山楂提取物在制备治疗癌痛药物中的应用的制作方法

本发明涉及山楂提取物的应用领域，具体而言，涉及山楂提取物在制备治疗癌痛药物中的应用。

背景技术：

1、近年来我国癌症发生率明显增加，而疼痛是癌症患者最常见和难以忍受的症状之一。初诊癌症患者的疼痛发生率约为25％，而晚期癌症患者的疼痛发生率可达60％-80％，其中1/3的患者为重度疼痛，会严重影响癌症患者的生活质量，因此在癌症治疗过程中镇痛具有重要作用。

2、随着姑息治疗学科的不断进步、发展，who三阶梯镇痛治疗原则和nccn成人癌痛指南已逐步被各级医师所掌握，80％～90％肿瘤患者的疼痛症状能够通过规范、有效的治疗得以缓解。但仍有10％～20％患者的疼痛属于难治性癌痛，常规的药物治疗几乎无效且易出现不能耐受的不良反应，是医生、患者共同面临的棘手问题。寻找更多有效的镇痛手段来丰富难治性癌痛成为了临床研究的重要方向。

3、现代药理学体外和体内试验表明，山楂具有具有降血脂、抗心肌、抗缺血、抗血栓、抗动脉粥样硬化、抗炎、助消化、抗高血压、抗肿瘤、抗抑郁、神经保护和降血糖等多种药理作用。can od等研究发现山楂果实提取物可以剂量依赖性增加小鼠对尾夹(机械刺激)和热板(热刺激)刺激的反应时间，减少扭体测试(化学刺激)中的扭体和伸展行为数量，证实山楂果实提取物对机械、热和化学伤害性神经通路有一定镇痛作用。

4、由于山楂中富含鞣酸，鞣酸能引起蛋白质与钙、镁结合聚集为沉淀物并容易形成‘胃石’，而且山楂中重金属含量偏高，过量食用存在安全隐患；因此通常山楂的摄入量不宜超过50g/人/天，在中药配方中山楂用量一般也不超过10g。

技术实现思路

1、本发明提供了山楂提取物在制备治疗癌痛药物中的应用。

2、优选的，所述癌痛为难治性癌痛。优选的所述难治性癌痛由乳腺癌、胰腺癌、甲状腺癌、鼻咽癌、前列腺癌、肝癌、肺癌、肠癌、口腔癌、食道癌、胃癌、喉癌、睾丸癌、阴道癌、子宫癌、卵巢癌中的一种引起的。

3、优选的，所述药物的活性成分为山楂提取物，所述山楂提取物包括0.21-0.25％总黄酮、11-14％％总三萜、2.0-2.5％总酚，所述山楂提取物中鞣酸的含量不高于2.5％，重金属含量不高于1.6mg/kg。

4、优选的，所述山楂提取物包括0.22-0.24％总黄酮、12.5-13.5％总三萜、2.1-2.4％总酚，所述山楂提取物中鞣酸的含量不高于2.3％。优选的，所述山楂提取物包括0.22-0.23％总黄酮、12.8-13.2％总三萜、2.2-2.3％总酚，所述山楂提取物中鞣酸的含量不高于2.2％。

5、优选的，所述山楂提取物中总黄酮与鞣酸的含量之比不低于1:10。优选的，所述山楂提取物溶解于超纯水体系中的平均粒径为103.18nm。

6、优选的，所述山楂提取物中砷的含量不高于0.06mg/kg，铅的含量不高于0.16mg/kg，汞的含量不高于0.05mg/kg。优选的，所述山楂提取物中砷的含量不高于0.04mg/kg，铅的含量不高于0.07mg/kg，汞的含量不高于0.01mg/kg。

7、优选的，所述山楂提取物的制备方法包括：s1、将山楂果进行预处理得到初级山楂液；s2、初级山楂液进行微生物发酵，获取发酵上清液；s3、利用弱碱阴离子交换树脂柱、弱极性大孔吸附树脂柱、阳离子交换树脂、色谱层析柱进行纯化；s4、浓缩干燥。

8、优选的，步骤s3中所述弱碱阴离子交换树脂柱的型号为lx6702、lx6702、lx67中的一种，所述弱极性大孔吸附树脂柱的型号为ab-8，所述阳离子交换树脂纯化的型号为lsc-200、lsc-as、lcs-400中的至少一种，所述色谱层析柱的型号为lxb2000或lxb-20ss。优选的，所述弱碱阴离子交换树脂柱、弱极性大孔吸附树脂柱的容量比为1：3-5。

9、优选的，步骤s3包括：

10、s31、将发酵上清液用0.5μm孔径的陶瓷膜过滤，滤液以1.5-3.0bv/h的流速上弱碱阴离子交换树脂柱进行过饱和吸附；流出液以1.5-2.5bv/h的流速上弱极性大孔吸附树脂柱，水洗至无色且ph值为7-8，用70％乙醇以0.5-0.7bv/h洗脱并收集洗脱液；

11、在上柱前期鞣酸及部分活性成分被吸附至弱碱阴离子交树脂柱，其中对鞣酸的吸附能力强于活性物质，因此当处于过饱和吸附状态时鞣酸可代替活性物质被吸附，而活性物质则随流出液流出，可尽可能保留活性成分而降低鞣酸的量；之后将流出液上大孔吸附树脂柱，此时大部分重金属离子在上柱过程中随流出液流出，再用去离子水水洗至流出液ph值为7～8，则大部分残留树脂间隙中的重金属会被洗掉。

12、s32、将洗脱混合液以1.2-2.0bv/h的流速上串联设置的阳离子交换树脂柱，之后水洗至无醇味，收集流出液及水洗液。

13、醇水溶液洗脱后，洗脱液中还会残留少量重金属，醇相直接上阳离子交换树脂，重金属离子会被阳离子交换树脂交换吸附，而活性成分处于醇相中基本不会被阳离子交换树脂所交换吸附，从而起着良好的脱除重金属的效果。

14、s33、将收集的流出液及水洗液真空减压浓缩至无醇味，加入磷酸调ph至3.4-3.6；按照8-12％柱体积进行上层析柱，洗脱并收集除单宁酸外的其他流出液。

15、经处理后的流出液减压浓缩至几乎无醇味，此时成分相对于初始的发酵上清液而言较为单一，通过色谱层析柱能够将残余的单宁酸分离并去除，合并其他流出液以进行后续处理。通过上述方法能够有效去除单宁酸及重金属，最大程度保留山楂中的活性成分，使大剂量口服成为可能。

16、优选的，步骤s1包括：挑选优质山楂果进行洗涤后投入破碎机中进行破碎，将山楂碎块中按照100g:200-400ml分别加入去离子水，加热至60-80℃保温10-30min；降温至35-45℃后按照100g：0.01-0.05g加入果胶酶，保温加热2.0-3.5h后固液分离，收集初级山楂液。

17、优选的，步骤s2为：将初级山楂液经巴斯德灭菌后接种4-6％巴斯德毕赤氏酵母，发酵培养23-27h，固液分离后收集发酵上清液。通过发酵能够大幅去除山楂中的糖类、果胶等成分

18、巴斯德毕赤酵母有很好的耐酸性，对生长培养条件要求很低；作为菌种利用初级山楂汁进行发酵，可最大限度消耗掉山楂汁中的单糖、寡糖、多糖、等成分，而其中的总黄酮、总酚酸类成分几乎没有减少，有利于山楂提取物中活性成分含量的大幅提高，使最终约1克山楂提取物等同于约390克山楂。

19、优选的，步骤s4为：收集的流出液在50-65℃下、真空压力-0.07～-0.095mpa下浓缩至固含量为18-25％，干燥得山楂提取物。通过上述工艺处理后得到的山楂提取物本身以纳米晶体形式存在，溶解于超纯水体系中的平均平均粒径为103.18nm，比单独的活性成分具有更高的生物利用度。

20、优选的，所述山楂提取物制为适合临床使用的片剂，其给药剂量为10-60片/天，片剂规格为0.8g/片。

21、本发明还提供了一种药物制剂，以山楂提取物为活性成分。

22、相对于现有技术，本发明所制备的山楂提取物中黄酮类、总酚、总三萜等活性成分的含量显著高于山楂果，同时其中的鞣酸、重金属含量低至理想水平，可以大量、长期服用而没有毒副作用，大大强化了山楂对人体的有效作用，表现出明显的保健和医疗效果；研究发现山楂提取物本身以纳米晶体形式存在，比单独的活性成分的生物利用度更高；每次服用10片山楂提取物相当于食用3120g的山楂果能对癌痛尤其是难治性癌痛产生缓解甚至治疗作用。