一种抑制食管鳞癌中肿瘤相关巨噬细胞浸润的方法

本发明属于生物医药，具体涉及一种抑制食管鳞癌中肿瘤相关巨噬细胞浸润的方法。

背景技术：

1、食管癌是全球癌症发病率排名第七、死亡率排名第六的恶性肿瘤。在我国新发的食管癌病例中，食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma，escc)占90％以上。近年来，尽管治疗食管癌的手术方法和放化疗方案取得了很大的进步，食管癌患者的预后有所改善，但其总体生存率仍然很差，在非转移情况下，食管癌患者的5年生存率为20％-35％。

2、巨噬细胞是高度可塑性的细胞，具有多种功能，包括组织发育和体内平衡、清除细胞碎片、消除病原体和调节炎症反应。巨噬细胞激活状态通常被简化为两类：m1经典激活的巨噬细胞和m2替代激活的巨噬细胞。m1巨噬细胞具有抗肿瘤作用，而m2巨噬细胞具有促肿瘤作用。肿瘤将循环单核细胞和组织驻留巨噬细胞募集到肿瘤微环境，并将它们极化为m2巨噬细胞，再通过各种可溶性和机械因素产生肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associatedmacrophages，tams)。tams通过促进遗传不稳定性、血管生成、纤维化、免疫抑制、淋巴细胞排斥、侵袭和转移来增强肿瘤进展。越来越多的证据表明靶向tams可以打破肿瘤免疫治疗耐受和化疗抵抗，而且以tam为靶点的单一疗法或联合化疗的治疗方法正在临床前和临床中进行试验。因此，发掘调控肿瘤相关巨噬细胞浸润的关键分子对于escc的治疗极其重要。

3、spp1又称为骨桥蛋白(osteopontin，opn)，分子量约为44kda。spp1蛋白在多种组织和体液中表达，其基本生理功能是参与生物矿化，骨重塑和伤口愈合等。以往研究表明spp1能够促进肿瘤转移，激活细胞增殖途径，维持干细胞样表型，上皮间充质转化以及化疗和放疗的抵抗，而且，spp1通过调节巨噬细胞中pd-l1的表达来促进肝癌免疫抑制。

技术实现思路

1、发明目的：本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种抑制食管鳞癌中肿瘤相关巨噬细胞浸润的方法。

2、为了解决上述技术问题，本发明公开了如下技术方案：

3、第一方面，本发明提供了一种抑制spp1表达的物质的应用。

4、所述应用包括在制备抑制食管鳞癌中肿瘤相关巨噬细胞浸润产品中的应用；在一些实施例中，所述物质为药物。

5、所述应用包括在制备治疗肿瘤相关巨噬细胞高浸润型肿瘤产品中的应用；在一些实施例中，所述物质为药物。

6、所述应该包括在制备治疗相关巨噬细胞高浸润型食管鳞癌产品中的应用；在一些实施例中，所述肿瘤相关巨噬细胞高浸润型肿瘤为食管鳞癌；在一些实施例中，所述物质为药物。

7、所述应用包括抑制食管鳞癌中肿瘤相关巨噬细胞浸润。

8、所述应用包括治疗肿瘤相关巨噬细胞高浸润型肿瘤；在一些实施例中，所述肿瘤相关巨噬细胞高浸润型肿瘤为食管鳞癌。

9、所述应用包括治疗相关巨噬细胞高浸润型食管鳞癌。

10、所述应用包括在构建巨噬细胞低浸润型食管鳞癌模型中的应用。

11、在一些实施例中，所述抑制spp1表达的物质包括核苷酸序列为seq id no.2或seqid no.3所示的shrna。

12、在一些实施例中，所述抑制spp1表达的物质包括含有所述shrna的重组质粒；所述重组质粒通过将所述shrna连接到载体上得到。

13、在一些实施例中，所述抑制spp1表达的物质包括含有所述shrna的plv-shspp1；所述plv-shspp1的制备方法如下；

14、(1)将所述shrna合成退火后连接到载体上，得到重组质粒；

15、(2)将所述重组质粒利用lentivirus系统进行病毒包装，得到plv-shspp1。

16、第二方面，本发明提供了一种抑制食管鳞癌中肿瘤相关巨噬细胞浸润的方法。

17、在一些实施例中通过抑制spp1表达的物质来抑制食管鳞癌中肿瘤相关巨噬细胞浸润，在一些实施例中通过敲除spp1来抑制食管鳞癌中肿瘤相关巨噬细胞浸润。

18、第三方面，本发明提供了一种抑制食管鳞癌中肿瘤相关巨噬细胞浸润的药物和治疗巨噬细胞高浸润型肿瘤的药物。

19、所述抑制食管鳞癌中肿瘤相关巨噬细胞浸润的药物和治疗巨噬细胞高浸润型肿瘤的药物均包括有效剂量的抑制spp1表达的物质。

20、在一些实施例中，所述抑制spp1表达的物质包括核苷酸序列为seq id no.2或seqid no.3所示的shrna。

21、在一些实施例中，所述抑制spp1表达的物质包括含有所述shrna的重组质粒；所述重组质粒通过将所述shrna连接到载体上得到。

22、在一些实施例中，所述抑制spp1表达的物质包括含有所述shrna的plv-shspp1；所述plv-shspp1的制备方法如下；

23、(1)将所述shrna合成退火后连接到载体上，得到重组质粒；

24、(2)将所述重组质粒利用lentivirus系统进行病毒包装，得到plv-shspp1。

25、在一些实施例中，所述抑制食管鳞癌中肿瘤相关巨噬细胞浸润的药物和治疗巨噬细胞高浸润型肿瘤的药物的剂型包括注射剂。

26、第四方面，本发明提供了spp1基因作为靶点在制备抑制食管鳞癌中肿瘤相关巨噬细胞浸润的药物和治疗巨噬细胞高浸润型肿瘤的药物中的应用。

27、在一些实施例中，所述药物通过敲除spp1、和/或敲低spp1获得。

28、在一些实施例中，所述药物的剂型包括注射剂。

29、第五方面，本发明提供了一种药物组合物。

30、所述药物组合物包括(i)上述第三方面所述药物，(ii)与所述药物相配伍的其他药物及其药学上可接受的载体和/或辅料。

31、在一些实施例中，所述药物组合物的剂型包括注射剂。

32、有益效果：与现有技术相比，本发明具有以下优势：

33、本发明提供一种用于抑制食管鳞癌中肿瘤相关巨噬细胞浸润的功能产品，并应用于食管鳞癌治疗，克服现有技术中缺乏针对改善食管鳞癌免疫微环境研究的缺陷。

技术特征：

1.一种抑制spp1表达的物质在制备抑制食管鳞癌中肿瘤相关巨噬细胞浸润产品中的应用，其特征在于，所述抑制spp1表达的物质包括核苷酸序列为seq id no.2或seq idno.3所示的shrna。

2.一种抑制spp1表达的物质在制备治疗肿瘤相关巨噬细胞高浸润型肿瘤产品中的应用，其特征在于，所述肿瘤相关巨噬细胞高浸润型肿瘤为食管鳞癌，所述抑制spp1表达的物质包括核苷酸序列为seq id no.2或seq id no.3所示的shrna。

3.一种抑制spp1表达的物质在构建巨噬细胞低浸润型食管鳞癌模型中的应用，其特征在于，所述抑制spp1表达的物质包括核苷酸序列为seq id no.2或seq id no.3所示的shrna。

4.一种抑制食管鳞癌中肿瘤相关巨噬细胞浸润的药物，其特征在于，包括有效剂量的抑制spp1表达的物质，所述抑制spp1表达的物质包括核苷酸序列为seq id no.2或seq idno.3所示的shrna。

5.一种治疗巨噬细胞高浸润型肿瘤的药物，其特征在于，包括有效剂量的抑制spp1表达的物质；所述巨噬细胞高浸润型肿瘤为食管鳞癌，所述抑制spp1表达的物质包括核苷酸序列为seq id no.2或seq id no.3所示的shrna。

6.根据权利要求1或2所述应用，其特征在于，所述产品包括药物。

7.根据权利要求1-3中任意一项所述应用或权利要求4或5所述药物，其特征在于，所述抑制spp1表达的物质包括含有所述shrna的重组质粒；所述重组质粒通过将所述shrna连接到载体上得到。

8.根据权利要求1-3中任意一项所述应用或权利要求4或5所述药物，其特征在于，所述抑制spp1表达的物质包括含有所述shrna的plv-shspp1；所述plv-shspp1的制备方法如下；

9.一种药物组合物，其特征在于，包括(i)权利要求4或5所述药物，(ii)与所述药物相配伍的其他药物及其药学上可接受的载体和/或辅料。

10.根据权利要求4或5所述的药物或权利要求9所述药物组合物，其特征在于，所述药物或所述药物组合物的剂型包括注射剂。

技术总结
本发明公开了一种抑制食管鳞癌中肿瘤相关巨噬细胞浸润的方法，提供了一种用于抑制食管鳞癌中肿瘤相关巨噬细胞浸润的功能产品，并应用于食管鳞癌治疗，克服现有技术中缺乏针对改善食管鳞癌免疫微环境研究的缺陷。

技术研发人员：杜仁乐,王晨,王诗瑶,李雨桐,王琳红,代丽萍,张建营,杨洋
受保护的技术使用者：郑州大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/14