氨基二硫代甲酸酯类化合物或其药学上可接受的盐联合铜离子在制备抗肿瘤药物中的应用

本发明涉及抗肿瘤药物，尤其涉及氨基二硫代甲酸酯类化合物或其药学上可接受的盐联合铜离子在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术：

1、细胞死亡方式的异常调节与肿瘤疾病的发生发展密切相关。依据发生机制的不同，细胞死亡方式可分为细胞凋亡、焦亡、坏死和铁死亡等。2022年3月science杂志发表的论文中提出了一种新的细胞死亡方式—铜死亡(tsvetkov p.et al.copper induces celldeath by targeting lipoylated tca cycle proteins.science.2022mar 18；375(6586):1254-1261)。当生物体内不可缺少的铜离子在其浓度超过了维持稳态机制的阈值时会表现出细胞毒性，这种铜离子诱导的细胞死亡新机制被命名为铜死亡(cuproptosis)。cu2+可被铜离子载体运入细胞，当cu2+在依赖线粒体呼吸的细胞中过度积累，cu2+可与线粒体三羧酸循环中的硫辛酰化蛋白二氢硫辛酸转乙酰基酶(dlat)结合，诱导dlat的异聚化，不溶性dlat的增加导致细胞毒性诱导细胞死亡。另外铁氧还蛋白1(fdx1)作为蛋白质硫辛酰化修饰的上游调节因子，一方面参与调节蛋白质(包括dlat)的硫辛酰化，另一方面，fdx1将cu2+还原成更具毒性的cu+，导致fe-s簇蛋白合成的抑制，从而诱导细胞铜死亡(wangy.et al.cuproptosis:a new form ofprogrammed cell death.cell molimmunol.2022aug；19(8):867-868)。

2、相较于正常组织和细胞，肿瘤组织和细胞对于铜的需求更大，但当肿瘤细胞内铜过度积累则可以通过介导铜死亡来杀死肿瘤细胞。铜离子载体可将铜离子转移至细胞中诱发细胞铜死亡，因此靶向肿瘤的铜离子载体在癌症治疗中极具潜力(xie j.etal.cuproptosis:mechanisms and links with cancers.mol cancer.2023mar 7；22(1):46)。目前已有铜离子载体进入临床研究，如双硫仑。双硫仑是一种在临床上已使用六十多年的戒酒药，近年来越来越多的证据揭示双硫仑具有抗癌活性。研究发现双硫仑是一种铜离子载体，在超过3000人的研究样本中，长期服用双硫仑的患者比停止服用双硫仑的患者癌症死亡率降低了34％。按照临床分期分层显示，即使在晚期转移性患者中，持续使用双硫仑也能降低癌症的特异性死亡率(skrott z.et al.alcohol-abuse drug disulfiramtargets cancer via p97 segregase adaptor npl4.nature.2017dec 14；552(7684):194-199)。基于此，铜离子载体在肿瘤治疗中具有非常好的应用前景。但是，目前关于铜离子载体的报道非常少，亟需提供新的铜离子载体，促进铜死亡方式在肿瘤治疗中的应用。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明提供了氨基二硫代甲酸酯类化合物或其药学上可接受的盐联合铜离子在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明将氨基二硫代甲酸酯类化合物或其药学上可接受的盐与铜离子联合应用，氨基二硫代甲酸酯类化合物或其药学上可接受的盐作为铜离子的载体，能够协同铜离子强效抑制肿瘤细胞的增殖。

2、为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

3、氨基二硫代甲酸酯类化合物或其药学上可接受的盐联合铜离子在制备抗肿瘤药物中的应用，所述氨基二硫代甲酸酯类化合物的结构如式i所示：

4、

5、n为0～3的整数；

6、r为氢、c1-4烷基、c1-4烷氧基、卤素、c1-4卤代烷基、羟基、氰基、巯基、硝基或氨基；

7、r’和r”满足下述两种情形之一：(1)r’和r”各自独立地选自氢、烷基、卤代烷基、环烷基、烯基、炔基、芳基或芳烷基；或者(2)r’和r”连同二者所连接的n原子共同形成5-6元杂环或取代的5-6元杂环；所述5-6杂环选自吗啉基、硫吗啉基、噻唑烷基、噁唑基、异噁唑基、咪唑烷基、哌啶基或吡咯烷基；所述取代的5-6元杂环中的取代基选自烷基、烯基、炔基和苯基中的一种或多种；

8、r”’为氢、c1-4烷基、c1-4烷氧基、卤素、c1-4卤代烷基、羟基、氰基、巯基、硝基或氨基；

9、r1和r2满足下述两种情形之一：(1)r1和r2各自独立地选自氢、烷基、卤代烷基、环烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基所组成的组；或者(2)r1和r2连同二者所连接的n原子共同形成5-6元杂环或取代的5-6元杂环，所述5-6元杂环选自吗啉基、硫吗啉基、噻唑烷基、噁唑基、异噁唑基、咪唑烷基、哌啶基或吡咯烷基；所述取代的5-6元杂环中的取代基选自烷基、烯基、炔基和苯基中的一种或多种。

10、优选的，所述式i中：

11、n为0或1；

12、所述r为氢；

13、所述r’和r”满足下述两种情形之一：(1)r’和r”各自独立地选自氢、甲基、乙基、丙基、丁基、羟乙基、烯丙基、环己基、c1-4烷基取代或非取代的哌嗪基、c1-4烷基取代或非取代的哌啶基、c1-4烷基取代或非取代的苄基以及c1-4烷基取代或非取代的吡啶烷基；或者(2)r’和r”连同二者所连接的n原子共同形成吗啉基、硫吗啉基、2,6-二甲基吗啉基、噻唑烷基、甲基哌嗪基、异丙基哌嗪基、乙酰基哌嗪基、苯基哌嗪基、苄基哌嗪基、哌啶基或吡咯烷基；

14、所述r”’选自甲基、氢、二乙基硫代氨甲酰硫甲基、二丙基硫代氨甲酰硫甲基、吗啉-4-硫代氨甲酰硫甲基、哌啶-1-硫代氨甲酰硫甲基、二羟乙基硫代氨甲酰硫甲基、二甲基硫代氨甲酰硫甲基、吡咯烷-4-硫代氨甲酰硫甲基、噻唑烷-4-硫代氨甲酰硫甲基、二烯丙基氨基硫代氨甲酰硫甲基或硫吗啉-4-硫代氨甲酰硫甲基。

15、优选的，所述氨基二硫代甲酸酯类化合物为以下结构中的至少一种：

16、

17、

18、优选的，所述铜离子由能解离出cu2+的盐提供。

19、优选的，所述能解离出cu2+的盐包括氯化铜和硫酸铜中的一种或两种

20、优选的，所述肿瘤包括白血病、肺癌、黑色毒瘤、乳腺癌、结肠癌和宫颈癌中的一种或多种。

21、本发明还提供了一种药物组合物，包括氨基二硫代甲酸酯类化合物或其药学上可接受的盐以及铜离子。

22、优选的，所述括氨基二硫代甲酸酯类化合物或其药学上可接受的盐与铜离子的摩尔比为20:1-1:20。

23、优选的，还包括药学上可接受的辅料。

24、优选的，还包括其他抗肿瘤药物。

25、本发明提供了氨基二硫代甲酸酯类化合物或其药学上可接受的盐联合铜离子在制备抗肿瘤药物中的应用，所述氨基二硫代甲酸酯类化合物的结构如式i所示(见上文)。发明人通过大量研究发现，式i所示的氨基二硫代甲酸酯类化合物或其药学上可接受的盐具有协同铜离子诱发肿瘤细胞铜死亡进而强效抑制肿瘤细胞增殖的作用。本发明将氨基二硫代甲酸酯类化合物或其药学上可接受的盐与铜离子联合应用于抗肿瘤药物的制备中，具有广阔的应用前景。

26、肿瘤细胞实验证实，式i所示的氨基二硫代甲酸酯类化合物与铜离子存在协同抗肿瘤作用，并通过排除其它细胞死亡方式、电感耦合等离子体质谱icp-ms、qpcr等实验证实该类化合物为铜死亡诱导剂。在小鼠自发乳腺癌模型(mmtv-pymt)中，通化合物21联合铜离子可强效抑制肿瘤的生长，且药效显著强于化合物21单药和铜离子单药。