一种用于修复DNA的同源细胞再生药物及其制备方法与流程

本发明涉及细胞再生药物，特别涉及一种用于修复dna的同源细胞再生药物及其制备方法。

背景技术：

1、周围神经损伤是目前临床上常见的创伤并发症.促进周围神经损伤后的再生，恢复其功能已日益成为研究的热点，目前周围神经修复的研究几乎涵盖了从基础研究到临床诊断治疗的所有领域；显微外科学的成熟和普及、组织工程学的兴起、干细胞生物学的深入研究，都大大促进了周围神经损伤修复研究；

2、本发明提出一种用于修复dna的同源细胞再生药物及其制备方法，利用维生素b1、维生素b12(甲钴胺)、谷维素、神经营养因子(ntfs)、神经营养素、碱性成纤维细胞生长因子、免疫抑制剂和中药组分的共同作用，达到神经细胞损伤同源细胞再生修复的效果。

技术实现思路

1、(一)解决的技术问题

2、针对现有技术的不足，本发明提供了一种用于修复dna的同源细胞再生药物及其制备方法。

3、(二)技术方案

4、为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：

5、一种用于修复dna的同源细胞再生药物，该同源细胞再生药物包括：维生素b1、维生素b12(甲钴胺)、谷维素、神经营养因子(ntfs)、神经营养素和碱性成纤维细胞生长因子；

6、神经营养素包括神经生长因子(nervegrowthfactorngf)、脑源性神经营养因子(brainderivedneurotrophicfactorbdnf)、神经营养素-3(neurotrophin-3，nt-3)、神经营养素-4/5(neurotrophin-4/5，nt-4/5)，以及源自非哺乳动物的神经营养素—6(neurotrophin-6，nt-6)和神经营养素-7；

7、该同源细胞再生药物还包括免疫抑制剂和中药组分。

8、本发明要解决的另一项技术问题是提供一种用于修复dna的同源细胞再生药物的制备方法，包括以下步骤：

9、s1：营养神经药物成分的制备；

10、s2：神经营养因子制备；

11、s3：神经营养素的制备；

12、s4：碱性成纤维细胞生长因子的制备；

13、s5：免疫抑制剂的制备；

14、s6：中药组分的制备；

15、s7：药物制备。

16、优选的：所述s1营养神经药物成分的制备采用微生物法合成维生素b1，包括以下步骤：

17、第一步：先分别合成密啶环和噻唑环结构后，再经酶反应聚合而成，丙氨酸与甲硫氨酸反应生成3-(4-甲基-5-噻唑啉基)丙氨酸；

18、第二步：经4-甲基-5-(b-羟乙基)噻唑单磷酸，由此噻唑环部分形成，咤啶环部分则由氨甲酰磷酸与b-甲基天冬氨酸聚合，形成n-氨甲酰-b甲基天冬氨酸；

19、第三步：转化为甲基二氢乳清酸后，经2-甲基-4-氨基-5-羟甲基密啶，由atp转化为单磷酸酯，再转化为焦磷酸酯；

20、第四步：噻唑环和密啶环两部分在硫胺单磷酸合成酶存在下缩合形成单磷酸硫胺素。

21、优选的：所述s1营养神经药物成分中维生素b12的制备包括以下步骤：

22、第一步：将维生素b12转化液以0.5bv/h的流速通过100ml装柱的288树脂柱进行吸附，吸附完成后以0.5bv/h的流速洗水；

23、第二步：用浓度为15％的330ml丙酮解析剂对吸附了维生素b12的树脂柱进行解析；

24、第三步：将上一步解析后的维生素b12净化液取出1000ml加入到旋转蒸发仪中进行控温浓缩，控温温度为65℃左右；

25、第四步：将步骤三浓缩后的维生素b12浓缩液以3bv/h通过900净化柱；

26、第五步：将步骤四净化后的维生素b12浓缩液再次加入到旋转蒸发仪进行控温浓缩，控温温度为65℃左右；

27、第六步：在步骤五中的净化液浓缩至58000ug/ml效价，取出维生素b12浓缩液加入结晶反应器内进行搅拌降温；

28、第七步：在步骤六降温到0℃，保持30min，进行抽滤得到湿晶。

29、优选的：所述s1营养神经药物成分中谷维素的制备包括以下步骤；

30、第一步：以超临界流体由含谷维素的原料中萃取出含谷维素萃取液；

31、第二步：由上述含谷维素萃取液中以固液分离方式分离出含谷维素沉淀物；

32、第三步：由上述含谷维素沉淀物中纯化出谷维素。

33、优选的：s2神经营养因子制备包括以下步骤；

34、第一步：通过计算机辅助设计，对人睫状神经营养因子的基因进行修饰改造，获得改造后突变人睫状神经营养因子基因的cdna；

35、第二步：人工合成该cdna，构建重组质粒，转化大肠杆菌，经全自动发酵罐高密度表达；

36、第三步：以切向流超滤方式进行复性，以离子交换层析、疏水层析和分子筛层析顺序组合纯化，生产得到高纯度的睫状神经营养因子。

37、优选的：免疫抑制剂采用甲基泼尼松龙。

38、优选的：中药组分由黄芪、当归、赤芍、地龙、川芎、红花和桃仁组成。

39、优选的：s7药物制备包括以下步骤：

40、第一步：将维生素b1、维生素b12(甲钴胺)、谷维素、神经营养因子(ntfs)、神经营养素、碱性成纤维细胞生长因子、免疫抑制剂和中药组分培养完成后，进行预处理；

41、第二步：预处理后药物进行分离和纯化后进行成品加工。

42、优选的：预处理过程包括加热和调ph，成品加工包括无菌过滤、超滤、冷冻干燥、喷雾干燥和结晶。

43、(三)有益效果

44、维生素b1、维生素b12(甲钴胺)和谷维素有调节间脑功能，改善植物神经功能失调、内分泌平衡失调、精神神经失调的作用，神经营养素加快轴突再生速度以促进周围神经再生，减缓失神经支配肌肉的萎缩，碱性成纤维细胞生长因子和免疫抑制剂对脑和脊髓损伤起保护作用，利用维生素b1、维生素b12(甲钴胺)、谷维素、神经营养因子(ntfs)、神经营养素、碱性成纤维细胞生长因子、免疫抑制剂和中药组分的共同作用，达到神经细胞损伤同源细胞再生修复的效果。

技术特征：

1.一种用于修复dna的同源细胞再生药物，其特征在于，该同源细胞再生药物包括：维生素b1、维生素b12(甲钴胺)、谷维素、神经营养因子(ntfs)、神经营养素和碱性成纤维细胞生长因子；

2.一种用于修复dna的同源细胞再生药物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

3.如权利要求2所述的一种用于修复dna的同源细胞再生药物的制备方法，其特征在于：所述s1营养神经药物成分的制备采用微生物法合成维生素b1，包括以下步骤：

4.如权利要求2所述的一种用于修复dna的同源细胞再生药物的制备方法，其特征在于：所述s1营养神经药物成分中维生素b12的制备包括以下步骤：

5.如权利要求2所述的一种用于修复dna的同源细胞再生药物的制备方法，其特征在于：所述s1营养神经药物成分中谷维素的制备包括以下步骤；

6.如权利要求2所述的一种用于修复dna的同源细胞再生药物的制备方法，其特征在于：s2神经营养因子制备包括以下步骤；

7.如权利要求2所述的一种用于修复dna的同源细胞再生药物的制备方法，其特征在于：免疫抑制剂采用甲基泼尼松龙。

8.如权利要求2所述的一种用于修复dna的同源细胞再生药物的制备方法，其特征在于：中药组分由黄芪、当归、赤芍、地龙、川芎、红花和桃仁组成。

9.如权利要求2所述的一种用于修复dna的同源细胞再生药物的制备方法，其特征在于：s7药物制备包括以下步骤：

10.如权利要求9所述的一种用于修复dna的同源细胞再生药物的制备方法，其特征在于：预处理过程包括加热和调ph，成品加工包括无菌过滤、超滤、冷冻干燥、喷雾干燥和结晶。

技术总结
本发明公开了一种用于修复DNA的同源细胞再生药物及其制备方法，涉及细胞再生药物技术领域，该一种用于修复DNA的同源细胞再生药物中，神经营养素包括神经生长因子(nervegrowthfactorNGF)、脑源性神经营养因子(brainderivedneurotrophicfactorBDNF)、神经营养素‑3(neurotrophin‑3，NT‑3)、神经营养素‑4/5(neurotrophin‑4/5，NT‑4/5)，以及源自非哺乳动物的神经营养素—6(neurotrophin‑6，NT‑6)和神经营养素‑7，维生素B1、维生素B12(甲钴胺)和谷维素有调节间脑功能，改善植物神经功能失调、内分泌平衡失调、精神神经失调的作用，神经营养素加快轴突再生速度以促进周围神经再生，减缓失神经支配肌肉的萎缩，碱性成纤维细胞生长因子和免疫抑制剂对脑和脊髓损伤起保护作用。

技术研发人员：郝建华
受保护的技术使用者：北京北美抗衰老医学研究院
技术研发日：
技术公布日：2024/4/7