一种补骨脂素介孔纳米粒制剂及其制备方法与流程

本发明涉及生物医药，具体地说是一种补骨脂素介孔纳米粒制剂及其制备方法。

背景技术：

1、补骨脂素(psoralen，pso)是中药补骨脂的主要活性成分之一，口腔领域研究证实psoralen通过抗菌、抗炎和促进成骨作用，对慢性牙周炎具备潜在的治疗意义。但psoralen水溶性小，生物利用度较低，如何借助药物载体改善其生物利用度是临床转化应用的前提。已有成果将psoralen负载于脂质纳米载体plga等，应用于抗肿瘤、抗白癜风等研究，但脂质体存在包封效率低、储存稳定性差等问题，使临床应用受到限制。纳米颗粒是尺寸在10-1000nm范围内的颗粒分散体或固体颗粒，作为药物递呈系统提供了优于脂质体的一些特殊优势，如有助于提高药物的稳定性，并具有可调节的控释特性等。介孔聚多巴胺纳米粒子(mpda)不仅可增加疏水药物的水分散度，提高其生物利用度，而且药物负载量高，生物安全性良好，具有缓释性能，是一种具有潜力的纳米粒药物载体。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提出一种补骨脂素介孔纳米粒制剂及其制备方法，以解决但psoralen水溶性小，生物利用度较低，如何借助药物载体改善其生物利用度是临床转化应用的前提；已有成果将psoralen负载于脂质纳米载体plga等，应用于抗肿瘤、抗白癜风等研究，但脂质体存在包封效率低、储存稳定性差等问题，使临床应用受到限制的问题。

2、为实现上述目的，本发明提供以下技术方案：

3、一种补骨脂素介孔纳米粒制剂及其制备方法，包括将补骨脂素按照目标浓度超声完全溶于无水乙醇，介孔聚多巴胺纳米粒子同样按照目标浓度超声溶于无水乙醇；两种溶液避光磁力搅拌24h即得载补骨脂素介孔聚多巴胺混合液，通过高速离心获得载补骨脂素介孔聚多巴胺颗粒。

4、所述介孔聚多巴胺纳米粒子的合成包括：将60ml无水乙醇和65ml纯净水混合后，加入0.36g f127(聚氧乙烯聚氧丙烯醚)和417ul tmb(四甲基联苯胺)，室温搅拌30分钟；然后加入60mg的多巴胺盐酸和90mg的tris(三羟甲基氨基甲烷)，最后的混合物在室温下搅拌24小时；混合物以12000rpm的转速离心10分钟；将无水乙醇/丙酮(v/v＝2:1)混合物与离心沉淀洗涤3次，最终得到了实验所需的介孔聚多巴胺纳米粒子mpda。

5、通过高速离心获得载补骨脂素介孔聚多巴胺颗粒具体包括以下内容：将介孔聚多巴胺纳米粒子和补骨脂素在无水乙醇中分散，超声冲击分散均匀，将分散均匀的介孔聚多巴胺纳米粒子与补骨脂素混合，在室温下磁力搅拌器中搅拌24h，获得载补骨脂素介孔聚多巴胺颗粒。

6、本发明将补骨脂素负载于介孔聚多巴胺纳米粒子，制备为新型载补骨脂素介孔聚多巴胺纳米粒(pso-mpda),将新型载补骨脂素介孔聚多巴胺纳米粒均匀分散于细胞培养基中进行细胞培养，观察牙周膜干细胞成骨分化情况，可知该混合颗粒是否具有促进牙周膜干细胞成骨分化能力。

7、与现有技术相比，本发明有益效果如下：

8、本发明制备的载补骨脂素介孔聚多巴胺颗粒可均匀分散于非有机溶液中，zeta电位在-23附近，具有较好的稳定性；介孔聚多巴胺载补骨脂素的载药率载82％左右；药物释放：在3h左右补骨脂素释放率达80％左右。

9、将本发明方法制备的载有补骨脂素介孔聚多巴胺颗粒均匀分散于细胞培养基中进行细胞培养，发现牙周膜干细胞成骨分化增强，可知该混合颗粒具有促进牙周膜干细胞成骨分化能力，且在浓度低于50ug/ml时对细胞无毒性。

技术特征：

1.一种补骨脂素介孔纳米粒制剂及其制备方法，其特征在于，包括将补骨脂素按照目标浓度超声完全溶于无水乙醇，介孔聚多巴胺纳米粒子同样按照目标浓度超声溶于无水乙醇；两种溶液避光磁力搅拌24h即得载补骨脂素介孔聚多巴胺混合液，通过高速离心获得载补骨脂素介孔聚多巴胺颗粒。

2.根据权利要求1所述的，其特征在于一种补骨脂素介孔纳米粒制剂及其制备方法，所述介孔聚多巴胺纳米粒子的合成包括：将60ml无水乙醇和65ml纯净水混合后，加入0.36gf127(聚氧乙烯聚氧丙烯醚)和417ul tmb(四甲基联苯胺)，室温搅拌30分钟；然后加入60mg的多巴胺盐酸和90mg的tris(三羟甲基氨基甲烷)，最后的混合物在室温下搅拌24小时；混合物以12000rpm的转速离心10分钟；将无水乙醇/丙酮(v/v＝2:1)混合物与离心沉淀洗涤3次，最终得到了实验所需的介孔聚多巴胺纳米粒子mpda。

3.根据权利要求1所述的一种补骨脂素介孔纳米粒制剂及其制备方法，其特征在于，通过高速离心获得载补骨脂素介孔聚多巴胺颗粒具体包括以下内容：将介孔聚多巴胺纳米粒子和补骨脂素在无水乙醇中分散，超声冲击分散均匀，将分散均匀的介孔聚多巴胺纳米粒子与补骨脂素混合，在室温下磁力搅拌器中搅拌24h，获得载补骨脂素介孔聚多巴胺颗粒。

技术总结
本发明提供了一种补骨脂素介孔纳米粒制剂及其制备方法，其特征在于，纳米颗粒是尺寸在10‑1000nm范围内的颗粒分散体或固体颗粒，作为药物递呈系统提供了优于脂质体的一些特殊优势，如有助于提高药物的稳定性，并具有可调节的控释特性等；介孔聚多巴胺纳米粒子不仅可增加疏水药物的水分散度，提高其生物利用度，而且药物负载量高，生物安全性良好，具有缓释性能，是一种具有潜力的纳米粒药物载体；本发明将补骨脂素负载于介孔聚多巴胺纳米粒子，制备为新型载补骨脂素介孔聚多巴胺纳米粒,将其均匀分散于细胞培养基中进行细胞培养，发现牙周膜干细胞成骨分化增强，可知该混合颗粒具有促进牙周膜干细胞成骨分化能力，且在浓度低于50ug/ml时对细胞无毒性。

技术研发人员：吴迎涛,王毓佳,于洁,徐颖婕,张琪
受保护的技术使用者：青岛市口腔医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15