从鹊肾树中提取的强心苷类化合物在制备单纯疱疹病毒抑制剂中的应用

本发明涉及医药，具体地，涉及从鹊肾树中提取的强心苷类化合物及其在制备单纯疱疹病毒抑制剂中的应用；具体涉及化合物卡诺醇-2,3-二氧甲醚-β-d-吡喃岩藻糖苷、化合物16-羟基洋地黄毒苷元-β-d-黄花夹竹桃苷、化合物杠柳苷元-3-o-α-l-吡喃鼠李糖基-(1→4)-6-去氧-β-d-吡喃阿洛糖苷、化合物毒毛旋花子苷元-3-o-β-d-吡喃葡萄糖基-(1→4)-2,3-二氧甲醚-β-d-吡喃岩藻糖苷、化合物杠柳苷元-3-o-β-d-吡喃葡萄糖基-(1→4)-β-d-吡喃弩箭子糖苷在制备1型单纯疱疹病毒(hsv-1)抑制剂中的用途。

背景技术：

1、鹊肾树(学名：streblus asper lour.)是桑科(moraceae)鹊肾树属植物。在我国主要分布于云南、广西、海南等地。鹊肾树是一味传统傣药，药用名埋怀，具有清热解毒的传统功效。《中华本草(傣药卷)》中记载鹊肾树的叶采收后鲜用，煎汤内服，即可治疗咽喉肿痛。《云南民族药志》记载了鹊肾树其它药用部位的功效，如树皮可以用来治疗痢疾，根可以止血，治疗毒蛇咬伤、溃疡，茎枝消炎止痛，可以治疗牙痛。药理活性研究显示，鹊肾树的粗提物主要具有抗病毒、抗炎、抗癌、抗菌等药理活性(evid.basedcomplementaryaltern.med.2006，3，217-222)。化学成分研究表明，鹊肾树主要含有强心苷类化合物，具有抗肿瘤(j.nat.prod.2017,80,648-658；phytochemistry 2021,181,112544)及抗eb病毒(epstein-barr virus)活性(bioorg.chem.2022,127,106004)等生物活性。

2、疱疹类病毒(herpes viruses)属双链dna病毒，其中单纯疱疹病毒(herpessimplex virus,hsv)主要有1型单纯疱疹病毒(hsv-1)和2型单纯疱疹病毒(hsv-2)两型。hsv-1主要引起唇疱疹，在发达国家的人群中，多达90％的儿童是血清阳性(j.am.med.assoc.1992,268,1702-1708)；hsv-2主要引起生殖器疱疹，现已经成为常见的性传播疾病之一(j.am.med.assoc.2000,283,791-794)。hsv感染现已成为全球第四大传染病。hsv病毒目前还没有被批准的商用疫苗，临床治疗药物主要为核苷类似物，包括阿昔洛韦及其衍生物泛昔洛韦等。虽然它们能特异性阻断病毒复制过程，但也存在靶点单一、生物利用度低、半衰期短以及严重的副反应等缺陷(j.clin.virol.2004,30,115-133)。因此，寻找新的抗疱疹病毒天然药物具有重要意义。

3、化合物卡诺醇-2,3-二氧甲醚-β-d-吡喃岩藻糖苷，最早从鹊肾树中分离得到，具有抗eb病毒活性(bioorg.chem.2022,127,106004)。化合物16-羟基洋地黄毒苷元-β-d-黄花夹竹桃苷，最早从沙漠玫瑰(adenium obesum)中分离得到(chem.pharm.bull.1990,38,669-672)，具有抗肿瘤活性(steroids 2021,171,108852)。化合物杠柳苷元-3-o-α-l-吡喃鼠李糖基-(1→4)-6-去氧-β-d-吡喃阿洛糖苷，最早从鹊肾树中分离得到，可诱导细胞凋亡(phytochemistry 2021,181,112544)。化合物毒毛旋花子苷元-3-o-β-d-吡喃葡萄糖基-(1→4)-2,3-二氧甲醚-β-d-吡喃岩藻糖苷，最早从鹊肾树中分离得到，具有抗肿瘤活性(phytomedicine plus 2022，2，100177)。化合物杠柳苷元-3-o-β-d-吡喃葡萄糖基-(1→4)-β-d-吡喃弩箭子糖苷，最早从小花糖芥(erysimum cheiranthoides)中分离得到(chem.pharm.bull.2000,48,290-292)，未见相关生物活性报道。上述五种强心苷类化合物均从鹊肾树中分离得到，均未见其与抗hsv-1相关的生物活性报道。

技术实现思路

1、针对现有技术中的缺陷，本发明的目的是提供从鹊肾树中提取的强心苷类化合物在制备单纯疱疹病毒抑制剂中的应用。

2、根据本发明的一个方面，提供从鹊肾树中提取的强心苷类化合物在制备单纯疱疹病毒抑制剂中的应用。

3、可选地，所述强心苷类化合物选自式(1)所示化合物卡诺醇-2,3-二氧甲醚-β-d-吡喃岩藻糖苷、式(2)所示化合物16-羟基洋地黄毒苷元-β-d-黄花夹竹桃苷、式(3)所示化合物杠柳苷元-3-o-α-l-吡喃鼠李糖基-(1→4)-6-去氧-β-d-吡喃阿洛糖苷、式(4)所示化合物毒毛旋花子苷元-3-o-β-d-吡喃葡萄糖基-(1→4)-2,3-二氧甲醚-β-d-吡喃岩藻糖苷、式(5)所示化合物杠柳苷元-3-o-β-d-吡喃葡萄糖基-(1→4)-β-d-吡喃弩箭子糖苷中的任意一种或几种；

4、

5、可选地，所述单纯疱疹病毒为1型单纯疱疹病毒。

6、可选地，所述强心苷类化合物作为制备治疗抗1型单纯疱疹病毒的先导化合物。

7、可选地，所述强心苷类化合物的提取方法包括：

8、将鹊肾树的干燥茎枝粉碎后，用有机溶剂或/和水提取得到总提取物；

9、将所述总提取物分散于水中，先用石油醚除油脱脂，然后分别用乙酸乙酯和正丁醇进行依次萃取，减压回收溶剂，浓缩至干，分别得到乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物；

10、将乙酸乙酯提取物进行大孔树脂hp-20柱层析后，用乙醇-水体积比为30:70，50:50，70:30，95:10梯度洗脱，收集流份；再对乙醇-水50:50流份进行硅胶柱层析，然后用二氯甲烷-甲醇体积比为50:1，20:1，15:1，10:1，5:1，1:1，0:1梯度洗脱，收集流份；二氯甲烷-甲醇10:1流份经c18反相硅胶进行柱层析，然后以甲醇-水体积比为10:90，15:85，20:80，25:75，30:70，35:65，40:60，45:55，50:50，55:45，60:40，65:35，70:30梯度洗脱；将甲醇-水60:40流份、40:60流份、55:45流份和65:35流份分别进行sephadex lh-20凝胶柱层析，除去杂质，富集强心苷部位，然后分别进行高效液相制备，得到式(1)-式(4)所示化合物；

11、将正丁醇提取物进行大孔树脂hp-20柱层析后，用乙醇-水体积比为10:90，30:70，50:50，70:30，95:10，梯度洗脱，收集流份；再对乙醇-水50:50流份进行硅胶柱层析，然后用二氯甲烷-甲醇体积比为50:1，20:1，15:1，10:1，5:1，1:1，0:1梯度洗脱，收集流份；二氯甲烷-甲醇5:1流份经c18反相硅胶进行柱层析，然后以甲醇-水体积比为10:90，15:85，20:80，25:75，30:70，35:65，40:60，45:55，50:50，55:45，60:40，65:35，70:30，80:20梯度洗脱，将甲醇-水40:60流份进行sephadex lh-20凝胶柱层析，除去杂质，富集强心苷部位，然后以甲醇-水50:50洗脱进行高效液相制备，得到式(5)所示化合物。

12、与现有技术相比，本发明具有如下至少之一的有益效果：

13、本发明提供的强心苷类化合物从鹊肾树中提取得到，对1型单纯疱疹病毒具有显著抑制活性，并且具有良好的治疗指数，可用于制备治疗1型单纯疱疹病毒的药物或先导化合物。