苯酚醚类化合物的应用的制作方法

本发明涉及有机合成药物，具体涉及一种苯酚醚类化合物的应用。

背景技术：

1、病毒是一类很重要的病原体，尤其是冠状病毒。在过去几年里，sars-cov-2造成了许多生命和财产损失。尽管近三年来，随着sars-cov-2感染能力和致病能力的逐渐减弱，它逐渐从我们的正常生活中消失，但目前只有几种药物获得上市批准或者只有紧急使用授权。main protease(mpro)和papain-like protease(plpro)是sars-cov-2复制和扩增中的关键蛋白酶，负责多聚蛋白的切割，保证sars-cov-2的几个关键的非结构蛋白功能的正常行使。mpro和plpro也是sars-cov-2爆发以后最早用于研发抗病毒药物的两个靶点。

2、聚多曲霉(aspergillus sydowii)属于散囊菌目，发菌科，曲霉属真菌。菌落在马铃薯葡萄糖琼脂培养基中，生长较为缓慢，质地为丝绒状至絮状，致密，颜色呈灰蓝色至暗蓝色。通过调研近年来关于聚多曲霉次生代谢产物的研究，发现其次生代谢产物种类繁多，包括生物碱、氧杂蒽酮、倍半萜、二苯醚等；其中萜类主要是双叶烷型倍半萜。生物活性方面，二苯醚类化合物则表现出一定的抗癌活性以及抗菌活性；氧杂蒽酮类化合物则表现出一定的细胞毒和抗炎活性，抑制α-葡萄糖苷酶活性，抗氧化性和抗酪氨酸酶活性等。

技术实现思路

1、本发明的目的是为了克服现有技术存在的sars-cov-2关键蛋白酶抑制剂种类较少且活性有待提升等问题，提供一种苯酚醚类化合物的应用。本发明式1所示的化合物和式2所示的化合物具有很好sars-cov-2mpro和sars-cov-2plpro抑制活性，具备很大潜在的应用价值。

2、为了实现上述目的，本发明一方面提供一种以下式1或式2所示的苯酚醚类化合物在制备用于预防和/或治疗抗冠状病毒药物中的应用；

3、

4、本发明第二方面提供一种以下式1或式2所示的苯酚醚类化合物在制备用于预防和/或治疗新型冠状病毒sars-cov-2药物中的应用；

5、

6、本发明第三方面提供一种以下式1或式2所示的苯酚醚类化合物在制备用于抑制sars-cov-2mpro蛋白酶和sars-cov-2plpro蛋白酶活性药物中的应用；

7、

8、优选地，所述式1或式2所示的苯酚醚类化合物是从聚多曲霉次生代谢产物中分离纯化得到，从聚多曲霉次生代谢产物中分离纯化得到所述式1或式2所示的苯酚醚类化合物的方法包括以下步骤：

9、(1)将聚多曲霉菌株接种于马铃薯葡萄糖琼脂培养基上进行培养，然后接种于培养基平板上，静置培养；

10、(2)将培养后的培养基平板分成小块接种于大米固体发酵培养基中进行发酵培养；

11、(3)将步骤(2)中发酵得到的发酵液和培养基用乙醇提取，减压回收乙醇，得到总浸膏；

12、(4)将所述总浸膏与水混合，接着采用乙酸乙酯萃取，减压回收乙酸乙酯，得到乙酸乙酯总提取物；

13、(5)将所述乙酸乙酯总提取物进行柱层析分离得到上述苯酚醚类化合物。

14、优选地，在步骤(5)中，所述柱层析分离的过程包括：

15、s1将步骤(4)得到的乙酸乙酯总提取物进行硅胶柱层析，接着以体积比10:1-0:1的石油醚-乙酸乙酯混合溶剂梯度洗脱，得到组分fr1、组分fr2、组分fr3、组分fr4、组分fr5、组分fr6和组分fr7；

16、s2将组分fr5经过ods柱，采用甲醇和水混合溶剂进行梯度洗脱，得到组分fr.5-1、组分fr.5-2、组分fr.5-3、组分fr.5-4、组分fr.5-5、组分fr.5-6、组分fr.5-7和组分fr.5-8；

17、s3将组分fr.5-2经过凝胶柱层析，得到组分fr.5-2a、组分fr.5-2b、组分fr.5-2c和组分fr.5-2d；

18、s4将组分fr.5-2a进行硅胶柱层析，接着以体积比为20:1-0:1的石油醚-乙酸乙酯混合溶剂梯度洗脱，接着通过反相高效液相色谱纯化得到式1所示的苯酚醚类化合物；

19、s5将组分fr.5-2d经过ods柱，采用甲醇和水混合溶剂进行梯度洗脱，接着通过反相高效液相色谱纯化得到式2所示的苯酚醚类化合物。

20、优选地，在步骤s2中，ods柱的洗脱液为体积比为20:80-100:0的甲醇-水混合溶液。

21、优选地，在步骤s4中，所述反相高效液相色谱的流动相为体积比为40:60-60:40的甲醇-水混合溶剂。

22、优选地，在步骤s5中，ods柱的洗脱液为体积比为20:80-50:50的甲醇-水混合溶剂。

23、优选地，在步骤s5中，所述反相高效液相色谱的流动相为体积比40:60-60:40的甲醇-水混合溶剂。

24、优选地，在步骤(1)中，将聚多曲霉菌株接种于马铃薯葡萄糖琼脂培养基上进行培养的条件包括：温度为20-30℃，时间为2-4天；

25、所述静置培养的条件包括：温度为20-30℃，时间为6-8天。

26、优选地，所述大米固体发酵培养基中，大米和水的用量的固液比为200-250g:200ml。

27、优选地，所述发酵培养的条件包括：温度为20-30℃，时间为25-30天。

28、在本发明中，通过对真菌聚多曲霉的乙醇提取物进行分离纯化，得到了苯酚醚类化合物，结构如式1或式2所示。另外，本发明中通过运用多种波谱分析方法和手段确定了所述苯酚醚类化合物的结构式。进一步通过式1所示的化合物和式2所示的化合物对sars-cov-2mpro蛋白酶和sars-cov-2plpro蛋白酶抑制活性进行测试评价，发现这两种化合物对sars-cov-2mpro和sars-cov-2plpro均有抑制作用，可以很好的应制备用于预防或治疗新型冠状病毒sars-cov-2药物。

技术特征：

1.一种式1或式2所示的苯酚醚类化合物在制备用于预防和/或治疗抗冠状病毒药物中的应用；

2.一种式1或式2所示的苯酚醚类化合物在制备用于预防和/或治疗新型冠状病毒sars-cov-2药物中的应用；

3.一种式1或式2所示的苯酚醚类化合物在制备用于抑制sars-cov-2mpro蛋白酶和sars-cov-2plpro蛋白酶活性药物中的应用；

4.根据权利要求1-3中任意一项所述的应用，其特征在于，所述式1或式2所示的苯酚醚类化合物是从聚多曲霉次生代谢产物中分离纯化得到，从聚多曲霉次生代谢产物中分离纯化得到所述式1或式2所示的苯酚醚类化合物的方法包括以下步骤：

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，在步骤(5)中，所述柱层析分离的过程包括以下过程：

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，在步骤s2中，ods柱的洗脱液为体积比为20:80-100:0的甲醇-水混合溶剂。

7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，在步骤s4中，所述反相高效液相色谱的流动相为体积比为40:60-60:40的甲醇-水混合溶剂。

8.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，在步骤s5中，ods柱的洗脱液为体积比为20:80-50:50的甲醇-水混合溶剂；

9.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，在步骤(1)中，将聚多曲霉菌株接种于马铃薯葡萄糖琼脂培养基上进行培养的条件包括：温度为20-30℃，时间为2-4天；

10.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述大米固体发酵培养基中，大米和水的用量的固液比为200-250g:200ml；

技术总结
本发明涉及有机合成药物技术领域，公开了一种苯酚醚类化合物的应用。本发明提供一种式1或式2所示的苯酚醚类化合物在制备用于预防和/或治疗抗冠状病毒药物中的应用。本发明所述的苯酚醚类化合物具有很好SARS‑CoV‑2Mpro和PLpro抑制活性，具备很大潜在的应用价值。

技术研发人员：周素文,李佳,严晗,张思汉,冯明杰
受保护的技术使用者：湖北天勤鑫圣生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/4/17