一种用于评价七氟烷对心肌缺血再灌注损伤保护作用的方法

本发明涉及药物评价，尤其是涉及一种采用紫外光分光光度法检测浓度用于评价七氟烷对心肌缺血再灌注损伤保护作用的方法。

背景技术：

1、心肌缺血再灌注损伤是指心肌组织缺血发生后，组织复灌，导致心肌组织损伤加重甚至心肌细胞死亡的现象。随溶栓疗法、经皮腔内冠脉血管成形术(ptca )、心脏外科手术如冠状动脉搭桥术(cabg)、心脏停跳后电重构状态、及体外循环技术心内直视手术技术的发展，再灌注损伤引发的心律失常发生、心肌顿抑、心功能降低、心肌梗死等诸多临床现象倍受关注，围术期的心肌保护成为多学科研究的焦点，相关研究不断深入，如何减少心肌缺血-再灌注损伤己公认为心脏急性缺血性疾患治疗领域面临的新挑战。

2、七氟烷为70年代末人工合成的一种新型挥发性全身麻醉药，90年代中期完成床试验，20世纪初在日本获批准临床使用。此后在东南亚、欧洲等多个发达国家临床应用。

3、最接近现有技术硕士论文（“七氟烷预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用”，李波）中采用自制在体大鼠急性心肌梗死模型，观察七氟烷预处理对大鼠心缺血-再灌注损伤保护作用的同时，通过酶学活性、心肌组织病理图片、以及ttc染色法分析心肌梗死面积等方法，探讨一定时间内，七氟烷预处理，抗缺血再灌注损伤的心肌保护作用。

4、然而，上述方案在评价七氟烷对心肌保护作用时，在获取大鼠缺血前、再灌注七氟烷预处理末的全血血液肌钙蛋白活性浓度时，采用了近似估计的方法计算肌钙蛋白活性浓度，同时，现有技术也存在通过三波长分光度法计算肌钙蛋白浓度的方案；这两种方法都存在由于波长选取不准确造成肌钙蛋白活性浓度不高的问题。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明提出一种采用紫外光分光光度法检测浓度用于评价七氟烷对心肌缺血再灌注损伤保护作用的方法，用于提高肌钙蛋白的检测精度，进而提高评价七氟烷对心肌缺血再灌注损伤保护作用的准确度。

2、为了实现上述目的，提供一种用于评价七氟烷对心肌缺血再灌注损伤保护作用的方法，所述方法包括以下步骤：

3、s1：制定评价七氟烷对心肌缺血再关注损伤保护作用的动物实验分组，所述动物实验分组分别为：缺血再灌注组、七氟烷预处理第一组、七氟烷预处理第二组、七氟烷预处理第三组；

4、s2：处理所述缺血再灌注组、七氟烷预处理第一组，七氟烷预处理第二组，七氟烷预处理第三组的大鼠；

5、s3：对各个大鼠进行检测，获取检测数据；所述检测数据包括：所述大鼠的缺血前、再灌注七氟烷预处理10min后、缺血即刻、缺血30min、再灌注七氟烷预处理120min的平均动脉压以及心率；所述大鼠缺血前1min、再灌注七氟烷预处理末的全血血液最终肌钙蛋白活性浓度；所述大鼠的缺血前1min、再灌注七氟烷预处理末的心肌组织he染色图像、除心肌组织外的ttc染色图像；

6、其中，获取所述大鼠缺血前1min的全血血液肌钙蛋白活性的步骤具体为：

7、s3.a：采用作图法及三波长分光度法获取所述大鼠缺血前1min的初始肌钙蛋白活性浓度；

8、s3.b：根据所述初始肌钙蛋白活性浓度选择该浓度下的最优波长组合；

9、s3.c：根据所述最优波长组合作为波长计算基准获取所述大鼠缺血前1min的最终肌钙蛋白活性浓度；

10、s4：根据所述检测数据，得到七氟烷对心肌缺血再灌注损伤保护作用的结论。

11、优选地，所述s3.b中，所述最优波长组合的选择步骤为：配置不同肌钙蛋白活性浓度的全血血液，然后通过计算获取该活性浓度下的最优波长，最终生成针对不同肌钙蛋白活性浓度的最优波长数据库，然后，根据初始肌钙蛋白的活性浓度在最优波长数据库中查表得到最优波长组合。

12、优选地，通过计算获取该肌钙蛋白活性浓度下的最优波长具体为：

13、sa：采用作图法获取用于采用三波长分光度法检测该肌钙蛋白活性的三个初始波长λ1_0、λ2_0、λ3_0；

14、sb：针对每个初始波长，生成n个初始波长变动波长；

15、sc：每个初始波长及其变动波长作为一个集合，分别对所述三个初始波长生成的三组集合中选取1个波长作为元素，形成波长组合；

16、sd：分别以所述波长组合为基准计算预先配置的全血血液的肌钙蛋白浓度，并得到每个所述波长组合下的计算肌钙蛋白活性浓度；

17、se：计算每个波长组合下的计算肌钙蛋白活性浓度与该肌钙蛋白活性浓度的误差：

18、sf：选取误差最小的波长组合作为该肌钙蛋白活性浓度下的最优波长组合。

19、优选地，所述s1中，选择成龄雄性wistar大鼠32只，随机分为4组，每组随机选择大鼠8只。

20、优选地，所述sb中，所述初始波长变动波长为对所述初始波长向前以及向后分别移动预设间隔得到的波长。

21、优选地，所述n为2，所述预设间隔为1nm。

22、优选地，所述sc中，共27个波长组合。

23、优选地，所述s2中，所述缺血再灌注组大鼠不进行七氟烷预处理；所述七氟烷预处理第一组，七氟烷预处理第二组，七氟烷预处理第三组的大鼠放入动物预处理箱，通过麻醉气体挥发罐分别给予0.5%、1%、1.5%浓度的七氟烷气体进行预处理；从而完成大鼠实验操作。

24、本发明的优点和有益效果为：

25、本发明首先粗测得到初始肌钙蛋白活性浓度，然后针对不同的初始肌钙蛋白活性浓度的全血血液选择了不同的最优波长组合，这样相较于作图法，既考虑了肌钙蛋白浓度对肌钙蛋白分析的影响，同时也避免了作图法的作图误差，从而提高了肌钙蛋白活性浓度的分析准确度，进而提高了评价七氟烷对心肌缺血再灌注损伤保护作用的准确度。

技术特征：

1.一种用于评价七氟烷对心肌缺血再灌注损伤保护作用的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的用于评价七氟烷对心肌缺血再灌注损伤保护作用的方法，其特征在于，所述s3.b中，所述最优波长组合的选择步骤为：配置不同肌钙蛋白活性浓度的全血血液，然后通过计算获取该活性浓度下的最优波长，最终生成针对不同肌钙蛋白活性浓度的最优波长数据库，然后，根据初始肌钙蛋白的活性浓度在最优波长数据库中查表得到最优波长组合。

3.根据权利要求2所述的用于评价七氟烷对心肌缺血再灌注损伤保护作用的方法，其特征在于，通过计算获取该肌钙蛋白活性浓度下的最优波长具体为：

4.根据权利要求1所述的用于评价七氟烷对心肌缺血再灌注损伤保护作用的方法，其特征在于，所述s1中，选择成龄雄性wistar大鼠32只，随机分为4组，每组随机选择大鼠8只。

5.根据权利要求3所述的用于评价七氟烷对心肌缺血再灌注损伤保护作用的方法，其特征在于，所述sb中，所述初始波长变动波长为对所述初始波长向前以及向后分别移动预设间隔得到的波长。

6.根据权利要求5所述的用于评价七氟烷对心肌缺血再灌注损伤保护作用的方法，其特征在于，所述n为2，所述预设间隔为1nm。

7.根据权利要求3所述的用于评价七氟烷对心肌缺血再灌注损伤保护作用的方法，其特征在于，所述sc中，共27个波长组合。

8.根据权利要求1所述的用于评价七氟烷对心肌缺血再灌注损伤保护作用的方法，其特征在于，所述s2中，所述缺血再灌注组大鼠不进行七氟烷预处理；所述七氟烷预处理第一组，七氟烷预处理第二组，七氟烷预处理第三组的大鼠放入动物预处理箱，通过麻醉气体挥发罐分别给予0.5%、1%、1.5%浓度的七氟烷气体进行预处理；从而完成大鼠实验操作。

技术总结
本发明涉及药物评价技术领域，尤其是涉及一种采用紫外光分光光度法检测浓度用于评价七氟烷对心肌缺血再灌注损伤保护作用的方法；本发明首先采用紫外光分光光度法粗测得到成分初始浓度，然后针对不同的成分初始浓度的全血血液选择了不同的最优波长组合，然后采用最优波长组合获取最终的成本浓度，这样相较于作图法，既考虑了成分浓度对成分分析的影响，同时也避免了作图法的作图误差，从而提高了成分浓度的分析准确度，进而提高了评价七氟烷对心肌缺血再灌注损伤保护作用的准确度。

技术研发人员：李波,庄欣琪,张英立,卢悦淳
受保护的技术使用者：天津医科大学第二医院
技术研发日：
技术公布日：2024/3/27