一种女性妇科用胶原蛋白修复凝胶及制备方法与流程

本发明属于妇科卫生，具体是指一种女性妇科用胶原蛋白修复凝胶及制备方法。

背景技术：

1、阴道炎症是病原微生物感染引起的多种阴道粘膜疾病总称，是妇科常见的病病，通常会导致阴道下黏膜、阴道黏膜下结缔组织发生炎症，严重影响着女性的身心健康，目前市场上治疗阴道炎的药物为口服及阴道腔给药两种，由于口服给药模式会经过胃肠道反应和肝首过效应，其治疗效果不明确，而阴道给药能直接作用于病变部位，规避系统性毒性而备受关注，然而目前市场上治疗阴道炎的凝胶剂存在很多不足，如凝胶剂中加入激素或抗生素成分，易破坏阴道正常生态平衡，导致起防御功能的正常寄生菌受到抑制，普通凝胶剂易受到阴道生理结构以及内环境的影响，导致阴道内药物滞留时间短、患者顺应性差等问题。

2、目前现有技术主要存在以下问题：1、凝胶剂中加入激素或抗生素成分，易破坏阴道正常生态平衡，产生抗药性；2、普通凝胶剂易受到阴道生理结构以及内环境的影响，导致阴道内药物滞留时间短、患者顺应性差等问题。

技术实现思路

1、针对上述情况，为克服现有技术的缺陷，本发明提供了一种女性妇科用胶原蛋白修复凝胶及制备方法，为了解决凝胶剂中加入激素或抗生素成分，导致起防御功能的正常寄生菌受到抑制，以及普通凝胶剂易受到阴道生理结构以及内环境的影响，导致阴道内药物滞留时间短、患者顺应性差等问题，本发明提出从植物中提取具有抗炎抑菌功效的植物活性成分，与对阴道炎有较好效果的白藜芦醇和苦参碱复配，以此为药基制备成药物微乳，保证活性药物的稳定性，同时以胶原蛋白/壳聚糖复合材料作为凝胶基质，制备成温敏性凝胶，以液体给药形式进入阴道，并迅速形成薄凝胶层，进而使载药基质与多褶皱阴道黏膜组织紧密结合，提高了药物的粘附及吸收，并减少药物在阴道腔内的渗漏。

2、为了实现上述目的，本发明采取的技术方案如下：本发明提出了一种女性妇科用胶原蛋白修复凝胶，所述女性妇科用胶原蛋白修复凝胶包括如下重量份的组分：胶原蛋白/壳聚糖复合材料30-40份、药物微乳5-8份、β-甘油磷酸钠35份、促渗剂2份；所述胶原蛋白/壳聚糖复合材料为胶原蛋白接枝庚酰化羟丁基壳聚糖。

3、优选地，所述胶原蛋白/壳聚糖复合材料的制备方法包括以下步骤：

4、s1、取20-30g的naoh溶解于蒸馏水中，冷却至室温后，加入壳聚糖20-30g，充分搅拌至膨松状态，置于-20℃冰箱冷冻过夜制得碱化壳聚糖；

5、s2、取s1制备的碱化壳聚糖10-20g，置于圆底烧瓶中，加入异丙醇和蒸馏水，室温搅拌6-7h，加入十二烷基硫酸钠0.1-0.2g，缓慢滴加环氧丁烷200-250ml，55-60℃反应12-13h，调节ph至7，透析，离心取上清液，冷冻干燥，即得羟丁基壳聚糖；

6、s3、取s2制备的羟丁基壳聚糖1-3g溶解于蒸馏水中，加入无水甲醇，室温下搅拌15-20min后，缓慢滴加庚酸酐6-8ml，反应20-24h后，透析、冷冻干燥，得到庚酰化羟丁基壳聚糖；

7、s4、取微生物转谷氨酰胺酶3-5g溶解于0.2mol/lna2hpo4/nah2po4缓冲溶液中，搅拌溶解，以3500rpm/min，离心10-15min，取上层清液，抽滤、透析、冷冻干燥，得到纯化微生物转谷氨酰胺酶粉末；

8、s5、取胶原蛋白1-2g、s3制备的庚酰化羟丁基壳聚糖1-2g、s4制备的纯化微生物转谷氨酰胺酶粉末0.1-0.2g，分别溶解于0.2mol/lna2hpo4/nah2po4缓冲溶液中，搅拌均匀后倒入三角烧瓶中，混合均匀，置于50-55℃油浴锅搅拌反应4-5h，升温至90℃，保持10min，冷却至室温，抽滤、透析、冷冻干燥得到胶原蛋白/复合材料。

9、优选地，在s1中，所述naoh在蒸馏水中的质量分数为50%；

10、优选地，在s1中，所述naoh与壳聚糖的质量比为1:1；

11、优选地，在s2中，所述碱化壳聚糖在异丙醇中的质量分数为20-30%；

12、优选地，在s2中，所述异丙醇与蒸馏水的体积比为1:1；

13、优选地，在s3中，所述羟丁基壳聚糖在蒸馏水中的质量分数为1-2%；

14、优选地，在s3中，所述蒸馏水与无水甲醇的体积比为1:1；

15、优选地，在s4中，所述微生物转谷氨酰胺酶在缓冲溶液中的质量分数为2-4%；

16、优选地，在s5中，所述胶原蛋白在缓冲溶液中的质量分数为1%；

17、优选地，在s5中，所述胶原蛋白、庚酰化羟丁基壳聚糖和纯化微生物转谷氨酰胺酶粉末的质量比为1:1:0.1。

18、优选地，所述药物微乳的制备方法包括以下步骤：

19、（1）选取新鲜无枯萎的植物原料，洗净置于35-40℃烘箱内烘干后粉碎，过60目筛，得到混合物；

20、（2）将（1）所得的混合物分散于蒸馏水中，微波处理6-10min，水蒸汽蒸馏3-4h，用正已烷萃取上层馏出液，取正己烷相干燥，冷冻，滤除固体，减压蒸发，得到植物精油；

21、（3）称取助乳剂1,2-丙二醇-hp（1:1）、乳化剂op-10，加入到（2）所制备的植物精油中，搅拌下，加入苦参碱、白藜芦醇，磁力搅拌，超声溶解至形成均一、透明的微乳，即为药物微乳。

22、优选地，在步骤（1）中，所述植物原料包括如下，雪莲20-30份、人参15-20份、蛇床子10-15份、天麻10-15份；

23、优选地，在步骤（1）中，所述混合物与蒸馏水的料液比为1:15-20；

24、优选地，在步骤（2）中，所述微波处理的功率为350-450w；

25、优选地，在步骤（2）中，所述正已烷与馏出液的体积比为1:1；

26、优选地，在步骤（3）中，所述助乳剂、乳化剂和植物精油的质量比为2.5-3:1:1；

27、优选地，在步骤（3）中，所述植物精油与白藜芦醇、苦参碱的质量比为1:1:1-1.5。

28、本发明还提供了一种女性妇科用胶原蛋白修复凝胶的制备方法，具体包括如下步骤：

29、取胶原蛋白/壳聚糖复合材料加入含有蒸馏水的血清瓶中，加入药物微乳，室温下400r/min搅拌4h，置于冰水中30min，加入β-甘油磷酸钠溶液，所述β-甘油磷酸钠溶液的浓度为40%w/v，加入促渗剂，冰水浴下磁力搅拌15min，得到女性妇科用胶原蛋白修复凝胶。

30、本发明取得的有益效果如下：

31、本发明中加入的药基具有以下功效：天麻中含有天麻苷及天麻多糖，具有抗炎及广谱抗真菌作用，此外天麻中还含有一种天麻抗真菌蛋白，能够有效抑制真菌生长，这种蛋白在抵御真菌侵染的防卫机制中起到关键作用；雪莲富含丰富的蛋白质和氨基酸，可以有效调节人体的酸碱度，具有通经活血和排毒等功效，可以增强人体免疫力，改善女性妇科疾病；蛇床子是伞形科植物蛇床的干燥成熟果实，具有燥湿祛风、杀虫止痒等功效，对治疗阴部瘙痒及滴虫性阴道炎作用较强；白藜芦醇具有抗炎、抗氧化、抗动脉粥样硬化和抗血管生成等药理作用，可以诱导阴道毛滴虫氢化酶体代谢发生改变，导致氢化酶体的严重功能障碍，影响滴虫的能量代谢，抑制虫体生长，达到治疗阴道炎的作用；苦参碱是由豆科植物苦参的干燥根、植株、果实经乙醇等有机溶剂提取制成，具有广泛的生物活性，如抗菌、抗病毒、抗氧化、抗炎作用，对霉菌性和滴虫性阴道炎等方面具有良好的疗效；

32、本发明提出从植物中提取具有抗炎抑菌功效的植物活性成分，与对阴道炎有较好效果的白藜芦醇和苦参碱复配，以此为药基制备成药物微乳，保证活性药物的稳定性，同时以胶原蛋白/壳聚糖复合材料作为凝胶基质，制备成温敏性凝胶，以液体给药形式进入阴道，并迅速形成薄凝胶层，进而使载药基质与多褶皱阴道黏膜组织紧密结合，提高了药物的粘附及吸收，并减少药物在阴道腔内的渗漏；胶原蛋白是生物体内重要的结构蛋白，具有一定的凝聚性能，可修复人体表皮成纤维细胞，是修复伤口愈合的重要功能性蛋白，但作为生物材料，也存在降解过快、热变性温度低、机械强度差等问题，限制其应用，壳聚糖具有良好的物理化学性能，可以与胶原蛋白形成复合材料以弥补胶原蛋白的缺陷，同时对壳聚糖进行羟丁基改性，能够改善壳聚糖不溶于水等性能，在此基础上的庚酰化改性，使其具有微孔结构，溶胀性能和生物降解性，对药物能起到缓释作用；将药物活性物质制备成微乳，并包覆与凝胶中，解决了药物递送时存在的稳定性及力学性能较差，难以达到药物缓释效果的问题，使其能以液体给药形式进入阴道，并迅速形成薄凝胶层，进而使载药基质与多褶皱阴道黏膜组织紧密结合，提高了药物的粘附及吸收，并减少药物在阴道腔内的渗漏。