本发明涉及生物医药,具体为红细胞膜纳米盘、制备方法及其在辅助光疗中的应用。
背景技术:
1、 光热治疗(photothermal therapy, ptt)是利用光敏剂将光能转化为热能,从而对肿瘤或细菌等病灶起到治疗作用。然而,光敏剂在疾病部位的渗透较弱,从而限制了光疗效果。
2、“纳米盘”(nanodisc, nd)是一种人工合成的类脂纳米结构,常用于膜蛋白研究、药物递送和疫苗开发等领域。通常来说,纳米盘是粒径小于50 nm且具有双层脂质的扁平圆盘结构,其边缘由苯乙烯-马来酸共聚物(styrene-maleic acid, sma)等稳定包裹脂质双层,使其在水中能够稳定存在。由于大小和形态优势,nd较普通纳米材料能更有效的富集至病灶部位,提高nd在病灶部位的渗透程度。然而,传统以脂质为基础的纳米盘面临潜在的免疫风险,限制了其临床应用。近年来,以细胞膜为主要成分的纳米盘被开发,例如红细胞膜纳米盘被证明具有细菌毒力因子中和作用;血小板膜纳米盘被证明可中和自体抗体;神经细胞膜纳米盘则被证明具有中和神经毒素的作用。尽管如此,细胞膜纳米盘仍未在光疗领域得到应用。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的不足,本发明的目的在于提供一种红细胞膜纳米盘、制备方法及其在辅助光疗中的应用,能够通过纳米盘装载光敏试剂,提高光敏试剂的渗透作用,增强光疗作用。
2、为实现上述目的,本发明提供了如下技术方案:
3、一种红细胞膜纳米盘,包括红细胞膜、装载在红细胞膜上的光敏试剂、包裹在红细胞膜周围的限制物,该限制物用于稳定红细胞膜纳米盘形态。
4、作为本发明的进一步改进,所述限制物为苯乙烯-马来酸共聚物。
5、作为本发明的进一步改进,所述光敏试剂为ir780。
6、一种红细胞膜纳米盘在辅助光疗中的应用,该红细胞膜纳米盘采用如上述任一改进方案的所述的红细胞膜纳米盘,用于增强光敏试剂渗透作用。
7、一种红细胞膜纳米盘的制备方法,包括如下步骤:
8、s1获取红细胞膜;
9、s2在红细胞膜上装载光敏试剂;
10、s3向红细胞膜周围包裹限制物,使其形成纳米盘。
11、作为本发明的进一步改进,所述光敏试剂为ir780。
12、作为本发明的进一步改进,所述限制物为苯乙烯-马来酸共聚物sma。
13、作为本发明的进一步改进,s2包括ir780与红细胞膜按质量比为ir780: 红细胞膜的膜蛋白=2% w/w混合后在37°c恒温箱中孵育,并通过超声得到rbc(ir)-vesicle。
14、作为本发明的进一步改进,s3包括按质量比为sma: 红细胞膜的膜蛋白=5: 1(w/w)将sma与rbcm(ir)-vesicle混合后制备得到rbc(ir)-nd。
15、作为本发明的进一步改进,sma与rbcm-ir-vesicle混合后制备得到rbc-ir-nd的过程包括:
16、红细胞膜终浓度为1 mg/ml,sma终浓度为5 mg/ml,再用探头超声后,并在4°c条件下搅拌过夜,超速离心后上清液用超滤管浓缩之后得到rbc-ir-nd。
17、本发明的有益效果,利用限制物包裹红细胞膜形成纳米盘,利用纳米盘中脂质疏水部分包载光敏试剂,形成具有增强生物渗透与光疗效果的红细胞膜光疗纳米盘新体系。
1.一种红细胞膜纳米盘,其特征在于,包括红细胞膜、装载在红细胞膜上的光敏试剂、包裹在红细胞膜周围的限制物,该限制物用于稳定红细胞膜纳米盘形态。
2.根据权利要求1所述的红细胞膜纳米盘,其特征在于,所述限制物为苯乙烯-马来酸共聚物。
3.根据权利要求1或2所述的红细胞膜纳米盘,其特征在于,所述光敏试剂为ir780。
4.一种红细胞膜纳米盘在辅助光疗中的应用,其特征在于,该红细胞膜纳米盘采用如权利要求1~3任意一项所述的红细胞膜纳米盘,用于增强光敏试剂渗透作用。
5.一种红细胞膜纳米盘的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述光敏试剂为ir780。
7.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述限制物为苯乙烯-马来酸共聚物sma。
8.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,s2包括ir780与红细胞膜按质量比为ir780: 红细胞膜的膜蛋白=2% w/w混合后在37°c恒温箱中孵育,并通过超声得到rbc-ir-vesicle。
9.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,s3包括按质量比为sma: 红细胞膜的膜蛋白=5: 1w/w将sma与rbcm-ir-vesicle混合后制备得到rbc-ir-nd。
10.根据权利要求9所述的制备方法,其特征在于,sma与rbcm-ir-vesicle混合后制备得到rbc-ir-nd的过程包括: