一种抗衰老美白保湿组合物及其制备方法与流程

本发明涉及化妆品，具体涉及一种抗衰老美白保湿组合物及其制备方法。

背景技术：

1、皮肤屏障功能是指表皮尤其是角质层的物理性屏障作用。通常是由皮脂膜、角质层角蛋白、脂质形成的砖墙结构以及真皮粘多糖类、粘多糖类等共同组成,健康的皮肤屏障能够抵御外界有害物、刺激物和日光侵害皮肤,同时具有保湿及调节作用。然而，由于环境、饮食和错误的皮肤护理等原因，皮肤屏障容易受损，使得皮肤自身防御能力不足，导致皮肤敏感、老化、干燥、脱屑等皮肤问题。因此，维持、修复皮肤屏障功能不仅有助于改善皮肤状态，还能够预防、治疗皮肤疾病。研究开发一种新的具有修复皮肤屏障作用的产品，具有重要意义。

2、经研究证明皮肤的屏障功能与皮肤脂类有关。皮肤屏障功能与其脂类有密切关系,皮肤脂类可调节皮肤屏障功能。皮肤脂质含量减少,会导致皮肤屏障功能的下降。同时经研究证明，皮肤角质层中的神经酰胺在屏障功能的调控中起主导性的作用。可与其他脂质形成有序的复层板层结构，在皮肤对水的通透屏障功能中起重要的作用。同时神经酰胺具有多样性，在角质层结构及凝聚中具有独特的性能。另外脂质间的游离脂肪酸和天然保湿因子(如透明质酸)在皮肤屏障中也起到重要作用。因此，开发能够更好的修复皮肤屏障的制剂，同时制剂能兼容多种神经酰胺以及皮肤内源性物质，已成为现今需要解决的问题。

3、随着年龄的增加，皮肤中神经酰胺的流失逐渐加大，尤以神经酰胺3流失最快。因此，神经酰胺在优秀的修复皮肤屏障的制剂中是不可或缺的成分，但是其对制剂的稳定性存在很大的威胁，若加入不当将会出现针状或线状的重结晶现象。同时，其他内源性修复成分的选择也能起到至关重要的作用。

4、中国专利申请cn1679470a《用于化妆品的海藻糖和透明质酸钠组合物及其制备方法》公开了一种可用于化妆品的海藻糖和透明质酸钠的组合物，且仅说明该组合物具有补水保湿的作用，该组合物的最佳使用比例，何种分子量的透明质酸钠效果更好以及该组合物的其他作用均未公开。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提出一种抗衰老美白保湿组合物及其制备方法，具有很好的抗氧化、美白、抗炎、抗敏的作用，具有防止光老化、抑制酪氨酸酶活性，促进皮肤弹性，减少皱纹，增加角质层中的神经酰胺含量，对受损皮肤屏障具有修复作用，具有广阔的应用前景。

2、本发明的技术方案是这样实现的：

3、本发明提供一种抗衰老美白保湿组合物的制备方法，将铁皮石斛、燕麦、沙棘经破壁处理后，蛋白酶酶解，过滤，固体留用，滤液加入锌盐和钙盐，制得蛋白肽-氨基酸螯合zn-ca复合物；将固体与银耳、人参混合，沸水提取，过滤，得到第一固体留用，醇沉，得到复合多糖，甘草经过超临界流体萃取获得甘草精油，固体与第一固体混合，接种酿酒酵母菌和地衣芽孢杆菌发酵，过滤，滤液经过离子液体萃取纯化，正己烷反萃取，干燥，得到活性提取物，与蛋白肽-氨基酸螯合zn-ca复合物、复合多糖、甘草精油、透明质酸钠、烟酰胺、胜肽混合均匀制得抗衰老美白保湿组合物。

4、作为本发明的进一步改进，包括以下步骤：

5、s1.破壁处理：将铁皮石斛、燕麦、沙棘洗净，加水匀浆，反复冻融，获得冻融液，加入复合酶酶解，灭酶，过滤，固体干燥，留用，滤液为提取液；

6、s2.蛋白肽酶解：向步骤s1中提取液中加入复合蛋白酶，酶解，灭酶，冷冻干燥，制得蛋白肽-氨基酸混合物；

7、s3.金属离子的螯合：将可溶性锌盐和可溶性钙盐溶于水中，加入步骤s2制得的蛋白肽-氨基酸混合物，搅拌反应，制得蛋白肽-氨基酸螯合zn-ca复合物；

8、s4.多糖的提取：将银耳、人参洗净，与步骤s1中的固体混合加入水中，加热至沸提取，过滤，滤渣干燥，留用，获得第一固体，滤液冷却加入乙醇沉淀，离心收集获得第二固体，第二固体干燥为复合多糖，上清液留用；

9、s5.精油的提取：将甘草洗净，干燥，粉碎，经过超临界流体萃取，制得甘草精油，固体干燥，留用；

10、s6.发酵：将步骤s4中的第一固体、步骤s5中的固体混合加入水中，灭菌，接种酿酒酵母菌和地衣芽孢杆菌菌种种子液，发酵培养，过滤，收集滤液；

11、s7.萃取纯化：将步骤s6制得的滤液、步骤s4中的上清液混合，加入离子液体萃取剂，加热振荡萃取，静置，收集离子液体层；

12、s8.反萃取：将步骤s7中的离子液体层与正己烷混合均匀，加热振荡反萃取，静置，收集有机层，减压除去正己烷，获得活性提取物；

13、s9.添加剂的制备：将透明质酸钠、烟酰胺、胜肽混合均匀，制得添加剂；

14、s10.抗衰老美白保湿组合物的制备：将步骤s3制得的蛋白肽-氨基酸螯合zn-ca复合物、步骤s4制得的复合多糖、步骤s5制得的甘草精油、步骤s8制得的活性提取物、步骤s9制得的添加剂混合均匀，制得抗衰老美白保湿组合物。

15、作为本发明的进一步改进，步骤s1中所述铁皮石斛、燕麦、沙棘的质量比为10-12:7-10:8-14，所述反复冻融的方法为将匀浆液在-20至-25℃条件下冷冻2-4h后，室温融解，重复操作2-3次，所述复合酶的添加量为冻融液的1-2wt％，所述复合酶选自纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、淀粉酶中的至少两种，所述酶解的温度为45-50℃，时间为1-3h；步骤s2中所述复合蛋白酶的添加量为提取液的2-3wt％，所述复合蛋白酶选自无花果蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶中的至少两种，所述酶解的温度为35-40℃，时间为2-4h。

16、作为本发明的进一步改进，所述复合酶为纤维素酶和果胶酶，质量比为5-7:1-2；所述复合蛋白酶为木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶，质量比为3-5:5-7。

17、作为本发明的进一步改进，步骤s3中所述可溶性锌盐、可溶性钙盐、蛋白肽-氨基酸混合物的质量比为3-5:5-7:50，所述可溶性锌盐选自氯化锌、硫酸锌、硝酸锌、葡萄糖酸锌、柠檬酸锌中的至少一种，所述可溶性钙盐选自氯化钙、硝酸钙、葡萄糖酸钙中的至少一种，所述搅拌反应的时间为20-30min；步骤s4中所述银耳、人参、固体和水的质量比为7-10:1-2:10-12:200-300，所述加热至沸提取的时间为2-4h，所述加入乙醇至体系乙醇含量为75-85wt％，沉淀时间为5-7h。

18、作为本发明的进一步改进，步骤s5中所述超临界流体萃取的条件为：萃取压力：25-30mpa，萃取温度：35-40℃，co2流量：7-12l/h，萃取时间：2-3h；步骤s6中所述第一固体、步骤s5中的固体和水的质量比为7-10:5-7:200-250，所述酿酒酵母菌和地衣芽孢杆菌菌种种子液的接种量分别为2-4v/v％和1-3v/v％，所述菌种种子液的含菌量为108-109cfu/ml，所述发酵培养的条件为45-50℃，70-100r/min，发酵培养48-56h。

19、作为本发明的进一步改进，步骤s7中所述步骤s6制得的滤液、步骤s4中的上清液和离子液体萃取剂的质量比为10-15:5-7:30-40，所述离子液体萃取剂为咪唑类离子液体，选自[bmim]cl、[bmim]meco2、[bmim]etco2、[bmim]bf4、[bmim]pf6中的至少一种，所述加热振荡萃取的温度为35-40℃，时间为2-4h；步骤s8中所述离子液体层与正己烷的质量比为15-20:25-30，所述加热振荡反萃取的温度为40-45℃，时间为1-2h。

20、作为本发明的进一步改进，步骤s9中所述透明质酸钠、烟酰胺、胜肽的质量比为5-7:1-2:0.5-1；步骤s10中所述蛋白肽-氨基酸螯合zn-ca复合物、复合多糖、甘草精油、活性提取物、添加剂的质量比为7-10:10-14:3-5:10-15:2-4。

21、作为本发明的进一步改进，具体包括以下步骤：

22、s1.破壁处理：将10-12重量份铁皮石斛、7-10重量份燕麦、8-14重量份沙棘洗净，加200重量份水，匀浆，反复冻融，获得冻融液，加入复合酶，所述复合酶的添加量为冻融液的1-2wt％，45-50℃酶解1-3h，灭酶，过滤，固体干燥，留用，滤液为提取液；

23、所述反复冻融的方法为将匀浆液在-20至-25℃条件下冷冻2-4h后，室温融解，重复操作2-3次；

24、所述复合酶为纤维素酶和果胶酶，质量比为5-7:1-2；

25、s2.蛋白肽酶解：向步骤s1中提取液中加入复合蛋白酶，所述复合蛋白酶的添加量为提取液的2-3wt％，35-40℃酶解2-4h，灭酶，冷冻干燥，制得蛋白肽-氨基酸混合物；

26、所述复合蛋白酶为木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶，质量比为3-5:5-7；

27、s3.金属离子的螯合：将3-5重量份可溶性锌盐和5-7重量份可溶性钙盐溶于300重量份水中，加入50重量份步骤s2制得的蛋白肽-氨基酸混合物，搅拌反应20-30min，制得蛋白肽-氨基酸螯合zn-ca复合物；

28、s4.多糖的提取：将7-10重量份银耳、1-2重量份人参洗净，与10-12重量份步骤s1中的固体混合加入200-300重量份水中，加热至沸提取2-4h，过滤，滤渣干燥，留用，获得第一固体，滤液冷却加入乙醇至体系乙醇含量为75-85wt％，沉淀5-7h，离心收集获得第二固体，第二固体干燥为复合多糖，上清液留用；

29、s5.精油的提取：将甘草洗净，干燥，粉碎，经过超临界流体萃取，制得甘草精油，固体干燥，留用；

30、所述超临界流体萃取的条件为：萃取压力：25-30mpa，萃取温度：35-40℃，co2流量：7-12l/h，萃取时间：2-3h；

31、s6.发酵：将7-10重量份步骤s4中的第一固体、5-7重量份步骤s5中的固体混合加入200-250重量份水中，灭菌，接种酿酒酵母菌和地衣芽孢杆菌菌种种子液，所述酿酒酵母菌和地衣芽孢杆菌菌种种子液的接种量分别为2-4v/v％和1-3v/v％，45-50℃，70-100r/min，发酵培养48-56h，过滤，收集滤液；

32、s7.萃取纯化：将10-15重量份步骤s6制得的滤液、5-7重量份步骤s4中的上清液混合，加入30-40重量份离子液体萃取剂，加热至35-40℃，振荡萃取2-4h，静置，收集离子液体层；

33、s8.反萃取：将15-20重量份步骤s7中的离子液体层与25-30重量份正己烷混合均匀，加热至40-45℃，振荡反萃取1-2h，静置，收集有机层，减压除去正己烷，获得活性提取物；

34、s9.添加剂的制备：将5-7重量份透明质酸钠、1-2重量份烟酰胺、0.5-1重量份胜肽混合均匀，制得添加剂；

35、s10.抗衰老美白保湿组合物的制备：将7-10重量份步骤s3制得的蛋白肽-氨基酸螯合zn-ca复合物、10-14重量份步骤s4制得的复合多糖、3-5重量份步骤s5制得的甘草精油、10-15重量份步骤s8制得的活性提取物、2-4重量份步骤s9制得的添加剂混合均匀，制得抗衰老美白保湿组合物。

36、本发明进一步保护一种上述的制备方法制得的抗衰老美白保湿组合物。

37、本发明具有如下有益效果：

38、铁皮石斛含有丰富的多糖、抗氧化物质(如维生素c、维生素e、类胡萝卜素和多酚类化合物)、氨基酸等，其中，铁皮石斛多糖具有保湿和保护皮肤屏障的能力，可以提供皮肤的滋润和保湿效果，有助于皮肤的柔软和光滑；抗氧化物质可以帮助减少自由基的损害，有助于抵抗皮肤老化和环境因素对皮肤的损害。

39、燕麦中含有丰富的蛋白质和多糖类物质，其中燕麦多糖可以在皮肤表面形成保护性膜，有助于锁住水分，防止水分蒸发，从而保持皮肤水分，使皮肤保持柔软和滋润，其中，β-葡聚糖和抗氧化剂，具有镇静和抗炎作用，有助于减轻皮肤炎症和红肿，蛋白质也是能够对皮肤蛋白的起到补给作用，维持皮肤稳态。

40、沙棘含有丰富的抗氧化物质维生素c和维生素e，有助于减少自由基的损害，促进胶原蛋白的生成，帮助皮肤保持弹性和光滑，保护皮肤免受环境因素如紫外线辐射的损害。沙棘中还含有油脂类成分脂肪酸，有助于维持皮肤的屏障功能，防止水分流失，从而保持皮肤柔软和水润。含有的多酚类化合物，如花青素和黄酮类化合物，有助于减少皮肤炎症和氧化应激。含有的β-胡萝卜素和其他胡萝卜素，有助于改善皮肤的色彩和均匀肤色。含有的氨基酸是构建皮肤胶原蛋白质的基本单元，有助于维持皮肤的健康和弹性。

41、甘草中含有的甘草酸具有抗炎和抗氧化作用。它可以帮助减轻皮肤红肿和炎症，同时有助于平衡油脂分泌，对痤疮和其他皮肤问题有益；甘草甜素具有抗氧化和抗炎作用，可以帮助减轻皮肤敏感和红肿，同时有助于防止色素沉着，改善肤色；甘草中的其他化合物，如酚类、黄酮类、类黄酮和甘草甜素的同分异构体，可以协同作用，提供多种有益于皮肤的效果。另外，甘草精油具有镇静和抗炎作用，可以用于减轻皮肤不适和炎症。

42、人参中含有丰富的人参皂苷，具有抗氧化、抗炎和保湿作用，有助于减少皮肤受到自由基损害，减轻炎症和保持皮肤水分。含有多糖类化合物，提高皮肤免疫力、促进伤口愈合和保持肌肤弹性。另外，人参皮甙有助于增强皮肤的血液循环，使皮肤更有光泽和活力。人参中其他的活性成分还具有抗炎、抗氧化、美白等特点，可以减轻皮肤炎症，包括因紫外线辐射引起的炎症。

43、本发明将铁皮石斛、燕麦、沙棘经过反复冻融的方法结合复合酶酶解，在纤维素酶和果胶酶的协同酶解作用下，促进细胞壁破壁，使得大部分氨基酸、蛋白质溶出，将提取液经过蛋白酶酶解，在木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶的协同酶解作用下，将复杂结构蛋白质酶解为单链蛋白肽或小分子氨基酸，通过螯合作用与锌离子和钙离子螯合制得蛋白肽-氨基酸螯合zn-ca复合物。

44、其中，钙离子可能促进层状体分泌和角质细胞膜的形成，这种钙浓度梯度分布能调控表皮的增殖分化和表皮分层，钙能降低毛细血管通透性，有效缓解炎症水肿症状，可用于消炎抗过敏，对修复皮肤屏障功能具有重大意义。锌离子有助于加速伤口愈合，促进新细胞的生长和维持皮肤屏障功能，可以减轻皮肤炎症，特别是在痤疮治疗中有用。可以促进胶原蛋白的形成，有助于减缓皮肤松弛和皱纹的产生。它们也具有抗氧化性质，可以减少自由基损害。蛋白肽或氨基酸螯合锌钙的稳定性好、水溶性好、吸收利用效率高、毒副作用小，可以减少组织液外渗，降低毛细血管通透性，缓解过敏症状，延缓皮肤松弛，减少自由基损害，具有抗炎消肿作用，起到很好的修复皮肤屏障的作用，两者协同作用，还具有很好的促进皮肤弹性，抑制酪氨酸酶活性，抑制丝氨酸蛋白酶对角质层桥粒蛋白的降解作用，提高角质层细胞间的黏合力的效果。

45、本发明将银耳、人参加入固体后，加热沸腾提取，乙醇沉淀，获得复合多糖，在皮肤表面形成一层均匀的薄膜，减少皮肤表面水分蒸发，为皮肤提供一个良好的保湿环境的同时抵御外界不良环境及细菌、致敏源的伤害，减少炎性反应，促进皮肤屏障功能的恢复，提高皮肤的耐受性，增高巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数，诱导产生白细胞介素-1，激活巨噬细胞，增强其细胞溶解性。而巨噬细胞作为皮肤组织修复的主要因素，能够分泌多种细胞因子促进皮肤的再次生长、胶原沉积、血管生成及毛囊再生。

46、甘草经过超临界流体萃取获得的甘草精油具有镇静和抗炎作用，可以用于减轻皮肤不适和炎症。

47、随后，本发明将固体物质进行酿酒酵母和地衣芽孢杆菌进行协同发酵，一方面，在发酵菌的作用下，人参中常见皂苷向稀有皂苷转化，另一方面，发酵产生的活性物质具有抗氧化、防止光老化、抑制酪氨酸酶活性，增加角质层中的神经酰胺含量，对受损皮肤屏障具有修复作用，且含有抗炎抗敏成分，有助于减少抗原进入皮肤的同时避免正常细胞产生变态反应，加快皮肤屏障自我修复速度。

48、但是，发酵液以及水提取过程中也获得了大量的其他非活性杂质，使得活性物质如黄酮、皂苷、三萜、多酚、甾醇等物质的含量下降，传统的提取溶剂存在溶剂消耗量大而传质慢、处理量小等问题，本发明采用离子液体，克服传统溶剂的缺点，萃取效率显著提高，反萃取干燥得到的活性提取物纯度大大提高，减少杂质的含量，从而大大提高了抗衰老美白保湿组合物的功效。

49、本发明制得的抗衰老美白保湿组合物具有很好的抗氧化、美白、抗炎、抗敏的作用，具有防止光老化、抑制酪氨酸酶活性，促进皮肤弹性，减少皱纹，增加角质层中的神经酰胺含量，对受损皮肤屏障具有修复作用，具有广阔的应用前景。