专利名称：：提制抗癌新药“托里埃(Torreya)”方法人工合成抗癌药物，研制费用大，并且付作用大。从植物中筛选，提取抗癌药成为当今的世界潮流。我国中国医学科学院药物研究所也在从事这方面工作。在该所发表的“中国粗榧抗肿瘤有效成分的研究”(《中草药》1981，NO.6P.1～4)一文中报导了粗榧树皮中含有的台湾三尖杉碱，对小鼠白血病L615有微弱作用。海南粗榧(CephalolaxushainaneieLi)为三尖杉属植物。另外在“长叶榧化学成分的研究”(《中药通报》Vol.10NO.41985P.32～33)一文报导了从紫杉科植物长叶榧(Torryajackii)中分离出β-谷甾醇和扁豆脂素之外的豆甾-3-烯-4酮等四种化合物。长叶榧提取物的动物实验发现有降压，舒张血管作用。发明人在抗癌植物筛选研究中首次发现，从香榧又称榧树的树枝中得到的提取物，发明人命名为“托里埃”，它具有抗癌活性，经动物肿瘤实验，具有较好疗效，对小白鼠S180肿瘤抑制瘤率为38～64%，其显著性有效率高达95～99%以上(P值＜0.05～＜0.01)。本发明的目的在于提供一种由香榧树枝提制抗癌新药“托里埃”有效成分的工艺方法，并确定其化学成分。香榧树系裸子植物门，榧树族，榧树属，榧树组榧树(TorreyagandisFort.etLindl)，为我国特有树种，分布在长江以南的贵州，湖南，江西，福建，安徽，浙江及江苏等地。本发明工艺流程为1.原料准备采集新鲜香榧树枝，晒干，粉碎，过20目筛先制成生药粉。2.提取在榧粉生药粉中拌入0～10%碳酸钠和/或Ca(OH)2，用4～12倍体积的甲醇和/或乙醇溶剂，经40～80℃提取2～10小时，得到甲醇和/或乙醇的碱性醇类提取液。当不用碳酸钠和/或Ca(OH)2时，可用生药粉用4～12倍体积的水煎煮，其滤液用甲醇和/或乙醇调整醇度到70%～85%经2～3次提取，过滤，得到甲醇和/或乙醇提取液。3.蒸馏浓缩，把提取液在蒸馏装置中蒸馏浓缩至出现泡沫，停止加热，得到浓缩物，同时回收甲醇和/或乙醇溶剂。4.沉淀在浓缩物中边搅拌边加入8～12倍体积的蒸馏水，用盐酸和/或硫酸酸析，使pH等于2～4，并析出淡黄色沉淀物。对于非碱性溶液浓缩物则加入热饱和醋酸铅水溶液，直至沉淀完全。5.过滤把沉淀物过滤，抽干。6.真空干燥在真空干燥器中真空干燥，得到“托里埃”总提物，得率2～3%。7.分离把“托里埃”总提物用硅胶层析柱分离，以混合洗脱剂洗脱，分别得到“托里埃”1号和“托里埃”2号，得率分别为3‰和9‰。所述的混合洗脱剂是由氯仿，甲醇，丁酮组成的，其配比为氯仿∶甲醇∶丁酮＝16～24∶1～3∶1。分离得到的“托里埃”1号及“托里埃”2号在沈阳化工研究院等有关单位，用核磁共振仪，红外光谱仪，色质联用仪等仪器进行测试，分析检验，确定“托里埃”1号的分子式为C18H10O8，分子量为354.270，结构式如图1所示，图1中的R≡1，命名为托里埃黄酮(Torreyaflavone)。同样确定“托里埃”2号的分子式为C27H26O12，分子量为542.490，其结构式如图2所示。其中鼠李糖的结构如图3所示，它是一种公知的结构。命名“托里埃”2号为托里埃黄酮甙(Torreyaflavonoloside)。图面说明图1为“托里埃”1号分子结构式。图2为“托里埃”2号分子结构式。图3为鼠李糖分子结构式。为了检验“托里埃”1号的抗癌效果，由江西中医院病理研究室进行了小白鼠试验。取传代第10天小白鼠S180瘤株1∶1稀释液，接种健康小白鼠30只，每只腋窝皮下注射0.2毫升。随机分为三组对照组，托1一组，托1二组。于接种瘤株的次日，对照组腹腔注射10%酒精0.2毫升/只，每天1次，连续8天。托1一、二组分别腹腔注射200毫克/公斤/只，100毫克/公斤/只“托里埃”1号，每天1次，连续8天。停药的第二天全部动物脱椎处死，取瘤称重，计算抑瘤百分率，结果列于表1。表1“托里埃”1号对S180瘤株生长的影响表1的结果表明，当“托里埃”1号用药量为200毫克/公斤时，抑瘤率为64%，P值＜0.01。即显效率在99%以上。同样对“托里埃”2号进行小白鼠实验，其结果列于表2表2“托里埃”2号对S180瘤株生长的影响组别剂量(毫克／公斤)途径×天动物数体重变化(克)瘤重(克)抑瘤率％P值始终始终对照组(5～10％酒精)0.2毫克／只ip×814141.88+6.21.43托1－组200毫升／只ip×8101018.4+2.60.6257＜0.05托1二组150毫升／只ip×8101018.3+4.10.8938＜0.05</table></tables>从表2可见，“托里埃”2号对小白鼠S180瘤株的抑瘤率，当用药量为200毫克/公斤时，达57%，P值＜0.05，即显效率在95%以上。实施例11.榧树枝晒干，粉碎，经20目过筛得生药粉(1);2.称取97.5克生药粉和2.5克无水碳酸钠混合均匀(2);3.称取40克拌有无水碳酸钠的生药粉，用500毫升甲醇(C.P)于索氏器提取，温度40～80℃时，最好保持在54～60℃，持续4个小时，得到甲醇提取液(碱性溶液)(3);4.把(3)转入蒸馏装置，回收甲醇溶剂，直至釜内的甲醇提取液出现泡沫，停止加热，冷却后，倒入600毫升烧杯中(4);5.在搅拌条件下，在(3)中加入蒸馏水稀释至500毫升，再加入6N盐酸(C.P)，调节pH至pH＝2～3，即析出淡黄色沉淀，过滤，抽干，真空干燥得“托里埃”总提物(5)，得率为2%～3%。6.把(5)用硅胶层析柱分离，以混合洗脱剂(氯仿∶甲醇∶丁酮＝16∶3∶1)洗脱，分离得到“托里埃”1号和“托里埃”2号。得率分别为3‰和9‰。实施例2同实施例1的原料生粉90份加Ca(OH)2水溶液配成100份，用12倍体积的乙醇，在60～80℃索氏提取10小时，得到乙醇提取液，经蒸馏浓缩至出现泡沫，停止加热，得到浓缩液，同时回收乙醇，浓缩物用蒸馏水稀释，再用6N硫酸调节pH＝3～4，即析出淡黄色沉淀，沉淀经过滤，抽干，真空干燥得到总提物，再用硅胶层析柱分离，以混合洗脱剂氯仿∶甲醇∶丁酮＝20∶2∶1洗脱，得到“托里埃”1号及“托里埃”2号，得率2～3‰。实施例31.生药粉300克加入2000克水煎煮4小时，超热过滤，得滤液(1)。把(1)浓缩至400毫升，在搅拌下加入乙醇至溶液醇度达70%，得乙醇液(2)，静置过夜。2.乙醇液(2)过滤，得滤液(3)。3.把滤液(3)回收溶剂，浓缩至500毫升，在搅拌下加入乙醇使溶液醇度达85%，得乙醇液(4)，静置过夜。4.醇液(4)过滤，回收溶剂，浓缩得浓缩液500毫升(5)，以热饱和醋酸铅水溶液加入(5)中，直至沉淀完全(6)。5.将(6)过滤，得黄色沉淀(7)和滤液(8)。6.把(7)溶于400毫升无水乙醇中，用87%H2SO4脱铅，再以6NNaOH中和至pH～7，过滤，浓缩，得托里埃粗提物，得率1%。7.把滤液(8)用8%H2SO4脱铅，再以6NNaOH中和至pH～7得托里埃粗提物，得率2%。8.托里埃粗提物都用硅胶层析柱分离，以氯仿∶甲醇∶丁酮＝24∶1∶1无混合洗脱剂洗脱，分别获得托里埃1号和托里埃2号。权利要求1.一种提制抗癌新药“托里埃”的方法，本发明的特征在于以香榧树枝为原料，先制成生药粉，拌入0～10%无水碳酸钠和/或氢氧化钙，用8～12倍体积的醇类溶剂索氏提取，提取温度40～80℃，持续2～6小时得到醇类提取液，提取液蒸馏浓缩至出现泡沫得到浓缩物，在浓缩物中加入8～12倍体积的蒸馏水，用盐酸和/或硫酸酸析，使pH为2～4，析出沉淀，在非碱性溶液中则加入热饱和醋酸铅水溶液，直至沉淀完全，过滤沉淀，抽干，真空干燥得到总“托里埃”提取物，用硅胶层柱分离总提物，以混合洗脱剂洗脱，分别得到“托里埃”1号及“托里埃”2号。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于香榧树枝是新鲜的，经晒干，粉碎，过20目筛制取生药粉。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于醇类溶剂是指甲醇和/或乙醇。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于最佳提取温度为54～60℃，持续4小时。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于用6N盐酸调节pH至2～3。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于用6N硫酸酸析，调节pH至3～4。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于用10倍体积的水煎煮生药粉，过滤得滤液，滤液浓缩后加入乙醇，达到醇度为70%～85%提取，过滤后的乙醇溶液经浓缩并回收溶液，在浓缩液中加入热饱和醋酸铅水溶液，直至沉淀完全，得黄色沉淀和滤液，沉淀溶于无水乙醇，再用80%H2SO4脱铅，再以6NNaOH中和至pH＝7，过滤，浓缩得“托里埃”提物;滤液用8%H2SO4脱铅，再以6NNaOH中和至pH＝7，得“托里埃”提物。8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于混合洗脱剂中氯仿∶甲醇∶丁酮＝16～24∶1～3∶1。9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于蒸馏浓缩的同时回收甲醇和/或乙醇。10.由权利要求1的方法提取的化合物为“托里埃”1号的分子式为C18H10O8，分子量为354.270，图1为其结构式，命名为托里埃黄酮(Torreyaflavone)，“托里埃”2号的分子式为C27H26O12，分子量为542.490，图2为其结构式，命名“托里埃”2号为托里埃黄酮甙(Torreyaflavonoloside)，它们的抗癌显效率为95～99%。全文摘要一种提制抗癌新药“托里埃”的方法，其主要特征在于以香榧树枝为原料，经提取，蒸馏，浓缩，酸析、沉淀，真空干燥的方法得到总提物，再用硅胶层柱分离总提物，以混合洗脱剂洗脱，制得“托里埃”1号及“托里埃”2号。对小白鼠的抗肿瘤实验证明，“托里埃”的抗癌P值＜0.01，即显效率＞99％。文档编号A61K31/35GK1046904SQ9010158公开日1990年11月14日申请日期1990年3月20日优先权日1990年3月20日发明者曾国洲,王延申请人:中国人民解放军南昌陆军学院