桑辛素在制备治疗钙化性主动脉疾病药物中的应用

本发明属于生物工程，尤其涉及桑辛素在制备治疗钙化性主动脉疾病药物中的应用。

背景技术：

1、心脏瓣膜钙化病变(如主动脉瓣膜钙化)在组织学上是不可逆的，严重危害人类健康。瓣膜置换术是目前临床上治疗chvd唯一有效的手段，但存在风险高、并发症多、后期满意度低等缺点。因此，预防和延缓chvd的发生发展显得尤为重要。迄今为止，临床上未见有安全有效的药物用以预防和抑制瓣膜钙化。虽然他汀类药物和血管紧张素转化酶(ace)抑制剂一直寄予厚望，但大量临床试验均证实，两种药物均不能有效减慢该疾病的进展。因此，寻找相关药物干预瓣膜钙化，对延缓和抑制瓣膜的发生发展具有重要的临床价值和意义。

2、瓣膜间质细胞在机械、脂蛋白、炎症应激等持续刺激下可转化为成骨样细胞，其特征是表达成骨细胞和软骨细胞分化相关的转录因子(runx2、osterix和sox 9)和矿化调节蛋白(alp碱性磷酸酶、osteopontin骨桥蛋白、osteocalcin骨钙素、osteonectin骨连接蛋白、collagenase i和ii型、bone morphogenic proteins骨形态发生蛋白)，引起成骨性磷酸钙盐在瓣膜沉积，最终导致瓣膜钙化。因此，瓣膜间质细胞在cavd病理变化过程中起关键作用，对深入剖析该疾病发生和发展过程中的细胞-分子生物学机制至关重要。

3、morusin(桑辛素)是一种桑科植物桑根皮内的主要酚类成分，主要存在于桑白皮黄棕色粗皮中。分离的去乙烯基化黄酮，具有抗肿瘤，抗氧化，抗菌等各种生物活性。虽然morusin可抑制nf-κb和stat3的活性，同时有报道称激活nf-kb和stat3通路能促进瓣膜钙化，但还无法确认morusin对瓣膜钙化病变是否有缓解作用，更无法明确morusin是否可通过抑制因子nf-kb和stat3的活性减轻细胞成骨样分化以缓解瓣膜钙化病变。可见，morusin在治疗心脏瓣膜钙化病变中的应用前景还不明确。

技术实现思路

1、针对上述问题，本发明提供桑辛素在制备治疗钙化性主动脉疾病药物中的应用，主要为了解决桑辛素在钙化性主动脉疾中应用前景不明确等问题。

2、为了解决上述问题，本发明采用如下技术方案：

3、本发明第一方面涉及桑辛素在制备防治主动脉瓣膜钙化的药物中的应用。

4、主动脉瓣膜钙化一般为心脏主动脉瓣膜钙化，由骨性磷酸钙盐在瓣膜沉积，最终导致瓣膜钙化。防治表现为预防和治疗缓解，在临床中主要是为了预防和延缓chvd的发生发展。

5、就桑辛素在制得的药物中作用而言，所述桑辛素的作用表现为减弱人瓣膜间质细胞的成骨分化；或，作用表现为减弱成骨特异性标志物alp、runx2任一的表达上调，只要满足前述任一情况就应当视为在本发明范围内。所述人瓣膜间质细胞的成骨分化、成骨特异性标志物alp的表达均是由高脂高胆固醇诱导。在部分动物模型中，高脂高胆固醇可由om模拟诱导，om为由fbs、β-甘油磷酸、维生素c、地塞米松、高糖培养基配制而成，或om也可采用可商业化购买所得产品。

6、所述桑辛素的作用浓度为2～5μm，在该范围内，桑辛素具有较好的抑制主动脉瓣膜钙化的作用。在一般条件中，桑辛素浓度不超过5μm，在针对性治疗时，当受体条件满足时也可适当增加桑辛素作用浓度，当然前提是不能对受体造成明显的危害，其判断标准为优势大于副作用。

7、对于主动脉瓣膜钙化而言，所述主动脉瓣膜钙化主要为高脂高胆固醇并发主动脉瓣膜钙化。主动脉瓣膜钙化只要由高血脂、高胆固醇任一导致就满足前述条件。

8、本发明第二方面涉及桑辛素在体外抑制瓣膜间质细胞的成骨分化中非诊断治疗目的的应用。该种应用形式，桑辛素主要作用就是对人瓣膜间质细胞进行调节，进而可以实现对人瓣膜间质细胞的成骨分化进行控制。瓣膜间质细胞的成骨分化一般理解为瓣膜间质细胞向成骨细胞转化。

9、非诊断治疗目的的应用可以为在部分实验项目中的应用，应用的目的在于调节瓣膜间质细胞的变化，一方面可实现抑制瓣膜间质细胞成骨分化，另一方面也可通过调节桑辛素应用浓度实现控制瓣膜间质细胞成骨分化程度的控制。体外抑制一般理解为人体外，也就是不直接应用于人体，但是桑辛素可以用于动物模型。

10、所述应用为桑辛素在制备体外抑制人瓣膜间质细胞的成骨分化的制剂中非诊断治疗目的的应用。在该种应用中，桑辛素的主要作用是作为抑制人瓣膜间质细胞的成骨分化产品的有效成分。

11、本发明第三方面涉及桑辛素在制备成骨分化培养基中非诊断治疗目的的应用，其中，所述成骨分化培养基具有抑制hvic细胞中alp或runx2过表达的功能，所述桑辛素为抑制alp或runx2过表达的有效成分。

12、该成骨分化培养基的主要作用是为了给细胞成骨分化给提供培养环境，但是该成骨分化培养基又需要避免alp或runx2过表达对细胞成骨分化的影响，尤其是避免高脂高胆固醇情况下alp或runx2过表达对细胞成骨分化的影响，以此实现模型中部分变量的控制。

13、所述成骨分化培养基由fbs、β-甘油磷酸、维生素c、地塞米松、高糖培养基配制而成，当然，成骨分化培养基也可为目前已可商业化购买的成骨分化培养基，当然该培养基中含有用于抑制alp或runx2过表达的桑辛素。桑辛素的作用浓度也优选在2～5μm。

14、本发明的有益效果是：

15、明确了桑辛素在防治主动脉瓣膜钙化中的作用，给主动脉瓣膜钙化的防治提供了新的手段。同时还明确了桑辛素在瓣膜间质细胞的成骨分化调节等非诊断治疗目的的应用，为一些实验模型提供了新的控制手段。

技术特征：

1.桑辛素在制备防治主动脉瓣膜钙化的药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其中，所述桑辛素的作用表现为减弱人瓣膜间质细胞的成骨分化；或，作用表现为减弱成骨特异性标志物alp、runx2任一的表达上调。

3.根据权利要求1所述的应用，其中，所述人瓣膜间质细胞的成骨分化、成骨特异性标志物alp的表达均是由高脂高胆固醇诱导。

4.根据权利要求1-3任一所述的应用，其中，所述桑辛素的作用浓度为2～5μm。

5.根据权利要求1所述的应用，其中，所述主动脉瓣膜钙化为高脂高胆固醇并发主动脉瓣膜钙化。

6.桑辛素在体外抑制瓣膜间质细胞的成骨分化中非诊断治疗目的的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其中，所述应用为桑辛素在制备体外抑制人瓣膜间质细胞的成骨分化的制剂中非诊断治疗目的的应用。

8.桑辛素在制备成骨分化培养基中非诊断治疗目的的应用，其中，所述成骨分化培养基具有抑制hvic细胞中alp或runx2过表达的功能，所述桑辛素为抑制alp或runx2过表达的有效成分。

9.根据权利要求8所述的应用，其中，所述成骨分化培养基由fbs、β-甘油磷酸、维生素c、地塞米松、高糖培养基配制而成。

技术总结
本发明属于生物工程技术领域，具体公开桑辛素在制备治疗钙化性主动脉疾病药物中的应用，其主要涉及桑辛素在制备防治主动脉瓣膜钙化的药物中的应用，还涉及桑辛素在体外抑制瓣膜间质细胞的成骨分化中非诊断治疗目的的应用、桑辛素在制备成骨分化培养基中非诊断治疗目的的应用。本发明明确了桑辛素在防治主动脉瓣膜钙化中的作用，给主动脉瓣膜钙化的防治提供了新的手段。同时还明确了桑辛素在瓣膜间质细胞的成骨分化调节等非诊断治疗目的的应用，为一些实验模型提供了新的控制手段。

技术研发人员：董念国,刘宗涛,王怡轩,刘发远,陈玉麒,乔韡华,徐力,王衎,蒋晨
受保护的技术使用者：华中科技大学同济医学院附属协和医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/14