MOTS-c多肽在制备预防肺缺血再灌注血管内皮细胞损伤药物中的应用的制作方法

本发明属于生物医药领域，尤其涉及mots-c多肽在制备预防肺缺血再灌注血管内皮细胞损伤药物中的应用。

背景技术：

1、肺缺血再灌注损伤可在多种临床情况下发生，如肺移植、体外循环、肺袖式切除、肺动脉成形、肺动脉血栓内膜剥脱和心肺复苏及创伤等。在临床上，患者常出现肺血管阻力增加、微循环通透性增加、肺水肿和肺动脉高压等病理过程。以往临床研究表明，肺缺血再灌注损伤可延长患者机械通气时间、重症监护室住院时间及相关并发症和死亡率，给患者带来沉重的经济负担，严重影响患者预后。尽管围手术期患者治疗措施不断优化，但对于肺缺血再灌注损伤的预防和治疗仍缺乏公认的、行之有效的药物和方法。因此，迫切需要寻找预防和治疗肺缺血再灌注损伤的新策略。

2、肺血管内皮细胞在缺血再灌注诱导的急性肺损伤中起非常重要的作用。在缺血阶段，肺血管内皮细胞合成内皮素和血栓素a2增加、一氧化氮合酶和前列环素下降，导致血管活性介质平衡失调。当再灌注以后后，大量促炎细胞因子、氧自由基、激活的血小板和no信号通路共同作用于血管内皮细胞，引起血管损伤，继而出现肺血管通透性增加、微循环阻力增加和肺水肿。患者由于通气血流比例失调而出现进行性呼吸困难和低氧血症。

3、线粒体衍生肽mots-c是由线粒体12srrna开放阅读框编码的多肽，由16个氨基酸构成，其序列为：met-arg-trp-gln-glu-met-gly-tyr-ile-phe-tyr-pro-arg-lys-leu-arg，其中前11个氨基酸残基组成在不同物种间高度保守。在应激条件下，mots-c多肽可以动态地转移到细胞核并通过与转录因子和染色质结合的相互作用，促进线粒体发育所必需的各种关键基因表达，减轻氧化应激诱导的线粒体损伤，成为研究线粒体损伤相关疾病的重要靶点。同时作为一种内源性的肽，mots-c多肽相比于其他药物具有更高的安全性，使其成为一种极具吸引力的候选治疗剂。mots-c作为改善肺缺血再灌注损伤的潜力活性分子,在预防肺缺血再灌注血管内皮细胞损伤(lungischemia-reperfusion injury,liri)药物的应用中有巨大潜力。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种mots-c多肽及其衍生物在预防liri药物中的应用，为liri的防治提供一种新的思路和方法。

2、为解决上述技术问题，本发明提供如下技术方案：

3、本发明的第一个目的是提供mots-c多肽在制备预防肺缺血再灌注血管内皮细胞损伤药物中的应用。

4、在本发明的一种实施方式中，所述mots-c多肽为以下任意一种或多种：

5、(1)氨基酸序列为seq id no.1所示序列的多肽；

6、(2)经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加且具有seq id no.1氨基酸序列相同活性的多肽；

7、(3)为(1)或(2)所述多肽与细胞穿膜肽连接所形成的嵌合肽。

8、在本发明的一种实施方式中，所述细胞穿膜肽包括但不限于arg9、tat、dpv、hiv-1rev、protaminal、penetratin、map、transportan、pep-1、bip、c105y、pep-7、sg3和fgf。

9、本发明的第二个目的是提供一种药物组合物，所述药物组合物包括活性成分mots-c多肽以及药学上可接受的辅料。

10、在本发明的一种实施方式中，所述mots-c多肽为以下任意一种或多种：

11、(1)氨基酸序列为seq id no.1所示序列的多肽；

12、(2)经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加且具有seq id no.1氨基酸序列相同活性的多肽；

13、(3)为(1)或(2)所述多肽与细胞穿膜肽连接所形成的嵌合肽。

14、在本发明的一种实施方式中，所述细胞穿膜肽包括但不限于arg9、tat、dpv、hiv-1rev、protaminal、penetratin、map、transportan、pep-1、bip、c105y、pep-7、sg3和fgf。

15、在本发明的一种实施方式中，所述辅料包括载体、稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、乳化剂、助溶剂、增溶剂、渗透压调节剂、表面活性剂、包衣材料、着色剂、ph调节剂、抗氧化剂、抑菌剂或者缓冲剂中的任意一种或者至少两种的组合。

16、在本发明的一种实施方式中，所述至少两种的组合例如稀释剂和赋形剂的组合、粘合剂和湿润剂的组合、乳化剂和助溶剂的组合等，其他任意的组合方式均可选择，在此不在一一赘述。

17、在本发明的一种实施方式中，所述载体为病毒、脂质体、纳米颗粒中的一种或多种。

18、在本发明的一种实施方式中，所述赋形剂为甘露醇、乳糖、脂肪酸、聚乙二醇中的一种或多种。

19、本发明还提供了上述药物组合物在制备预防和/或治疗bpd治疗药品中的应用。

20、在本发明的一种实施方式中，所述药物的剂型包括混悬剂、颗粒剂、胶囊剂、散剂、片剂、乳剂、溶液剂、滴丸剂、注射剂、栓剂、灌肠剂、气雾剂、贴剂或滴剂中的任意一种。

21、在本发明的一种实施方式中，所述药物的给药途径包括口服给药、舌下给药、直肠给药、皮肤黏膜给药、吸入给药或者注射给药。

22、本发明还提供了上述药物组合物在制备具有如下至少一种功能的药品中的应用：

23、改善缺血再灌注诱导的肺组织肺泡结构的破坏，改善肺组织病理改变；

24、降低缺血再灌注诱导的炎症因子il-6、il-1β和tnf-α的表达水平；

25、抑制缺血再灌注诱导的ros的产生；

26、减轻缺血再灌注诱导的线粒体损伤；

27、抑制缺血再灌注诱导的血管内皮细胞凋亡；

28、改善缺血再灌注诱导的血管内皮细胞迁移能力破坏，促进血管再生与修复；

29、改善缺血再灌注诱导的血管内皮细胞通透性破坏；；

30、改善缺血再灌注诱导的氧化应激损伤。

31、在本发明的一种实施方式中，所述mots-c多肽为以下任意一种或多种：

32、(1)氨基酸序列为seq id no.1所示序列的多肽；

33、(2)经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加且具有seq id no.1氨基酸序列相同活性的多肽；

34、(3)为(1)或(2)所述多肽与细胞穿膜肽连接所形成的嵌合肽。

35、在本发明的一种实施方式中，所述细胞穿膜肽包括但不限于arg9、tat、dpv、hiv-1rev、protaminal、penetratin、map、transportan、pep-1、bip、c105y、pep-7、sg3和fgf。

36、有益效果：

37、(1)本发明采用左肺门夹闭诱导的liri小鼠模型，外源性给予mots-c多肽可显著减轻liri损伤的程度。提示mots-c多肽可改善左肺门夹闭引起的liri，为liri的防治提供一种新的手段和思路。

38、(2)mots-c多肽抑制氧糖剥夺/恢复诱导的人脐静脉内皮细胞(huvec)的炎症反应、线粒体功能受损、凋亡和氧化应激损伤：mots-c多肽改善氧糖剥夺/恢复诱导的炎症因子il-6、il-1β和tnf-α的mrna表达水平异常升高现象；mots-c多肽逆转氧糖剥夺/恢复诱导线粒体功能相关mrna表达水平降低，降低氧糖剥夺/恢复诱导的细胞内ros的异常积累和氧化应激相关指标的升高；mots-c多肽改善氧糖剥夺/恢复引起的由cyt-c诱导的细胞凋亡；改善线粒体功能治疗liri。

39、(3)mots-c多肽抑制氧糖剥夺/恢复诱导的huvec功能损伤：mots-c多肽有效改善氧糖剥夺/恢复诱导的huvec通透性增高、迁移能力降，逆转氧糖剥夺/恢复诱导的血管紧密连能力相关蛋白含量降低，改善血管功能治疗liri。综上，本发明证实了mots-c多肽对liri具有理想的保护作用。本发明为制备保护liri药物提供了一个新的靶点，为liri治疗药物的开发提供了全新的思路。考虑到多肽类药物高效、低毒、高选择性等优点，mots-c多肽及其衍生肽在liri防治及线粒体功能损伤相关疾病中具有巨大的研究价值和应用前景。