使用AAV2变体和阿柏西普治疗AMD的制作方法

背景技术：

1、阿柏西普(aflibercept)是一种重组融合蛋白，其充当血管内皮生长因子亚型a和b(vegf-a和vegf-b)和胎盘生长因子(pigf)的诱饵受体。通过与这些配体结合，阿柏西普能够阻止这些配体与血管内皮生长因子受体(vegfr)vegfr-1和vegfr-2结合，以抑制新生血管形成并降低血管通透性。阿柏西普由与igg1的fc片段融合的vegfr-1的结构域2和vegfr-2的结构域3构成。阿柏西普以商品名(阿柏西普)进行商业销售，其是一种眼用玻璃体内阿柏西普融合蛋白注射剂。

技术实现思路

1、尽管(阿柏西普)是目前在患者中治疗湿性amd的标准治疗，将阿柏西普递送到眼部中的基因治疗方法可以为患者提供改进的治疗选项，因为基因疗法可以提供延长的或持续的阿柏西普体内释放，而无需重复注射，重复注射可以在一些患者中增加炎症、感染和其他副作用的风险。此外，通过不需要重复注射，基因疗法解决了与需要重复注射的疗法相关的患者依从性和坚持性方面的挑战，因为不依从性可以导致视力丧失以及眼部疾病或病况的恶化。对需要重复或频繁前往医疗机构进行给药的治疗方案的不依从性和不坚持性的比例在受amd影响最大的老年患者中更高。因此，通过基因疗法将阿柏西普递送至患者的眼部中可以为患者提供更安全，可能更划算，和更方便的治疗选项，并且通过解决不依从性和不坚持性的问题而改善患者的结局。

2、本公开涉及通过玻璃体内或视网膜下施用药物组合物在灵长类或人类受试者中预防或治疗新生血管性(湿性)年龄相关的黄斑变性(amd)、视网膜静脉阻塞(rvo)后黄斑水肿、糖尿病性黄斑水肿(dme)、在dme患者中的糖尿病性视网膜病变(dr)、视网膜静脉阻塞以及相关的眼部疾病或病况的药物组合物和方法，所述药物组合物包含药学有效量的载体或病毒颗粒(例如，raav)，所述载体或病毒颗粒包含编码阿柏西普、其功能性片段或变体的核酸。

3、在一些方面中，本申请公开了一种治疗眼部病况或疾病的方法，所述方法包括：通过玻璃体内注射向有需要的灵长类受试者的眼部施用单位剂量的药物组合物，其中所述药物组合物包含：(a)raav2变体，所述raav2变体包含插入衣壳蛋白vp1的位置587和588之间的氨基酸序列lgettrp，以及编码多肽的核酸序列，所述多肽与阿柏西普、其功能性片段或变体具有至少80％同源性，以及(b)药学上可接受的赋形剂。在一些情况下，所述眼部病况或疾病是新生血管性(湿性)年龄相关的黄斑变性(amd)、视网膜静脉阻塞后黄斑水肿、糖尿病性黄斑水肿(dme)或者与dme相关的糖尿病性视网膜病变。在一些情况下，所述眼部病况或疾病是脉络膜新生血管形成或湿性amd。在一些情况下，所述单位剂量包括1e12至1e13的载体基因组。在一些情况下，所述单位剂量包括2e12至6e12的载体基因组。在一些情况下，所述单位剂量包括不超过100μl的体积。在一些情况下，所述单位剂量包括不超过50μl的体积。在一些情况下，所述受试者是非人灵长类。在一些情况下，所述受试者是人。在一些情况下，所述受试者对阿柏西普产生应答。在一些情况下，所述受试者已使用阿柏西普预治疗。在一些情况下，所述通过玻璃体内注射施用在至少2年内进行不超过1次。在一些情况下，所述通过玻璃体内注射施用在至少5年内进行不超过1次。在一些情况下，所述通过玻璃体内注射施用是一次性施用。在一些情况下，所述药物组合物是混悬液或冷藏的混悬液。在一些情况下，所述方法还包括在所述施用步骤之前搅拌所述混悬液以确保所述混悬液均匀分布。在一些情况下，所述方法还包括在所述施用步骤前将所述药物组合物加温至室温。

4、在其他方面中，一种药物组合物，所述药物组合物包含混悬液，所述混悬液进一步包含：raav2变体，所述raav2变体包含插入衣壳蛋白vp1的位置587和588之间的氨基酸序列lgettrp，以及编码多肽的核酸序列，所述多肽与阿柏西普、其功能性片段或变体具有至少80％同源性。在一些情况下，所述核酸序列包含seq id no:2的序列。在一些情况下，所述组合物的单位剂量包括1e12至1e13的载体基因组。在一些情况下，所述药物组合物的单位剂量包括2e12至6e12的载体基因组。在一些情况下，一种试剂盒，所述试剂盒包括混悬药物组合物和用于稀释所述药物组合物的溶液。在一些情况下，所述药物组合物包含不超过1ml。在一些情况下，所述药物组合物包含不超过0.5-1.0ml。在一些情况下，所述药物组合物包含小于或等于0.5ml。在一些情况下，在所述试剂盒中的所述溶液包含缓冲剂、盐、醇、表面活性剂或其任何组合。在一些情况下，所述试剂盒包括注射器。

5、在其他方面中，一种治疗眼部病况或疾病的方法，所述方法包括：搅拌冷藏的混悬液，所述混悬液包含：raav2变体，所述raav2变体包含插入衣壳蛋白vp1的位置587和588之间的氨基酸序列lgettrp，以及编码多肽的核酸序列，所述多肽与阿柏西普、其功能性片段或变体具有至少80％同源性；以及通过玻璃体内注射向人类受试者的眼部施用一定体积的所述冷藏的混悬液。在一些情况下，所述受试者的特征为已使用阿柏西普预治疗。在一些情况下，所述受试者对阿柏西普产生应答。在一些情况下，所述冷藏的混悬液包含不超过1ml的所述溶液。在一些情况下，所述冷藏的混悬液包含不超过0.5ml。在一些情况下，向所述受试者施用的所述体积不超过50μl。在一些情况下，向所述受试者施用的所述体积不超过100μl。在一些情况下，所述体积包括1e12至1e13的载体基因组的单位剂量。在一些情况下，所述体积包括2e12至6e12的载体基因组的单位剂量。在一些情况下，所述施用步骤在至少2年内进行不超过1次。在一些情况下，所述施用步骤是一次性注射。在一些情况下，所述方法还包括在施用所述组合物之前，测定所述受试者对阿柏西普的应答。在一些情况下，所述混悬液包含药学上可接受的赋形剂。在一些情况下，所述赋形剂包括表面活性剂或稳定剂。在一些情况下，所述表面活性剂选自聚山梨醇酯、十二烷基硫酸钠、月桂基硫酸钠、月桂基二甲基氧化胺、聚乙氧基化醇、聚氧乙烯山梨醇酐、辛苯酚聚醚(octoxynol)、brij、普朗尼克(pluronic)和聚氧乙烯蓖麻油(polyoxyl caster oil)。在一些情况下，所述药学上可接受的赋形剂包括苯酚、甘露醇、山梨醇或氯化钠。在一些情况下，所述眼部病况或疾病是新生血管性(湿性)年龄相关的黄斑变性(amd)、视网膜静脉阻塞后黄斑水肿、糖尿病性黄斑水肿(dme)或者与dme相关的糖尿病性视网膜病变。在一些情况下，所述眼部病况或疾病是脉络膜新生血管形成或湿性amd。在一些情况下，所述方法还包括在施用前将所述混悬液加温至室温。

6、通过引用并入

7、本说明书中提及的所有出版物、专利和专利申请均通过引用并入本申请，其程度如同每个单独的出版物、专利或专利申请特别地和单独地指明通过引用并入。

技术特征：

1.药物组合物在制备用于治疗眼部病况或疾病的药物中的用途，所述治疗包括通过玻璃体内注射向有需要的灵长类受试者的眼部施用单位剂量的所述药物组合物，其中所述药物组合物包含：

2.根据权利要求1所述的用途，其中所述眼部病况或疾病是新生血管性(湿性)年龄相关的黄斑变性(amd)、视网膜静脉阻塞后黄斑水肿、糖尿病性黄斑水肿(dme)或者与dme相关的糖尿病性视网膜病变。

3.根据权利要求1所述的用途，其中所述眼部病况或疾病是脉络膜新生血管形成或湿性amd。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的用途，其中由所述核酸编码的所述多肽包含与阿柏西普具有100％同源性的序列。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的用途，其中所述单位剂量是1e12至1e13的载体基因组。

6.根据权利要求1-4中任一项所述的用途，其中所述单位剂量是2e12至6e12的载体基因组。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的用途，其中所述单位剂量是不超过100μl的体积。

8.根据权利要求7所述的用途，其中所述单位剂量是不超过50μl的体积。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的用途，其中所述受试者是人。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的用途，其中所述受试者对阿柏西普产生应答。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的用途，其中所述受试者已使用阿柏西普预治疗。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的用途，其中所述通过玻璃体内注射施用在至少2年内进行不超过1次。

13.根据权利要求12所述的用途，其中所述通过玻璃体内注射施用在至少5年内进行不超过1次。

14.根据权利要求1-11中任一项所述的用途，其中所述通过玻璃体内注射施用是一次性施用。

15.根据权利要求1-14中任一项所述的用途，其中所述药物组合物是混悬液。

16.根据权利要求15所述的用途，其还包括在所述施用步骤之前搅拌所述混悬液以确保所述混悬液均匀分布。

17.根据权利要求1-16中任一项所述的用途，其还包括在所述施用步骤之前将所述药物组合物加温至室温。

技术总结
本公开提供了用于通过玻璃体内施用适于基因疗法的药物组合物在受试者中治疗年龄相关的黄斑变性(AMD)的药物组合物及其方法，所述药物组合物包含具有编码阿柏西普的核酸序列的载体。

技术研发人员：M·布鲁门克兰兹,M·盖斯米
受保护的技术使用者：阿德夫拉姆生物技术股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/2/19