GLP1多肽药物冻干闪释片及其制备方法与流程

本发明涉及药物制剂领域，特别涉及glp1多肽药物冻干闪释片及其制备方法。

背景技术：

1、胰高血糖素样肽(glp1)广泛应用于二型糖尿病与重度肥胖治疗，患者长期通过注射给药。尽管创新的glp1药物不断迭代，目前仍然很难扭转一个痛苦的现实：患者需要终生持续通过注射给药。诺和诺德公司的口服索马鲁肽/司美格鲁肽(semaglutide)产品上市后，虽然首次实现了glp1类药物的口服给药，但其口服生物利用度仍然较低（仅1%）。且该药物成本高，患者需要每日服用，经济负担较重。因此，在二型糖尿病与重度肥胖治疗领域，缺少一种可以低成本、高效率口服递送glp1药物的技术。

2、牛奶细胞外囊泡(mev)是一种可从牛奶中大量提取的由磷脂双分子膜形成的生物纳米颗粒。它的天然功能包括从母体（母牛）向后代（牛犊）的胃肠道递送生物活性分子（蛋白质、小核酸等）。已有研究证实mev可耐受消化道内消化酶、低ph等环境因素的破坏，通过消化道吸收进入血液循环。由于牛奶的广泛食用基础，大多数人群对mev的长期暴露（通过饮用牛奶）决定了mev的人体口服应用是安全、可耐受的。因此，mev近年来作为一种潜在的口服药物递送载体受到较多关注。

3、此前的技术中，不乏以mev装载小分子药物的先例。前期研究中，虽然装载glp1（利拉鲁肽liraglutide）的mev经口腔给药后可由舌下静脉丛吸收进入血液循环。但到目前为止，针对装载glp1的mev口腔给药与舌下吸收没有成熟的口服固体剂型。一些现有技术中，制备获得的是装载利拉鲁肽的mev的溶液制剂，然而尽管mev的溶液稳定性相较于其它类型的细胞外囊泡(ev)有显著提升，但mev在高浓度溶液中如何保持稳定仍然是一个待解决的技术问题。mev纳米颗粒的溶液浓度在超过1×1012p/ml后，其聚集、融合、容器壁吸附等问题就凸显出来。另外一些方案中，虽然制备获得了冻干舌下片，但为了维持mev在冻干过程中的活性，需要添加较大量甘露醇或微晶纤维素，若实现压片则过于紧实从而导致口腔崩解释放困难。并且，冻干粉体积增加过度，在临床拟用剂量下含服困难较大。

4、适宜的冻干固体制剂的单片溶液体积通常不大，在1毫升以下，而mev口腔吸收的临床拟用剂量在1013颗粒甚至更高。因此需要一种可达到1×1013p/ml甚至更高浓度的mev原液浓缩工艺及与之配套的稳定剂配方。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供药物浓度高、溶出效率高、利于口腔舌下吸收的glp1多肽药物冻干闪释片及其制备方法。

2、本发明提供了glp1多肽药物冻干口崩片，其包含如下质量百分数的原料：30%~50%glp1多肽-mev原液、0.1%~1.0%表面活性剂、3%~5%骨架剂、1%~3%粘合剂、0.01%~1%助悬剂，余量为水；

3、所述表面活性剂选自泊洛沙姆188。

4、进一步的，所述骨架剂选自甘露醇、海藻糖中的一种；优选的，所述骨架剂为海藻糖。

5、进一步的，所述粘合剂选自普鲁兰多糖、明胶中的一种；优选的，所述粘合剂为普鲁兰多糖。

6、进一步的，所述助悬剂选自普鲁兰多糖、黄原胶中的一种；优选的，所述助悬剂为黄原胶。

7、进一步的，所述glp1多肽-mev原液的制备原料中：每毫克glp1多肽，加入0~1.2mg辅料和1×1010~1×1013 mev颗粒。

8、所述辅料选自多聚赖氨酸，鱼精蛋白，多聚精氨酸，岩藻糖或甘露醇中的一种，优选的，所述辅料为多聚精氨酸。

9、一些实施例中，本发明提供的glp1多肽药物冻干口崩片中包含如下质量百分数的原料： 50%glp1多肽-mev原液、0.2%表面活性剂、3%骨架剂、2%粘合剂、0.1%助悬剂，余量为水。在本发明实施例中，所述原料的质量分数以冻干前质量计算。

10、本发明提供的舌下片中，包括表面活性剂在内的辅料例如骨架剂、粘合剂或助悬剂的选择都合理，从而使制得的舌下片具有更优秀的崩解效果和舌下吸收效率。前期实验表明，相对于其他辅料的选择，泊洛沙姆188、海藻糖、普鲁兰多糖、黄原胶的组合更有利于辅助glp1-mev更好的维持稳定性、提高口腔中的释放性能和舌下吸收效率。所述glp1多肽为利拉鲁肽、司美格鲁肽中的一种或多种。

11、一些实施例中，所述glp1多肽为利拉鲁肽，所述利拉鲁肽冻干口崩片中包含如下质量百分数的原料：30%~50% 利拉鲁肽-mev原液、0.1%~1.0% 泊洛沙姆188 、3%~5% 海藻糖、1%~3% 普鲁兰多糖、0.01%~1%黄原胶，余量为水。

12、具体实施例中，所述利拉鲁肽冻干口崩片中包含如下质量百分数的原料：50% 利拉鲁肽-mev原液、0.2% 泊洛沙姆188 、3% 海藻糖、2% 普鲁兰多糖、0.1%黄原胶，余量为水。

13、一些实施例中，所述glp1多肽为司美格鲁肽，所述司美格鲁肽冻干口崩片中包含如下质量百分数的原料：30%~50% 司美格鲁肽-mev原液、0.1%~1.0% 泊洛沙姆188 、3%~5%海藻糖、1%~3% 普鲁兰多糖、0.01~1%黄原胶、余量为水。

14、具体实施例中，所述司美格鲁肽冻干口崩片中包含如下质量百分数的原料：50%司美格鲁肽-mev原液、0.2% 泊洛沙姆188 、3% 海藻糖、2% 普鲁兰多糖、0.1%黄原胶，余量为水。

15、本发明还提供了如前所述的glp1多肽药物冻干口崩片的制备方法，包括如下步骤：

16、(1)glp1多肽向mev的装载，获得glp1多肽-mev原液；

17、(2)glp1多肽-mev原液经超滤浓缩后，获得浓缩液，

18、(3)取表面活性剂、骨架剂、粘合剂、助悬剂、甜味剂和矫味剂混合后，加入浓缩液，得到药液；

19、(4)将步骤（3）中的药液进行剪切；

20、(5)将步骤（4）中剪切后的药液进行脱气；

21、(6)将步骤（5）中脱气后的药液灌装至窝槽中；

22、(7)将灌装完的药液预冻；

23、(8)将预冻完成的药品冻干，设定初始温度为-30 ℃，具体冻干过程如下：

24、冷浸温度：≤-40 ℃；真空控制：≤200 ubar

25、板层温度：由-30 ℃升至-25 ℃，5分钟；维持-25℃，60分钟；由-25 ℃升至-15℃，10分钟；维持15 ℃，60分钟。由-15 ℃升至-5 ℃，10分钟；维持-5℃，60分钟；由-5 ℃升至10 ℃，25分钟；维持10 ℃，100分钟，由10 ℃升至25 ℃，15分钟；维持25 ℃，60分钟。

26、进一步的，所述glp1多肽向mev的装载包括：

27、将glp1多肽溶液与牛奶外泌体溶液混合后进行超声处理，

28、所述glp1多肽溶液中，溶剂为含有100 mm nacl 的20 mm tris缓冲液，ph值为8.0；

29、所述牛奶外泌体溶液中，溶剂为含有100 mm nacl 的20 mm tris缓冲液，以含有甘氨酸的na2co3/nahco3缓冲液调节ph值为7.0~10.0；

30、所述超声处理的条件包括：99%功率， 5℃，超声处理12h。

31、进一步的，所述glp1多肽-mev原液的超滤浓缩包括：

32、将glp1多肽-mev原液以含有peg3350的pbs缓冲液溶解后，利用截留分子量为750kda的中空纤维柱，浓缩至体积为原液的1/5（流速为405ml/min）。试验表明，该步骤的超滤浓缩对于提高药物的装载量具有重要的积极意义。本发明对超滤浓缩的参数进行优化，获得最优的效果，从而更进一步的提高装载效果。

33、进一步的，所述步骤（2）中的剪切在乳化机中；

34、进一步的，所述步骤（3）中的脱气在乳化机中或脱气瓶中。

35、进一步的，所述剪切的转速为 100-3000 rpm，所述剪切时间为3-20分钟；优选的，所述乳化机的转速为300 rpm，所述剪切时间为10分钟。

36、进一步的，所述预冻温度为-60到-80℃；优选的，所述预冻温度为-60℃。

37、进一步的，所述预冻时间为10-100分钟；优选的，所述预冻时间为30分钟。

38、本发明提供了一种glp1多肽药物冻干闪释片，该闪释片采用冷冻干燥技术制备，所得产品装载量大、溶出效果好、舌下吸收效率高。并且该闪释片的制备方法简便，易于实施。