四君子汤复方活性寡糖及其应用

本发明属于天然产物开发领域，涉及寡糖，具体涉及一种四君子汤复方中的活性寡糖及其在改善脾虚证方面的用途。

背景技术：

1、寡糖是单糖通过糖苷键连接而成的低聚合度(dp)碳水化合物，构成单元以五碳或六碳糖为主，包括葡萄糖(glucose)、果糖(fructose)、木糖(xylose)和甘露糖(mannose)等。研究表明，寡糖具有抗抑郁、抗氧化、调节血糖、调节免疫功能、调节肠道菌群等多种药理和生理活性。鉴于中药资源种类繁多及其广泛的药理活性，中药寡糖的研究具有重要意义和发展前景，且已取得一定的成果。如巴戟天寡糖能够通过调节5-ht水平和hpa轴功能改善小鼠的抑郁样行为，其巴戟天寡糖胶囊现已成为临床被推荐使用的抗抑郁中成药之一；地黄寡糖能够改善糖尿病和高血糖大鼠的糖代谢紊乱；牛蒡寡糖能够增强免疫低下小鼠的免疫功能，并促进正常小鼠脾脏组织分泌il-2和ifn-γ。

技术实现思路

1、本发明提出一种四君子汤复方中活性寡糖及其应用。从临床治疗脾虚证典方四君子汤复方中进行多次分离纯化后制备得到寡糖活性组分sjzd-ogs(sijunzi decoctionoligosaccharide)，具有显著的抗炎活性，可用于制备免疫调节的药物中；经体内动物实验证实，sjzd-ogs可改善脾虚证，可进一步开发临床治疗脾虚证的治疗药物；sjzd-ogs亦可调节肠道菌群及其代谢产物短链脂肪酸(scfas)，可进一步开发调节菌群的药物。

2、本发明是通过以下技术方案实现的:

3、本发明涉及一种从四君子汤复方中分离得到的具有活性寡糖组分(sjzd-ogs)，其有效成分，即蔗果低聚糖的质量百分比为44.35％，具体包括：蔗果三糖5.06％、耐斯糖4.83％、蔗果五糖6.10％、蔗果六糖7.45％、蔗果七糖7.33％、蔗果八糖6.95％以及蔗果九糖6.63％。

4、所述的sjzd-ogs糖含量为75.0％～95.0％；聚合度(dp)为2～14；单糖组成包括葡萄糖(glu)和果糖(fru)。

5、本发明涉及上述四君子汤活性寡糖sjzd-ogs的制备方法，通过从四君子汤浓缩液中提取出四君子汤非多糖(sjzd-npss)组分，经大孔树脂洗脱后得到寡糖组分aps-1后，再通过活性炭吸附法抽滤纯化得到。

6、所述的四君子汤浓缩液，采用但不限于《太平惠民和剂局方》中记载的方式实现。

7、所述的四君子汤非多糖(sjzd-npss)组分，通过将四君子汤浓缩液醇沉处理后离心获得上清液，再经浓缩挥去溶剂，加水复溶、挥干至充分除去乙醇，加水复溶、减压冻干得到。

8、所述的寡糖组分aps-1，通过将四君子汤非多糖(sjzd-npss)组分溶解并加载至ab-8大孔树脂，以水洗脱，采用苯酚-硫酸法对洗脱液进行检测，依据洗脱液糖含量进行合并，浓缩干燥，得四君子汤粗寡糖组分aps-1。

9、所述的活性炭吸附法具体为：取aps-1用蒸馏水配制成浓度为10mg/ml溶液，加入活性炭(样品与活性炭质量比，1:4～8)均匀混合，置于磁力搅拌器上搅拌30～60min，过滤，滤出液即为单糖成分(水部位，命名为a部位)；后将aps-1-活性炭混合物依次用3％～8％乙醇、10％～15％乙醇和45％～50％乙醇进行溶解、搅拌和抽滤，其抽滤液分别含有二糖(3％～8％乙醇，命名为b部位；10％～15％乙醇，命名为c部位)和寡糖(45％～50％乙醇，命名为d部位)成分。将上述d部位进行浓缩冻干，获得四君子汤寡糖sjzd-ogs活性组分。

10、本发明涉及一种基于上述方法制备得到的四君子汤中寡糖活性组分sjzd-ogs的应用，将其用于制备免疫活性调节药物或改善脾虚证的保健品或药物。

11、所述的保健品或药物，采用四君子汤寡糖sjzd-ogs作为活性部位与其他天然提取物与药学上可接受的赋形剂或辅料一起用于制备药物组合物，包括但不限于片剂、颗粒剂、丸剂、胶囊、口服液等。

技术特征：

1.一种具有活性的寡糖，其特征在于，其有效成分，即蔗果低聚糖的质量百分比为44.35％，具体包括：蔗果三糖5.06％、耐斯糖4.83％、蔗果五糖6.10％、蔗果六糖7.45％、蔗果七糖7.33％、蔗果八糖6.95％以及蔗果九糖6.63％。

2.根据权利要求1所述的寡糖，其特征是，所述的寡糖活性组分的糖含量为75.0％～95.0％；聚合度(dp)为2～14；单糖组成包括葡萄糖(glu)和果糖(fru)。

3.一种制备权利要求1或2所述寡糖活性组分的方法，其特征在于，通过从四君子汤浓缩液中提取出四君子汤非多糖(sjzd-npss)组分，经大孔树脂洗脱后得到寡糖组分aps-1后，再通过活性炭吸附法抽滤纯化得到。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征是，所述的四君子汤非多糖(sjzd-npss)组分，通过将四君子汤浓缩液醇沉处理后离心获得上清液，再经浓缩挥去溶剂，加水复溶、挥干至充分除去乙醇，加水复溶、减压冻干得到；所述的寡糖组分aps-1，通过将四君子汤非多糖(sjzd-npss)组分溶解并加载至ab-8大孔树脂，以水洗脱，采用苯酚-硫酸法对洗脱液进行检测，依据洗脱液糖含量进行合并，浓缩干燥，得四君子汤粗寡糖组分aps-1。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征是，所述的活性炭吸附法具体为：取aps-1用蒸馏水配制成浓度为10mg/ml溶液，加入活性炭均匀混合，置于磁力搅拌器上搅拌30～60min，过滤，滤出液即为单糖成分；后将aps-1-活性炭混合物依次用3％～8％乙醇、10％～15％乙醇和45％～50％乙醇进行溶解、搅拌和抽滤，其抽滤液分别含有二糖和含有45％～50％乙醇的寡糖成分，将寡糖成分浓缩冻干，获得四君子汤寡糖sjzd-ogs。

6.一种基于权利要求3-5中任一所述方法制备得到的四君子汤中寡糖活性组分的应用，其特征在于，将其用于制备免疫活性调节药物或改善脾虚证的保健品或药物；

技术总结
一种四君子汤中寡糖活性组分及其应用，该具有活性的寡糖组分(SJZD‑OGS)，其中蔗果低聚糖的质量百分比为44.35％，具体包括：蔗果三糖5.06％、耐斯糖4.83％、蔗果五糖6.10％、蔗果六糖7.45％、蔗果七糖7.33％、蔗果八糖6.95％以及蔗果九糖6.63％。本发明从临床治疗脾虚证典方四君子汤复方中进行多次分离纯化后制备得到寡糖活性组分SJZD‑OGS，具有显著的抗炎活性，可用于制备免疫调节的药物中；经体内动物实验证实，SJZD‑OGS可改善脾虚证，可进一步开发临床治疗脾虚证的治疗药物；SJZD‑OGS亦可调节肠道菌群及其代谢产物短链脂肪酸(SCFAs)，可进一步开发调节菌群的药物。

技术研发人员：李晓波,陈孝男,濮宗进,彭颖
受保护的技术使用者：上海交通大学
技术研发日：
技术公布日：2024/3/21