lncRNASCARNA2在抗病毒中的新用途

本发明属于生物医药，具体地，涉及lncrna scarna2在抗病毒中的新用途。

背景技术：

1、病毒感染一直以来是威胁人类健康的重要因素之一。病毒感染机体后试图大量复制、逃避免疫系统的监视进而实现病毒自身的存活和传播。天然免疫系统是机体抵抗病原体感染的第一道防线。天然免疫细胞通过表达模式识别受体（prr）识别病原体表面的病原相关分子模式（pamp）激活天然免疫信号通路，进而促进炎症和清除病原的相关基因的表达。其中，ⅰ型干扰素介导的免疫反应在宿主抗病毒过程中发挥关键作用，因此，系统全面地了解ⅰ型干扰素的调控可以更有效地指导机体对病原体的清除。虽然许多蛋白质在ⅰ型干扰素调控过程中的重要作用已经得到了很好的阐明，但非编码rna（ncrna）在调节干扰素反应中的作用尚不清楚。

2、在各类ncrna中，microrna（mirna）和长非编码rna（lncrna）在生物过程中的研究最广泛，lncrna作为长度大于200 bp且缺乏蛋白质编码能力的一类数量庞大的非编码rna，已被证明能够以物种和组织特异性的方式调节mrna的转录，翻译和转录后的加工。lncrna可以顺式改变邻近基因的表达，也可以反式与其他分子相互作用在整个细胞中执行各种功能。这些lncrna可以在细胞生理和发育过程中表现出不同的作用，也可以在癌症、心血管疾病等疾病中表现出不同的作用。近年来，越来越多的研究表明lncrna同样在免疫调控中通过多种机制发挥重要作用。

3、ⅰ型干扰素下游jak-stat信号通路中，转录因子stat1被激活后可以通过其核酸结合结构域与启动子dna相互作用启动下游干扰素刺激基因（interferon-stimulatedgenes，isgs）的转录，isg编码的蛋白已被报道通过多种机制包括抑制病毒转录、翻译和复制，病毒核酸的降解和细胞脂质代谢的改变来清除机体内的病毒。本技术的发明人首次发现了能与stat1结合的lncrna scarna2可以促进干扰素的效应，并进一步发现其在病毒感染中能够发挥抗病毒的功能。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明的目的在于提供lncrna scarna2在抗病毒中的新用途。

2、为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

3、本发明的第一方面提供了过表达lncrna scarna2的试剂在制备抗病毒药物中的应用。

4、进一步，所述病毒为水泡性口炎病毒（vsv）或脑心肌炎病毒（emcv）。

5、进一步，所述试剂包括过表达lncrna scarna2的载体、携带lncrna scarna2的纳米颗粒、包裹lncrna scarna2的蛋白微球、包裹lncrna scarna2的脂质体和/或其任意组合。

6、进一步，所述lncrna scarna2在细胞中的过表达能够显著促进isg的表达。

7、进一步，所述lncrna scarna2在细胞中的过表达能够显著抑制病毒mrna水平的表达、抑制病毒的复制。

8、在本发明中，所述scarna2（small cajal body-specific rna 2）是一种lncrna，在ncbi中的gene id为677766。所述scarna2具有本领域已知的序列或为其衍生分子。在一些实施方案中，所述scarna2为包括如下序列的分子：(a) 具有诸如gene id: 677766（人）所示序列的scarna2；(b) 在严格条件下与(a)限定的序列杂交的分子；(c) 与(a)或(b)中所示分子的序列具有70%以上（例如75%、80%、85%、90%、95%、98%、99%、99.5%以上，或其间的任何数值或数值范围）的序列同源性的分子，例如经密码子优化获得的scarna2。

9、在一些实施方案中，所述过表达lncrna scarna2的试剂是指任何能够促进lncrnascarna2表达的物质，包括但不限于：能够促进lncrna scarna2表达的天然纯化物质、经修饰的天然纯化物质、半合成物质、化学合成物质和/或其任意组合。

10、在一些实施方案中，所述过表达lncrna scarna2的试剂包括但不限于：含有lncrna scarna2的重组载体、含有lncrna scarna2的纳米颗粒、含有lncrna scarna2的蛋白微球、含有lncrna scarna2的脂质体、含有lncrna scarna2的peg修饰蛋白、含有lncrnascarna2的细胞外囊泡和/或其任意组合。

11、在一些实施方案中，所述载体并无特别限制，只要能够用于递送本发明所述的lncrna scarna2以过表达lncrna scarna2的载体均在本发明的保护范围内，包括但不限于：dna质粒载体、慢病毒载体、逆转录病毒载体、痘病毒载体、单纯疱疹病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体、结合dna质粒的脂质体、结合dna质粒的分子耦联体和/或结合dna质粒的多聚物等。在本发明的具体实施方案中，所述载体为psif1-h1载体。

12、本发明的第二方面提供了一种抗病毒的药物组合物。

13、进一步，所述药物组合物包含过表达lncrna scarna2的试剂。

14、进一步，所述试剂包括过表达lncrna scarna2的载体、携带lncrna scarna2的纳米颗粒、包裹lncrna scarna2的蛋白微球、包裹lncrna scarna2的脂质体和/或其任意组合。

15、在一些实施方案中，所述药物组合物还可包含药学上可接受的载体和/或辅料。所述载体和/或辅料的具体示例性例子包括但不限于：糖类，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和土豆淀粉；纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和甲基纤维素；西黄蓍胶粉末；麦芽；明胶；滑石；固体润滑剂，如硬脂酸和硬脂酸镁；硫酸钙；植物油，如花生油、棉籽油、芝麻油、橄榄油、玉米油和可可油；多元醇，如丙二醇、甘油、山梨糖醇、甘露糖醇和聚乙二醇；海藻酸；乳化剂，如润湿剂，如月桂基硫酸钠；着色剂；调味剂；压片剂、稳定剂；抗氧化剂；防腐剂；无热原水；等渗盐溶液；和磷酸盐缓冲液等。

16、在一些实施方案中，适合的药学上可接受的载体和/或辅料在remington'spharmaceutical sciences(19th ed, 1995)中有详细的记载，这些物质根据需要用于帮助配方的稳定性或有助于提高活性或活性物质的生物有效性或在口服的情况下产生可接受的口感或气味。如此配制的药物组合物根据需要可选择本领域技术人员已知的任何适当的方式将药物进行给药，使用药物组合物时，是将安全有效量的本发明所述的药物组合物施用于人。

17、本发明的第三方面提供了一种抗病毒的药物制剂。

18、进一步，所述药物制剂包含本发明第二方面所述的药物组合物。

19、在一些实施方案中，本发明所述的药物组合物或药物制剂的适合给药剂量根据制剂化方法、给药方式、患者的年龄、体重、性别、病态、饮食、给药时间、给药途径、排泄速度及反应灵敏性之类的因素而可以进行多种处方，熟练的医生通常能够容易地决定处方及处方对所希望的治疗和/或预防有效的给药剂量。

20、本发明的第四方面提供了一种筛选抗病毒候选药物的方法。

21、进一步，所述方法包括如下步骤：

22、(1) 用待测试物质处理表达或含有lncrna scarna2的体系；

23、(2) 检测所述体系中lncrna scarna2的表达；

24、(3) 选择可提高lncrna scarna2表达水平的测试物质为候选药物。

25、在一些实施方案中，所述lncrna scarna2表达水平的检测可采用本领域技术人员所熟知的任何检测lncrna表达水平的方法进行。在一些实施方案中，检测lncrna转录物的方法包括测序技术、核酸杂交技术、核酸扩增技术。其中，核酸扩增技术选自聚合酶链式反应、逆转录聚合酶链式反应、转录介导的扩增、连接酶链式反应、链置换扩增和基于核酸序列的扩增，其中，聚合酶链式反应优选为实时荧光定量pcr反应。

26、在一些实施方案中，所述体系包括细胞体系、亚细胞体系、溶液体系、组织体系、器官体系和/或动物体系。在一些实施方案中，所述待测物质为任何可能对病毒感染具有治疗和/或预防作用的物质、或任何可能促进本发明所述lncrna scarna2表达的物质，在本发明中，所述待测物质并无特别限制。

27、本发明的第五方面提供了如下任一方面应用：

28、(1) lncrna scarna2在筛选抗病毒候选药物中的应用；

29、(2) 抑制lncrna scarna2表达的试剂在制备用于治疗和/或预防自身免疫性疾病的药物中的应用；

30、(3) 过表达lncrna scarna2的试剂在制备用于治疗和/或预防病毒感染相关疾病的药物中的应用。

31、此外，本发明还提供了一种治疗和/或预防病毒感染相关疾病的方法，所述方法包括如下步骤：给有需要的受试者施用有效量的本发明第一方面中所述的过表达lncrnascarna2的试剂、本发明第二方面所述的药物组合物和/或本发明第三方面所述的药物制剂。

32、在一些实施方案中，所述施用的方式包括但不限于：局部、经皮、肠胃外、静脉内、肌肉内、腹膜内、口服、鼻内滴注、腔内或膀胱内滴注、眼内、动脉内、病灶内或通过施用于诸如鼻、咽喉和支气管的粘膜来施用所述物质。

33、相对于现有技术，本发明具有的优点和有益效果如下：

34、本发明首次发现lncrna scarna2在抗病毒感染中的新用途，本发明通过实验证实了在细胞中过表达lncrna scarna2，可以在vsv和emcv感染后显著促进isg的表达，从而抑制病毒mrna水平的表达、抑制病毒的复制，本发明为制备用于治疗和/或预防各种病毒感染引起的感染性疾病的药物提供了新的思路和策略，为病毒感染的治疗提供了新的靶点，具有广泛的应用前景。