脂质体包覆纳米Bi2S3和Gen的制备方法及应用

本发明涉及抑制脂质体包覆纳米bi2s3和gen的制备方法，并将其应用于抑制细菌上。

背景技术：

1、脂质体是一种人工膜，可用于转基因，或制备的药物，利用脂质体可以和细胞膜融合的特点，将药物送入细胞内部。生物学定义为，当两性分子如磷脂和鞘脂分散于水相时，分子的疏水尾部倾向于聚集在一起，避开水相，而亲水头部暴露在水相，形成具有双分子层结构的的封闭囊泡，称为脂质体。脂质体有很多特点，具有定向性和延缓作用，有助于降低药物毒性，提高稳定性。

2、脂质体包裹技术在药品的应用，大大提升了产品的功效性和安全性。目前，在进行药品脂质体包裹时，一般是将空白脂质体和药物分别溶解于分散介质中，然后抽入一个注射器内，将另一个空注射器与其相通，使脂质体-药物进行往复运动来振动两注射器，至脂质体与药物混合均匀，或者，采用两注射器分别抽取空白脂质体和待包裹药物，在两注射器相通后，进行往复运动来振动两注射器，至脂质体与药物混合均匀。这一操作方式操作繁琐，费时费力，难以保障脂质体与药物混合的充分和均匀。

技术实现思路

1、针对上述技术问题，本发明采用超声波分散法、薄膜分散法、冷冻干燥法，制备出了脂质体(lip)、及不同浓度的脂质体包覆纳米硫化铋及硫酸庆大霉素(lip-gen-bi2s3)；具体制备方法如下：

2、(1)将二棕榈酰磷脂酰胆碱、胆固醇、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺聚乙二醇-2000dspe-peg2000加入三氯甲烷后搅拌均匀；

3、(2)将步骤(1)得到的混合液经旋转蒸发成膜后，避光保存，再加入蔗糖、水进行超声溶解；

4、(3)将步骤(2)得到的混合溶液加入bi2s3、硫酸庆大霉素后，经破碎后再冷冻干燥得到脂质体包覆的纳米bi2s3和gen。

5、所述的步骤(1)中二棕榈酰磷脂酰胆碱、胆固醇、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺聚乙二醇-2000的摩尔比为2:0.5-1:3-5，优选为2：1：3。

6、所述的步骤(2)中蔗糖的加入量与二棕榈酰磷脂酰胆碱、胆固醇、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺聚乙二醇-2000的总量为等质量。

7、所述的步骤(3)中bi2s3的制备方法是将壳聚糖分散到硝酸铋水溶液中，搅拌均匀后升温至70-90℃，注入硫化钠水溶液后，调ph值至8-10，搅拌反应，反应完成后离心干燥，得到纳米bi2s3。

8、所述的步骤(3)中硝酸铋、壳聚糖、硫化钠的质量比为10-20:0.3-0.8:0.5-1.0，硝酸铋水溶液的浓度为0.3-1.0mol/l；硫化钠水溶液的浓度为0.01-0.1mol/l。

9、所述的脂质体、bi2s3、硫酸庆大霉素的质量比为1：0.5-1.5：0.5-1.5。

10、本发明的又一技术方案是采用上述方法制备得到的脂质体包覆的纳米bi2s3和gen。

11、所述的脂质体包覆的纳米bi2s3和gen在制备抑制耐甲氧基金黄色葡萄球菌上的应用。

12、相比现有采用注射器进行脂质体包裹的操作，能够实现脂质体与待包裹材料的充分初混，然后有效均质，使脂质体和待包裹材料充分的分散均匀，保证包裹效果和包裹的均一性。上述目的的实现，主要通过将二棕榈酰磷脂酰胆碱、胆固醇、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺聚乙二醇-2000dspe-peg2000混合成膜，再加入蔗糖、水调解膜内外的浓度梯度，使待包裹材料借助浓度梯度进入脂质体中，保证了待包裹材料在脂质体中的稳定性，大大提高了包裹效率。通过将硫酸庆大霉素包裹在脂质体中，能够使药物聚集，大大延长了其在机体内的滞留时间，并针对局部病变产生抗菌作用；另一方面，脂质体能够与细胞膜融合，将药物作用于病原体细胞内，破坏其细胞内生命活动，进而提高杀菌效果。通过调节脂质体的带电量及表面的电荷的正负性，提高了脂质体的稳定性，进而降低了药物的渗漏率。

13、本发明的技术方案中，脂质体具有类细胞结构，良好生物相容性、毒性小、无免疫反应、提高抗菌活性，减轻用药剂量等优势，通过将药物成功包覆到脂质体内部，控制光源，达到控制脂质体内药物定点部位释放的目的。

技术特征：

1.脂质体包覆的纳米bi2s3和gen的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的脂质体包覆的纳米bi2s3和gen的制备方法，其特征在于，步骤（1）中二棕榈酰磷脂酰胆碱、胆固醇、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺聚乙二醇-2000的摩尔比为2:0.5-1:3-5，优选为2：1：3。

3.根据权利要求1所述的脂质体包覆的纳米bi2s3和gen的制备方法，其特征在于，步骤（2）中蔗糖的加入量与二棕榈酰磷脂酰胆碱、胆固醇、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺聚乙二醇-2000的总量为等质量。

4.根据权利要求1所述的脂质体包覆的纳米bi2s3和gen的制备方法，其特征在于，步骤（3）中bi2s3的制备方法是将壳聚糖分散到硝酸铋水溶液中，搅拌均匀后升温至70-90℃，注入硫化钠水溶液后，调ph值至8-10，搅拌反应，反应完成后离心干燥，得到纳米bi2s3。

5.根据权利要求4所述的脂质体包覆的纳米bi2s3和gen的制备方法，其特征在于，步骤（3）中硝酸铋、壳聚糖、硫化钠的质量比为10-20:0.3-0.8:0.5-1.0，硝酸铋水溶液的浓度为0.3-1.0 mol/l；硫化钠水溶液的浓度为0.01-0.1 mol/l。

6.根据权利要求1所述的脂质体包覆的纳米bi2s3和gen的制备方法，其特征在于，脂质体、bi2s3、硫酸庆大霉素的质量比为1：0.5-1.5：0.5-1.5。

7.根据权利要求1-6任一项所述的方法制备得到的脂质体包覆的纳米bi2s3和gen。

8.根据权利要求7所述的脂质体包覆的纳米bi2s3和gen在制备抑制耐甲氧基金黄色葡萄球菌上的应用。

技术总结
本发明提供一种脂质体包覆的纳米Bi<subgt;2</subgt;S<subgt;3</subgt;和Gen的制备方法，将二棕榈酰磷脂酰胆碱、胆固醇、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺聚乙二醇‑2000加入三氯甲烷后搅拌均匀；将得到的混合液经旋转蒸发成膜后，避光保存，再加入蔗糖、水进行超声溶解，得到脂质体；将得到的脂质体加入Bi<subgt;2</subgt;S<subgt;3</subgt;、硫酸庆大霉素后，经破碎后再冷冻干燥得到脂质体包覆的纳米Bi<subgt;2</subgt;S<subgt;3</subgt;和Gen。本发明能够实现脂质体与待包裹材料的充分初混，然后有效均质，使脂质体和待包裹材料充分的分散均匀，保证包裹效果和包裹的均一性。通过调节脂质体的带电量及表面的电荷的正负性，提高了脂质体的稳定性，进而降低了药物的渗漏率。

技术研发人员：刘君子,古永红,肖玲玲,孙智,文晓敏,任之光,刘露,罗璋
受保护的技术使用者：湖北三峡职业技术学院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13