用于制备超声波造影剂的方法与流程

本技术一般涉及用于制备超声波造影剂的方法。

背景技术：

1、在超声波成像应用中，经脂质囊封的气体微球体用作造影剂。

技术实现思路

1、本发明提供用于制备基于磷脂的超声波造影剂的改进方法。本发明部分地基于以下意外的发现：某些基于磷脂的超声波造影剂调配物对二价金属阳离子敏感。在特定水准的某些所述阳离子的存在下，调配物中的磷脂及潜在其它组分沉淀，使得所述调配物不可用。迄今为止，并未了解到某些二价金属阳离子能够如此不利地影响超声波造影剂调配物。

2、基于这些发现，本发明涵盖用于合成防止这种不需要的磷脂沉淀的这类调配物的改进方法以及由这类方法所产生的调配物。还提供用于在合成经改进超声波造影剂中使用这些经改进调配物的方法，及所述造影剂在使对其有需要的个体成像中的用途。

3、由此，在一个方面中，本文提供一种用于制备磷脂悬浮液的方法，所述方法包括提供dppa、dppc及mpeg5000-dppe原料，测量dppc、dppa及mpeg5000-dppe原料中的一或多者或全部的钙浓度，将dppa、dppc及/或mpeg5000-dppe原料与非水溶剂组合以形成磷脂溶液，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。在一些实施例中，所述方法进一步包括测量非水溶剂的钙浓度。在一些实施例中，dppa、dppc及/或mpeg5000-dppe原料的合并钙浓度测量值为较低的(即，对于所测量的原料，无论这类所测量的原料为仅dppa、仅dppc、仅mpeg5000-dppe、dppa及dppc、dppa及mpeg5000-dppe、dppc及mpeg5000-dppe，还是为dppa、dppc及mpeg5000-dppe，钙浓度的总和或合并钙浓度为较低的)。

4、在一些实施例中，dppa、dppc及/或mpeg-dppe原料与非水溶剂的合并钙浓度测量值为较低的(即，对于所测量的组分，无论这类所测量的组分为仅dppa或为dppa及非水溶剂；仅dppc或dppa及非水溶剂；仅mpeg5000-dppe或mpeg5000-dppe及非水溶剂；dppa及dppc或dppa、dppc及非水溶剂；dppa及mpeg5000-dppe或dppa、mpeg5000-dppe及非水溶剂；dppc及mpeg5000-dppe或dppc、mpeg5000-dppe及非水溶剂；dppa、dppc及mpeg5000-dppe或dppa、dppc、mpeg5000-dppe及非水溶剂，钙浓度的总和或合并钙浓度为较低的)。

5、在一些实施例中，测量dppc、dppa及mpeg5000-dppe原料的钙浓度。

6、在一些实施例中，测量dppc、dppa及mpeg5000-dppe原料的钙浓度且dppa、dppc、mpeg-dppe原料及非水溶剂的合并钙浓度测量值为较低的。

7、由此，视实施例而定，仅测量dppa的钙浓度，或仅测量dppc的钙浓度，或仅测量mpeg5000-dppe的钙浓度，或仅测量dppa及dppc的钙浓度(且将这些浓度相加以得到合并钙浓度测量值)，或仅测量dppa及mpeg5000-dppe的钙浓度(且将这些浓度相加以得到合并钙浓度测量值)，或仅测量dppc及mpeg5000-dppe的钙浓度(且将这些浓度相加以得到合并钙浓度测量值)，或仅测量dppa、dppc及mpeg5000-dppe的钙浓度(且将这些浓度相加以得到合并钙浓度测量值)，或仅测量dppa及非水溶剂的钙浓度(且将这些浓度相加以得到合并钙浓度测量值)，或仅测量dppc及非水溶剂的钙浓度(且将这些浓度相加以得到合并钙浓度测量值)，或仅测量mpeg5000-dppe及非水溶剂的钙浓度(且将这些浓度相加以得到合并钙浓度测量值)，或仅测量dppa、dppc及非水溶剂的钙浓度(且将这些浓度相加以得到合并钙浓度测量值)，或仅测量dppa、mpeg5000-dppe及非水溶剂的钙浓度(且将这些浓度相加以得到合并钙浓度测量值)，或仅测量dppc、mpeg5000-dppe及非水溶剂的钙浓度(且将这些浓度相加以得到合并钙浓度测量值)，或测量dppa、dppc、mpeg5000-dppe及非水溶剂的钙浓度(且将这些浓度相加以得到合并钙浓度测量值)。应明确的是，得出合并的钙浓度测量值或表征值(如下文所论述)涵盖组分的每一组合。应理解除非另外明确陈述，否则术语dppa、dppa脂质、dppa磷脂、dppa原料、dppa脂质原料及dppa磷脂原料可互换地使用。对于dppc及mpeg5000-dppe使用类似的可互换术语。

8、在另一方面中，提供前述方法的变型。这类方法包括提供dppc及mpeg5000-dppe原料，测量dppc及mpeg5000-dppe原料中的一或两者的钙浓度，将dppc及mpeg5000-dppe原料与非水溶剂组合以形成磷脂溶液，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。在一些实施例中，所述方法进一步包括测量非水溶剂的钙浓度。各种前述实施例同等地适用于所述方法且应如此理解。

9、本发明在另一方面中进一步提供一种用于制备磷脂悬浮液的方法，所述方法包括提供dppa、dppc及mpeg5000-dppe原料，测量所述dppc、dppa及mpeg5000-dppe原料中的一或多者或全部的钙浓度，将具有较低合并钙浓度测量值的dppa、dppc及/或mpeg5000-dppe原料与非水溶剂组合以形成磷脂溶液，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。在一些实施例中，所述方法进一步包括测量非水溶剂及dppa、dppc、mpeg500-dppe原料的钙浓度且所述非水溶剂具有较低合并钙浓度测量值。

10、本发明在另一方面中进一步提供一种用于制备磷脂悬浮液的方法，所述方法包括将各自具有钙浓度表征值的mpeg5000-dppe原料、dppa原料、dppc原料及非水溶剂组合以形成磷脂溶液，其中mpeg5000-dppe原料、dppa原料、dppc原料及非水溶剂的合并钙浓度表征值为较低钙浓度，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。

11、本发明在另一方面中进一步提供一种用于制备磷脂悬浮液的方法，所述方法包括将各自具有钙浓度表征值的mpeg5000-dppe原料、dppc原料及非水溶剂组合以形成磷脂溶液，其中mpeg5000-dppe原料、dppc原料及非水溶剂的合并钙浓度表征值为较低钙浓度，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。

12、本发明在另一方面中进一步提供一种用于制备磷脂悬浮液的方法，所述方法包括选择mpeg5000-dppe原料、dppa原料及dppc原料，其中的一者、两者或全部三者具有钙浓度表征值，其中所述合并钙浓度表征值为较低钙浓度，将所述mpeg5000-dppe原料、dppa原料、dppc原料及非水溶剂组合以形成磷脂溶液，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。如此基于具有单独的或合并钙浓度表征值来选择例如磷脂原料及/或非水溶剂的组分。

13、本发明在另一方面中进一步提供一种用于制备磷脂悬浮液的方法，所述方法包括选择mpeg5000-dppe原料及dppc原料，其中的一或两者具有钙浓度表征值，其中所述合并钙浓度表征值为较低钙浓度，将所述mpeg5000-dppe原料、dppc原料及非水溶剂组合以形成磷脂溶液，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。如此基于具有单独的或合并钙浓度表征值来选择例如磷脂原料及/或非水溶剂的组分。

14、本发明在另一方面中进一步提供一种用于制备磷脂悬浮液的方法，所述方法包括选择各自具有钙浓度表征值的mpeg5000-dppe原料、dppa原料及dppc原料，其中所述合并钙浓度表征值为较低钙浓度，将所述mpeg5000-dppe原料、dppa原料、dppc原料及非水溶剂组合以形成磷脂溶液，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。在一些实施例中，非水溶剂具有钙浓度表征值，且mpeg5000-dppe、dppa及dppc原料与所述非水溶剂的合并钙浓度表征值为较低的。

15、本发明在另一方面中进一步提供一种用于制备磷脂悬浮液的方法，所述方法包括测量mpeg5000-dppe原料的钙浓度，将具有较低钙浓度测量值的mpeg5000-dppe原料与dppa原料、dppc原料及非水溶剂组合以形成磷脂溶液，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。在一些实施例中，较低钙浓度为小于115ppm。

16、本发明在另一方面中进一步提供一种用于制备磷脂悬浮液的方法，所述方法包括测量mpeg5000-dppe原料的钙浓度，将具有较低钙浓度测量值的mpeg5000-dppe原料与dppc原料及非水溶剂组合以形成磷脂溶液，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。在一些实施例中，较低钙浓度为小于115ppm。

17、本发明在另一方面中进一步提供一种用于制备磷脂悬浮液的方法，所述方法包括测量dppc原料的钙浓度，将具有较低钙浓度测量值的dppc原料与dppa原料、mpeg5000-dppe原料及非水溶剂组合以形成磷脂溶液，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。在一些实施例中，较低钙浓度为小于90ppm。

18、本发明在另一方面中进一步提供一种用于制备磷脂悬浮液的方法，所述方法包括测量dppc原料的钙浓度，将具有较低钙浓度测量值的dppc原料与mpeg5000-dppe原料及非水溶剂组合以形成磷脂溶液，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。在一些实施例中，较低钙浓度为小于90ppm。

19、本发明在另一方面中进一步提供一种用于制备磷脂悬浮液的方法，所述方法包括测量dppa原料的钙浓度，将具有较低钙浓度测量值的dppa原料与dppc原料、mpeg5000-dppe原料及非水溶剂组合以形成磷脂溶液，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。在一些实施例中，较低钙浓度为小于780ppm。

20、本发明在另一方面中进一步提供一种用于制备磷脂悬浮液的方法，所述方法包括测量非水溶剂的钙浓度，将具有较低钙浓度测量值的非水溶剂与dppa原料、dppc原料及mpeg5000-dppe原料组合以形成磷脂溶液，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。在一些实施例中，较低钙浓度为小于0.7ppm。

21、本发明在另一方面中进一步提供一种用于制备磷脂悬浮液的方法，所述方法包括将mpeg5000-dppe、dppa及dppc原料与非水溶剂组合以形成磷脂溶液，测量磷脂溶液的钙浓度，及将具有较低钙浓度测量值的磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。

22、本发明在另一方面中进一步提供一种用于制备磷脂悬浮液的方法，所述方法包括选择表征为不具有钙或具有较低钙浓度的mpeg5000-dppe原料，将所述mpeg5000-dppe原料、dppa原料、dppc原料及非水溶剂组合以形成磷脂溶液，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。在一些实施例中，mpeg5000-dppe原料进一步表征为不具有二价金属阳离子或具有较低二价金属阳离子含量。

23、本发明在另一方面中进一步提供一种用于制备磷脂悬浮液的方法，所述方法包括将mpeg5000-dppe原料、dppa原料、dppc原料及非水溶剂组合以形成表征为不具有钙或具有较低钙浓度的磷脂溶液，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。

24、本发明在另一方面中进一步提供一种用于使个体成像的方法，所述方法包括将磷脂悬浮液与全氟化碳气体组合以形成包括经磷脂囊封的气体微球体的超声波造影剂，将所述超声波造影剂投与到个体，及获得所述个体的一或多个造影增强型超声波造影图像，其中所述磷脂悬浮液通过前述任何方法来制备。

25、本发明在另一方面中进一步提供一种用于使个体成像的方法，所述方法包括将磷脂悬浮液与全氟化碳气体组合以形成包括经磷脂囊封的气体微球体的超声波造影剂，将所述超声波造影剂投与到个体，及获得所述个体的一或多个造影增强型超声波造影图像，其中所述磷脂悬浮液通过包括以下的方法来制备：测量mpeg5000-dppe原料的钙浓度，将具有较低钙浓度测量值的mpeg5000-dppe原料与dppa原料、dppc原料非水溶剂组合以形成磷脂溶液，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。

26、本发明在另一方面中进一步提供一种用于使个体成像的方法，所述方法包括将磷脂悬浮液与全氟化碳气体组合以形成包括经磷脂囊封的气体微球体的超声波造影剂，将所述超声波造影剂投与到个体，及获得所述个体的一或多个造影增强型超声波造影图像，其中所述磷脂悬浮液通过包括以下的方法来制备：将mpeg5000-dppe、dppa及dppc原料与非水溶剂组合以形成磷脂溶液，测量磷脂溶液的钙浓度，及将具有较低钙浓度测量值的磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。

27、本发明在另一方面中进一步提供一种用于使个体成像的方法，所述方法包括将磷脂悬浮液与全氟化碳气体组合以形成包括经磷脂囊封的气体微球体的超声波造影剂，将所述超声波造影剂投与到个体，及获得所述个体的一或多个造影增强型超声波造影图像，其中所述磷脂悬浮液通过包括以下的方法来制备：选择表征为不具有钙或具有较低钙浓度的mpeg5000-dppe原料，将mpeg5000-dppe原料、dppa原料、dppc原料及非水溶剂组合以形成磷脂溶液，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。

28、本发明在另一方面中进一步提供一种用于使个体成像的方法，所述方法包括将磷脂悬浮液与全氟化碳气体组合以形成包括经磷脂囊封的气体微球体的超声波造影剂，将所述超声波造影剂投与到个体，及获得所述个体的一或多个造影增强型超声波造影图像，其中所述磷脂悬浮液通过包括以下的方法来制备：将mpeg5000-dppe原料、dppa原料、dppc原料及非水溶剂组合以形成表征为不具有钙或具有较低钙浓度的磷脂溶液，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。

29、本发明在另一方面中进一步提供一种用于制备磷脂悬浮液的方法，所述方法包括在低钙或无钙条件中单独地将dppa、dppc及mpeg5000-dppe原料与包括pg的非水溶剂组合，以形成磷脂溶液，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。在一些实施例中，无钙或低钙条件为小于0.7ppm。

30、本发明在另一方面中进一步提供一种用于制备磷脂悬浮液的方法，所述方法包括在低钙或无钙条件中，以无关顺序的方式，连续地将dppa、dppc及mpeg5000-dppe原料与包括pg的非水溶剂组合以形成磷脂溶液，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。在一些实施例中，无钙或低钙条件为小于0.7ppm。

31、本发明在另一方面中进一步提供一种用于制备磷脂悬浮液的方法，所述方法包括在不含甲醇及甲苯的条件下，将dppa、dppc及mpeg5000-dppe原料组合以形成磷脂掺合物，在低钙或无钙条件中将磷脂掺合物与包括pg的非水溶剂组合以形成磷脂溶液，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。在一些实施例中，无钙或低钙条件为小于0.7ppm。

32、本发明在另一方面中进一步提供一种用于制备磷脂悬浮液的方法，所述方法包括将dppa、dppc及mpeg5000-dppe原料与掺合溶剂组合以形成磷脂掺合物，使所述掺合溶剂蒸发以形成经干燥的磷脂掺合物，在低钙或无钙条件中将所述经干燥的磷脂掺合物与包括pg的非水溶剂组合以形成磷脂溶液，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。在一些实施例中，无钙或低钙条件为小于0.7ppm。

33、本发明在另一方面中进一步提供一种用于制备磷脂悬浮液的方法，所述方法包括将dppa、dppc及mpeg5000-dppe原料与掺合溶剂组合以形成磷脂掺合物，在不含mtbe的条件下使用第二掺合溶剂使所述磷脂掺合物沉淀，在低钙或无钙条件下将经沉淀的磷脂掺合物与非水溶剂组合以形成磷脂溶液，及将所述磷脂溶液与含水溶剂组合以形成磷脂悬浮液。在一些实施例中，无钙或低钙条件为小于0.7ppm。

34、在前述任何方法的一些实施例中，所述方法进一步包括将磷脂悬浮液与全氟化碳气体组合以形成包括经磷脂囊封的气体微球体的超声波造影剂。在前述任何方法的一些实施例中，所述方法进一步包括将超声波造影剂投与到个体，及获得所述个体的一或多个造影增强型超声波图像。

35、本发明在另一方面中进一步提供一种用于使个体成像的方法，所述方法包括将磷脂悬浮液与全氟化碳气体组合以形成包括经磷脂囊封的气体微球体的超声波造影剂，将所述超声波造影剂投与到个体，及获得所述个体的一或多个造影增强型超声波造影图像，其中所述磷脂悬浮液通过前述方法中的任一者来制备。

36、本发明在其它方面中进一步提供一种包括磷脂溶液的组合物，所述磷脂溶液包括在非水溶剂中的dppa、dppc及mpeg5000-dppe且具有较低钙浓度，以及提供包括磷脂溶液的组合物，所述磷脂溶液包括在非水溶剂中的dppa、dppc及mpeg5000-dppe，其中所述dppa、dppc及mpeg5000-dppe及所述非水溶剂具有较低的合并钙离子含量表征值。在一些实施例中，非水溶剂包括丙二醇(例如，丙二醇可为唯一非水溶剂或其可与一或多种其它溶剂组合使用以提供非水溶剂)。在一些实施例中，非水溶剂包括丙二醇及甘油。在一些实施例中，非水溶剂包括缓冲液。在一些实施例中，缓冲液为乙酸盐缓冲液。在一些实施例中，组合物包括全氟化碳气体。在一些实施例中，全氟化碳气体为全氟丙烷。由此，在一些例子中，组合物提供于例如小瓶的容器中，且气体提供于容器的顶部空间中。还提供用于将磷脂溶液与全氟化碳气体组合以形成包括经磷脂囊封的气体微球体的超声波造影剂的方法。所述方法可进一步包括将超声波造影剂投与到个体，及获得所述个体的一或多个造影增强型超声波图像。

37、在本文所提供的各种方面的一些实施例中，非水溶剂包括(i)丙二醇或(ii)丙二醇及甘油。

38、在本文所提供的各种方面的一些实施例中，非水溶剂包括缓冲液。在本文所提供的各种方面的一些实施例中，非水溶剂包括乙酸盐缓冲液。

39、在本文所提供的各种方面的一些实施例中，含水溶剂包括缓冲液。在本文所提供的各种方面的一些实施例中，含水溶剂包括磷酸盐缓冲液。

40、在本文所提供的各种方面的一些实施例中，dppc、dppa及mpeg5000-dppe原料单独地与非水溶剂组合以形成磷脂溶液。

41、在本文所提供的各种方面的一些实施例中，dppc、dppa及mpeg5000-dppe原料以无关顺序的方式连续地与非水溶剂组合，以形成磷脂溶液。

42、在本文所提供的各种方面的一些实施例中，dppc、dppa及mpeg5000-dppe原料彼此组合以形成磷脂混合物且磷脂混合物随后与非水溶剂组合以形成磷脂溶液。所述磷脂混合物可为异质或均质的。

43、在本文所提供的各种方面的一些实施例中，dppc、dppa及mpeg5000-dppe原料彼此组合以形成磷脂掺合物且磷脂掺合物随后与非水溶剂组合以形成磷脂溶液。在本文所提供的各种方面的一些实施例中，使用有机溶剂溶解沉淀法形成磷脂掺合物，所述方法包括将dppc、dppa及mpeg5000-dppe原料溶解于甲醇及甲苯的混合物中，任选地浓缩所述磷脂/甲醇/甲苯混合物，且随后使所述经浓缩的磷脂/甲醇/甲苯混合物与甲基叔丁基醚(mtbe)接触以使磷脂沉淀，以形成磷脂掺合物。在本文所提供的各种方面的一些实施例中，通过以下形成磷脂掺合物：将dppc、dppa及mpeg5000-dppe原料溶解于除甲醇/甲苯溶剂系统之外的掺合溶剂系统中，任选地浓缩磷脂/溶剂混合物，随后使经浓缩的磷脂/溶剂混合物与甲基叔丁基醚(mtbe)接触以使磷脂沉淀，以形成磷脂掺合物。在本文所提供的各种方面的一些实施例中，通过以下形成磷脂掺合物：将dppc、dppa及mpeg5000-dppe原料溶解于掺合溶剂系统中(例如但不限于甲醇/甲苯溶剂系统)，且随后使混合物冻干或以其它方式干燥以去除溶剂，留下磷脂掺合物。

44、在本文所提供的各种方面的一些实施例中，所述方法进一步包括将所述磷脂悬浮液放置于小瓶中，且将全氟化碳气体导入到所述小瓶的顶部空间内。

45、在本文所提供的各种方面的一些实施例中，所述方法进一步包括用全氟化碳气体来使磷脂悬浮液活化以形成包括经磷脂囊封的气体微球体的超声波造影剂。

46、在本文所提供的各种方面的一些实施例中，所述方法进一步包括将超声波造影剂投与到个体，及获得所述个体的一或多个造影增强型超声波图像。

47、在本文所提供的各种方面的一些实施例中，所述方法进一步包括测量dppa原料及/或dppc原料及/或磷脂混合物及/或磷脂掺合物的钙浓度。

48、本发明的这些及其它方面及实施例将在本文中更详细描述。