抑制nlrp3炎性小体活化诱导的鼻咽癌肺转移，与此同时，过表达plunc与nlrp3炎性小体活化抑制剂mcc950联用能最大程度抑制鼻咽癌肺转移，延缓肿瘤进展。plunc联合nlrp3炎性小体抑制剂治疗为鼻咽癌患者带来福音。

11、所述的抑制nlrp3表达的试剂包括：如下干扰序列中任一种：

12、nlrp3-rnai(62041-1)：ccgtaagaagtacagaaagta

13、nlrp3-rnai(62042-1)：gccttcttggtaggagtggaa

14、nlrp3-rnai(62043-1)：taccaagacaggtttgactat。

15、分别见seq id.no.1-3所示。

16、本发明的第二个目的是提供一种治疗鼻咽癌药物，包括过表达plunc试剂、敲除nlrp3试剂、抑制nlrp3表达的试剂、nlrp3炎性小体抑制剂中的至少一种。

17、进一步优选，包括过表达plunc试剂和nlrp3炎性小体抑制剂。

18、更进一步地，所述nlrp3炎性小体抑制剂为mcc950。

19、所述的抑制nlrp3表达的试剂包括：如下干扰序列中任一种：

20、nlrp3-rnai(62041-1)：ccgtaagaagtacagaaagta

21、nlrp3-rnai(62042-1)：gccttcttggtaggagtggaa

22、nlrp3-rnai(62043-1)：taccaagacaggtttgactat。

23、本发明的第三个目的是提供检测plunc和/或nlrp3表达的试剂在制备鼻咽癌和/或鼻咽癌肺转移诊断制剂中的应用。

24、本发明具有以下有益效果：

25、本发明证实了plunc(ncbi gene id:51297)和nlrp3(ncbi gene id:114548)均是治疗鼻咽癌或者鼻咽癌肺转移的靶点，可以通过过表达plunc联合敲除nlrp3来抑制鼻咽癌进展。过表达plunc联合nlrp3炎性小体抑制剂作用过程中，其以nlrp3炎性小体活化为靶点。证实了过表达plunc联合nlrp3炎性小体抑制剂在鼻咽癌中的治疗作用，即plunc可抑制鼻咽癌细胞肺转移，nlrp3炎性小体活化促进鼻咽癌细胞肺转移，nlrp3炎性小体活化抑制剂抑制鼻咽癌细胞肺转移，过表达plunc联合nlrp3炎性小体抑制剂能最大程度地抑制鼻咽癌细胞肺转移。plunc联合nlrp3炎性小体抑制剂治疗鼻咽癌肺转移为鼻咽癌患者提供一个治疗新思路。