丹参来源类外泌体纳米囊泡在制备抗GC性肌病药物中的应用

本发明涉及生物医药，具体而言，涉及丹参来源类外泌体纳米囊泡在制备抗gc性肌病药物中的应用。

背景技术：

1、糖皮质激素性肌病即糖皮质激素(glucocorticoid，gc)所诱发的肌病，又称为gc性肌病，亦称类固醇肌病，是糖皮质激素（gc）应用的不良反应之一，也是药物诱发肌病中最常见的类型之一，表现为肌肉萎缩和肌无力，以含氟gc(地塞米松、倍氯米松、曲安西龙等)更易诱发。

2、细胞外囊泡是细胞分泌到细胞外具有不同大小的脂质膜囊泡。这些囊泡能够将各种分子从产生细胞运送到目标细胞。细胞外囊泡的三种主要亚型是微泡、外泌体和凋亡小体，在不同类型的细胞外囊泡中，外泌体是存在于不同生物体中的纳米大小的囊泡。它们携带生产细胞的各种分子成分，包括蛋白质、脂质、mrna和microrna，由于其脂质膜结构以及膜表面蛋白，使其更有利于被细胞吸收。越来越多的证据表明，外泌体在细胞间的信息交流中发挥着重要作用，影响着生理和病理过程，已被用作纳米治疗剂、药物传递载体和生物标志物而得到广泛的研究。目前人们主要集中在研究哺乳动物来源的细胞外囊泡，而植物外囊泡在形态方面和哺乳动物外囊泡相似，但其组成和功能等方面研究较少。

3、中药丹参指唇形科植物丹参的干燥根和根茎，主产于四川、山东、河北等省区。《神农本草经》称丹参为中药“上品”，其气微，味微苦涩，具有活血祛瘀，通经止痛等功效，主治心绞痛、月经不调，痛经、瘀血腹痛、骨节疼痛。目前，丹参来源的类外泌体纳米囊泡（salvia-derived exosomes-like nanoparticles，selns）在治疗gc性肌病方面的研究未见报道。

技术实现思路

1、本发明解决的技术问题是提供丹参来源类外泌体纳米囊泡（selns）在制备抗gc性肌病药物中的应用。

2、为解决上述技术问题，本发明提供了丹参来源类外泌体纳米囊泡在制备抗gc性肌病药物中的应用。

3、较佳地，所述丹参来源类外泌体纳米囊泡用作肌肉萎缩恢复剂在抗gc性肌病药物中的应用。

4、较佳地，所述gc性肌病由地塞米松所诱发。

5、较佳地，所述gc性肌病由倍氯米松所诱发。

6、较佳地，所述丹参来源类外泌体纳米囊泡的平均直径为182±2.5nm。

7、较佳地，所述丹参来源类外泌体纳米囊泡的制备方法包括：

8、步骤s1、将丹参饮片浸泡到水中进行孵育处理后，过滤处理，得到第一溶液；

9、步骤s2、将所述第一溶液进行第一次离心处理，提取上清液，得到第一上清液；

10、步骤s3、将所述第一上清液进行第二次离心处理，提取上清液，得到第二上清液；

11、步骤s4、将所述第二上清液采用过滤器进行过滤后，进行第三次离心处理，提取上清液，得到第三上清液；

12、步骤s5、将所述第三上清液进行第四次离心处理，提取上清液，得到第四上清液；

13、步骤s6、将所述第四上清液溶液进行第五次离心处理，所得沉淀即为丹参来源类外泌体纳米囊泡。

14、较佳地，所述步骤s1中，所丹参饮片的质量为m克与所述水的体积为v毫升，所述m与所述v之比为1：（8-10）。

15、较佳地，所述第一次离心处理的转速为1000-4000g，时间为10-20min，所述第二次离心处理的转速为4000-6000g，时间为10-20min，所述第三次离心处理的转速为9000-11000g，时间为10-20min，所述第四次离心处理的转速为90000-110000g，时间为70-100min，所述第五次离心处理的转速为90000-110000g，时间为70-100min。

16、较佳地，所述步骤s1中，所述孵育处理的温度为30-60℃，时间为12-24h。

17、较佳地，所述步骤s4中，所述过滤器的孔径为40μm。

18、与现有技术相比，本发明采用超高速离心法获得丹参来源类外泌体纳米囊泡（selns），并通过实验证明，丹参来源类外泌体纳米囊泡具有改善骨骼肌肌管细胞萎缩的效果，可以有效改善糖皮质激素（如地塞米松）所诱发的肌肉萎缩问题，从而提高糖皮质激素临床使用中的安全性，能够应用于制备抗gc性肌病药物。

技术特征：

1.丹参来源类外泌体纳米囊泡在制备抗gc性肌病药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述丹参来源类外泌体纳米囊泡用作肌肉萎缩恢复剂在抗gc性肌病药物中的应用。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述gc性肌病由地塞米松所诱发。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述gc性肌病由倍氯米松所诱发。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述丹参来源类外泌体纳米囊泡的平均直径为182±2.5nm。

6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述丹参来源类外泌体纳米囊泡的制备方法包括：

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述步骤s1中，所丹参饮片的质量为m克与所述水的体积为v毫升，所述m与所述v之比为1：（8-10）。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述第一次离心处理的转速为1000-4000g，时间为10-20min，所述第二次离心处理的转速为4000-6000g，时间为10-20min，所述第三次离心处理的转速为9000-11000g，时间为10-20min，所述第四次离心处理的转速为90000-110000g，时间为70-100min，所述第五次离心处理的转速为90000-110000g，时间为70-100min。

9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述步骤s1中，所述孵育处理的温度为30-60℃，时间为12-24h。

10.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述步骤s4中，所述过滤器的孔径为40μm。

技术总结
本发明涉及生物医药技术领域，具体而言，涉及丹参来源类外泌体纳米囊泡在制备抗GC性肌病药物中的应用；本发明采用超高速离心法获得丹参来源类外泌体纳米囊泡（SELNs），并通过实验证明，丹参来源类外泌体纳米囊泡具有改善骨骼肌肌管细胞萎缩的效果，可以有效改善糖皮质激素（如地塞米松）所诱发的肌肉萎缩问题，从而提高糖皮质激素临床使用中的安全性，能够应用于制备抗GC性肌病药物。

技术研发人员：陈光华,李丽薇,谭小艳,黄贵芝,黄春满,庞景群,李洪强
受保护的技术使用者：广东医科大学附属医院
技术研发日：
技术公布日：2024/5/10