一种白头翁提取物在制备治疗失眠药物上的应用

本发明涉及药学，尤其涉及一种白头翁提取物在制备治疗失眠药物上的应用。

背景技术：

1、白头翁是毛茛科白头翁属植物，主要的药用部位是其干燥根。最早关于白头翁的记录是《神农本草经》，其味苦，性凉，归胃、肾、大肠经，功效以消赘、凉血、止泻、去火等为主，传统用于细菌性痢疾的治疗，对寒热温症、眼目赤痛等也有较好的治疗效果。三萜皂苷类是白头翁中的主要成分，根据母核结构可分为齐墩果酸型和羽扇豆烷型两大类。研究表明白头翁皂昔具有抗肿瘤，抗炎，抗菌，舒张血管等一系列药理活性。

2、白头翁的药理活性多样，主要可提高机体识别和抵御外来异物如细菌、病毒等入侵的能力，降低肿瘤细胞的繁殖速率，减少病原微生物的数量及有效抑制自由基的氧化反应等。白头翁临床常用于治疗溃疡性结肠炎、慢性结肠炎、慢性腹泻、急性胃肠炎、极性菌痢、消化性溃疡、滴虫性阴道炎等，其中，最具有潜力应用是在抗炎抗肿瘤的新药开发方面。近年研究发现其主要活性成分还可以保护神经细胞，对治疗阿尔茨海默病有着显著的效果。

3、cn114209739a公开了一种白头翁提取物在制备治疗抗抑郁药物上的应用，该发明以白头翁作为原料，依次经过提取、分离、浓缩和干燥后得到白头翁皂苷，之后将白头翁皂苷溶于pbs缓冲溶液中，制得用药。该发明通过对小鼠采取慢性不可预知刺激的方式建立抑郁症模型，然后分组给药，通过分析实验结果发现抑郁症模型小鼠症状消失，白头翁总皂苷和白头翁皂苷b4对抑郁症具有确切的疗效。

4、cn114469969a公开了白头翁皂苷b5在制备皮肤护理品中的应用。该发明通过对实验鼠进行背部皮肤伤害建立实验模型进行过敏和瘢痕给药实验，实验结果表明白头翁皂苷b5可有效减轻皮肤过敏以及受损皮肤瘢痕的严重程度，说明白头翁皂苷b5可用于制备治疗皮肤过敏和/或修复破损皮肤瘢痕的皮肤护理品或药物。

5、抑郁症是一种极为常见的精神疾病，主要临床表现为心境低落、思维迟缓、认知功能障碍及意志力减弱。慢性不可预见性的应激动物抑郁模型实验表明，慢性应激可以导致海马神经元受损，增加海马对神经毒性的反应，引起抑郁症状。下丘脑-垂体-肾上腺素轴(hpa轴)参与机体对应激的反应，是将精神心理转化为生理行为的主要传感器，当机体受到外界应激源应激后，易造成hpa轴功能亢进，从而引起抑郁症状，海马具有hpa轴负反馈抑制作用，因而可缓解抑郁。抑郁状态下，当hpa轴功能亢进时，会产生大量的糖皮质激素(gc)，海马易受到过量gc攻击，造成这种抑制作用降低，从而加重hpa轴功能亢进。其中，过量的gc会释放大量的谷氨酸(glu)，glu是中枢神经系统中主要的兴奋性递质，海马ca3区神经元全部为glu能神经元，调控着神经元之间的兴奋传递，维持大脑的正常兴奋性，而过量的glu则有毒害海马神经元的不良反应。同时，过量的glu的累积，会催化一氧化氮(no)的生成，no与超氧自由基结合生成的过氧化酸根会损伤线粒体，与超氧化物歧化酶结合生成的亚硝基化剂会亚硝化酪氨酸，影响超氧化物歧化酶活性，增加机体毒性作用，损伤海马。白头翁皂苷对于海马神经元的损伤有一定的改善及逆转作用，基于此原因达到治疗抑郁症的作用，其抗抑郁作用机制可能与保护海马神经元功能有关。

6、失眠症是最常见的睡眠障碍，现代医学的失眠症指患者在有足够睡眠时间和环境下，入睡困难或睡眠维持困难并影响白天社会功能，出现疲劳、全身不适感、注意力不集中等症状。睡眠是由中枢神经系统中相关的神经递质和细胞因子等物质的共同参与协同下的一个主动过程。脑中起兴奋脑中起兴奋或抑制作用的神经递质的含量变化，与失眠的发生直接相关，在脑中促进睡眠发生的神经递质主要有5-羟色胺(5-ht)和γ-氨基丁酸(gaba)，而促进觉醒的神经递质主要有多巴胺、谷氨酸和去甲肾上腺素。现有的治疗失眠的药物主要通过作用于神经元gaba受体，增加氯离子内流使神经细胞超极化，产生中枢神经镇静与抑制作用。通过增强gaba能神经元的活性，增加gaba的释放从而提高脑内gaba水平，从而达到镇静催眠的效果。另有些药物通过抑制神经元对释放于突触间隙的去甲肾上腺素(na)和5-ht的再摄取，又以抑制5-ht的再摄取为主，增加突触间隙处的5-ht浓度提高而产生镇静助眠的作用，从而治疗失眠症状。

7、虽然，失眠与抑郁的病因和病理机制并不明确，且有研究认为二者存在复杂的双向关系，存在高度相关性。但睡眠障碍并不是抑郁症所致，相反，它通常出现在抑郁发作之前，并在抑郁症缓解期持续存在，对比二者治疗药物的作用机制，存在着一定的差异。因此，合适的治疗失眠症的药物是被迫切需要的。

技术实现思路

1、有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明提供一种白头翁提取物在制备治疗失眠药物上的应用，解决了现有技术尚未将白头翁皂苷作为主要活性成分用于治疗失眠的技术问题；本发明所提供的用于治疗失眠的药物高效、安全、药性温和、副作用小、适合长期服用。

2、具体技术方案如下：

3、本发明提供一种白头翁提取物，所述白头翁提取物是通过以下步骤得到：

4、(1)、将白头翁片，加入乙醇水溶液，加热回流提取；将每次所得提取液过滤，合并滤液；将所得滤液减压浓缩干燥至原体积的1/10，得残留物；

5、或，将炮制后的白头翁加入乙醇水溶液，加热回流提取；将每次所得提取液过滤，合并滤液；将所得滤液减压浓缩干燥至原体积的1/10，得残留物；

6、(2)、将步骤(1)所得残留物，加水稀释，离心后收集上清液，为上样液；再将上样液上色谱柱进行色谱分离，收集乙醇洗脱液，合并浓缩干燥，得膏状物；

7、(3)、将步骤(2)得到膏状物进行冻干，得粉末白头翁提取物，将冻干粉末收集保存，备用。

8、进一步地，所述步骤(1)中，炮制后的白头翁为白头翁片加食醋拌匀，闷润；待醋被吸尽后，炒至药材干燥；取出，放凉，得炮制后的白头翁；醋炙中白头翁片为食醋重量的4-6倍。

9、进一步地，所述步骤(1)中，炮制后的白头翁为白头翁片加姜汁拌匀，闷润；待姜汁被吸尽后，炒至药材干燥；取出，放凉，得炮制后的白头翁；姜炙中白头翁片为姜汁重量的8-10倍，姜汁为生姜压榨而得。

10、进一步地，所述步骤(1)中，炮制后的白头翁为白头翁片加盐水拌匀，闷润；待盐水被吸尽后，炒至药材干燥；取出，放凉，得炮制后的白头翁；盐炙中白头翁片为盐水重量的4-5倍。

11、进一步地，所述步骤(1)中，炮制后的白头翁为白头翁片加食醋拌匀，闷润；待醋被吸尽后，炒至药材干燥，取出，放凉，得醋炙白头翁；取甘草片加水浸泡，然后煎煮，滤液过滤浓缩后，得到甘草汁，将甘草汁与醋炙白头翁拌匀，闷润；待甘草汁被吸尽后，炒至药材干燥，取出，放凉，得炮制后的白头翁；甘草炙中白头翁片为食醋重量的4-6倍，水为甘草片重量的6-8倍，煎煮次数为1-3次，醋炙白头翁为甘草汁重量的1-3倍。

12、进一步地,所述步骤(1)中，加入的乙醇溶液为白头翁片的5-10倍量，浓度为30-90％；加热回流提取次数为1-3次，提取时间为0.5-1.5h。

13、进一步地,所述步骤(2)中，所用色谱柱为d101型大孔树脂的离子色谱柱；采用水-乙醇梯度洗脱，收集50％-90％乙醇洗脱液。

14、进一步地,所述步骤(3)中，将步骤(1)所得残留物，加水至药液密度为1.035，置离心机离心，收集上清液，为上样液；上样液以0.5bv/h的流速上色谱柱采用水-乙醇梯度洗脱进行色谱分离，收集60wt％乙醇洗脱液，合并浓缩干燥，得膏状物。

15、进一步地，所述色谱柱为柱体积为2l的d101型大孔树脂的离子色谱柱。

16、本发明还提供了一种白头翁提取物，由上述方法制备而成。

17、本发明提供了上述白头翁提取物在制备治疗失眠药物上的应用。

18、进一步地，所述白头翁提取物在制备治疗失眠药物上的应用为将白头翁提取物加入3-8％的蔗糖水溶液中制得；或者，为将白头翁提取物加入3-8％的葡萄糖水溶液中制得。

19、再进一步地，所述白头翁提取物的浓度为1-5mg/ml。

20、进一步地，所述治疗失眠药物还包括药用辅料。

21、药用辅料系指生产药品和调配处方时使用的赋形剂和附加剂；是除活性成分以外，在安全性方面已进行了合理的评估，且包含在药物制剂中的物质。药用辅料除了赋形、充当载体、提高稳定性外，还具有增溶、助溶、缓控释等重要功能，是可能会影响到药品的质量、安全性和有效性的重要成分。

22、再进一步地，上述的治疗失眠药物可以制成以下制剂，所述制剂为注射剂、片剂、丸剂、胶囊剂、悬浮剂、乳剂、颗粒剂、滴丸剂、散剂、口服液、糖浆剂或酒剂。

23、本发明的有益效果是：

24、1、与现有技术相比，本发明联合醋炙和甘草炙的炮制方法制备白头翁饮片。白头翁皂苷中主要成分为五环三萜皂苷可与由磷脂和胆固醇组成的生物膜层相互作用，可干扰膜及其功能，导致膜穿孔或完全溶解。五环三萜皂苷通过作用于肝细胞膜上的鞘磷脂(sm)，诱导神经酰胺/鞘磷脂(cer/sm)失衡，导致脂质代谢紊乱和细胞凋亡，逐渐损伤肝脏，最终导致慢性肝损伤。醋炙方式炮制白头翁，使得白头翁皂苷b4增加，且多数五环三萜皂苷含量随之降低。醋炙提供的酸性和加热条件使白头翁皂苷经历三个反应:环中氧键的水解、侧链烃上羟基的还原和糖链上羟基的酰化。这些化学反应可以改变五环三萜皂苷的活性基团，减少对cer/sm平衡的干扰，从而减少肝细胞损伤，在一定程度上削弱白头翁皂苷所具有的肝毒性。另外，本发明发现酸性条件下可影响皂苷的可溶性，导致其生物利用度降低，而甘草炙改善了生物利用度低的问题，达到了提高药物疗效的作用。本发明降低了药物服用所带来的的副作用并且提高了其疗效，对身体有益。

25、2、本发明提供一种白头翁提取物在制备治疗失眠药物中的应用。白头翁皂苷属于纯天然制剂，具有多种生理活性和良好药理作用，具有抗癌、调节免疫功能、抗氧化活性、抗炎、抗菌、舒张血管等多重生理功效，对身体有益。本发明通过优化提取工艺，控制给药剂量，充分发挥了白头翁皂苷对失眠症状的治疗作用，在失眠治疗剂量下，安全可靠、无毒副作用，对失眠药物具有潜在的开发价值。