专利名称：抗病毒剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及含有杂多钨酸盐的药物组合物及其药物上可以接受的衍生物，以及这些化合物在治疗或预防病毒感染上的应用，该病毒是黄热病病毒科(Flavivirridae)的确知的或者是可能的一员，这类病毒感染例如是黄热病、登革热、澳州脑炎、日本脑炎，及肝炎C。
已经知道黄热病病毒是无数人类疾病的起因，这些疾病包括人类最重要的肢节动物承受的病毒折磨-登革、黄热病、及日本脑炎。此外，八种黄热病病毒在有重要经济意义的驯养或野生动物中可引起疾病。黄热病和登革热很普遍，并且已知是蚊子传播引起的热带国家疾病。每年有3千万至4千万而黄热病病毒感染者，其中包括1百万日本脑炎感染者。肝炎C的感染范围不能确切知道，因为在病人没有感到症状的情况下感染可以存在许多年，比起肝炎B，肝炎C产生慢性肝感染的速率要高得多，而肝炎B在许多国家已经是公认的危险病了。与受肝炎B感染为5至10%相比较，大约有50%的病人发生慢性感染。慢性感染引起肝硬化，损伤肝功能，并在20-30年之后引起肝的衰竭。已经估计到，其感染的速率已经达到和可能超过澳大利亚人口的1%。对于肝炎C来说，没有已证实的治疗方法或疫苗。
供应的某些疫苗只对某些病毒有效例如黄热病，日本脑炎和蜱传播的脑炎。治疗登革热和澳州脑炎取决于病人自身的免疫保护能力;感染有可能是致死的。
因此强烈地需要一种抗病毒药物以控制由黄热病病毒造成的感染。能控制或抑制复制的药物已经证明在控制某些其它的病毒中是有效果的。然而，由于难以达到在抑制病毒的同时还能使非感染的细胞不受损害。因此，近来还没有在临床中广泛使用的抗病毒药物。
该黄热病病毒科(Flaviviridae)是近来被确认的较小的已包封病毒的一个大组(超过70种)，这种病毒含有一个10千基正觉RNA的单股，由于上述提到的困难和近来确认黄热病病素是具有独特复制对策的独特的一组，因此没有对控制黄热病病毒感染抗病毒化合物加以注意。
所有的黄热病病毒科具有独特的复制对策，而该复制对策可以被本发明的组合物所抑制。已被提出包括在复制过程中的非结构性基因NS3和NS5，占有大部分的种间顺序相似性，因此，复制过程的抑制剂应对所有的黄热病病毒有效。
对于杂多钨酸盐化合物类人们知悉已有100多年了，其大部分用途是由于它们的氧化还原化学和它们的高离子重量和离子电荷而引起的。它们的氧化还原导致它们作为有机物质的氧化反应的催化剂来使用，例如，使丙烯变成丙烯酸，使乙烯变成乙醛。在生物领域中，已经发现杂多钨酸盐作为电子显微镜的电子反差强染色剂来使用，用作蛋白质的分析试剂，并且有几种已经表现出可以抑制病毒的DNA和RNA聚合酶(J.C.Cherman等人，BiochemBiophys.ResCommun.，1975，65，1229;M，Herve等人，Ibid，1983，116，222.)。
在本发明范围中的杂多钨酸盐包括Keggin和Dawson(也称之为Wells-Dawson)型结构和基于这些结构的化合物，在其中的一种或多种，钨原子被除去，并且，在多数情况下，钨原子被其它的金属原子所交换，在这些结构中的空位，通常由于从Keggin(XW12O40n-)或Dawson(P2W18O626-)类中萃取出WO4+或W3O66+而产生了。由于空位的配置，这些不饱和的(空隙)多阴离子的异构物是可能的(R.Massart R.Contant，J.M.Fruchart，J.M.Ciabrini，M.Fournier，Inorg.Chem.1977，16，2916;T.L.Jorris，M.Kozik，N.Casan-Pastor，P.J.Domaille，R.G.Finke，W.K.Miller和L.C.W.Baker，J.Am.Chem.Soc.1987，109，7402;T.J.R.Weakley，Polyhedron 1987，6，931R.Contant和J.P.Ciabrini，J.Chem.Res.(S)，1977，222;R.G.Finke，M.W.Droege和P.J.Domaille，Inorg.Chem.，，1987，26，3886;M.T.Pope，“Heteropoly and Isopoly Oxometalates”，Springer-Verlag，Berlin，1983.)在P2W17O6110-中的空缺位置，用词头α1-来定义带式空位，或用词头α2-来定义盖式空位。在该结构中，W3-氧化物三原子的转动导出许多异构体。因此，W3三原子盖的60℃转动能够例如将α-异构体转化成β-异构体。在XW9O34n-，型三空位多阴离子中，得到了A-或B-型，这取决于与角落连接的W3氧化物三原子是失去(A-型)，或者与边缘连接的W3氧化物三原子是否已经除去(B-型)。
不饱和的杂多阴离子可以通过在其空缺位置与金属离子的键合作用而起配位体的作用。这些金属离子，当不是空间密集时，则可以带有配位体例如水，有机配价种属或有机金属基团。有机金属部分也可以与在例如三取代的Keggin或Dawson结构上的暴露的氧原子进行反应(R.G.Finke和M.W.Droege;J.Am.Chem.Soc.，1984，106，7274;以及R.G.Finke，B.Rapko和P.J.Domaille，Organometallics1986，5，175)在Keggin结构上的某些氧原子也可以用试剂例如三甲基氧鎓盐进行烷基化作用(W.H.Knoth和R.L.Harlow，J.Am，Chem.Soc.1981，103，4265)，在杂多钨酸盐中的一些氧原子还可以交换为氟原子(F.Chauveau，P.Doppelt和J.Lefebvre，Inorg，Chem，1980，19，2803;T.J.Jorris，M.Kozik和L.C.W.Baker，Inorg.Chem.1990，29，4584)。
其它的杂多阴离子种属可以通过将二个W5O18H5-离子与金属离子，例如镧系元素进行反应而生成(R.D.Peacock和T.J.R.Weakley，J，Chem.Soc.A，1971，1836)具有PW7磷钨酸盐基团的杂多阴离子(一般用磷酸盐桥接)是人们所知道的(J.Fuchs和R.Palm，Z.Naturforsch.1988，43b，1529以及R.Acerete，J.Server-Carrio，A.Vegas和M.Martinez-Ripoll，J.Am.Chem.Soc.，1990，112，9386)。
在化合物中的中心原子，特别是在简单Keggin型结构中的中心原子，可以在很宽的范围内变化。在Dawson型结构中，其中心原子大多数是磷。
在溶液中，杂多钨酸盐通常比相应的杂多钼酸盐更稳定。其它金属的杂多化合物，例如铌和钒，也已经制备出来，但通常只是在更加受限制的PH范围内是稳定的。
目前，我们有了意外的发现，即含有一个“中心”(在以下列举的结构类型实例中用X表示)的杂多钨酸盐多阴离子，对属于黄热病病毒科是活泼的，特别是它们能抑制这类病毒的复制作用，停止某种感染的发展。
按照本发明，提供了用于治疗和预防与黄热病毒有关系的一类组合物，它们含有由以下的1至12的通式所选择出的一种或多种杂多钨酸盐化合物活性组分，或它们的药物上可接受的衍生物。本发明的化合物是多阴离子，以及为了电中性所连接的阳离子(A)，它们是结晶，含有可变化数目的结晶水分子，这取决于产品的回收条件和其后的处理方法，所有的这些水合物都包括在本发明的范围内。
“药物上可接受的衍生物”是指任何的药物上可接受的盐类或任何的其它化合物，它们在病者服用时，能够提供(直接或间接地)本发明的化合物或它的活性代谢物或残留物。
本发明的药物组合物可以包括由通式1至12所选择的一种或多种化合物，以及一种或多种药物上可接受的载体或稀释剂，而且也可以包括其它治疗剂。每种载体必须是药物上“可接受的”，即与组合物的其它组分是配伍的并且不会损伤病人。应该理解，除了特别提到的组分，本发明组合物可以包括所讨论的这类组合物现有技术中所惯用的其他剂类，例如，适用于口服的可以包括这类其它试剂，例如增甜剂、增稠剂及香味剂。
组合物包括了适于口腔、直肠、鼻、局部(包括口内和舌下)、阴道或肠胃外(包括皮下、肌内、静脉和皮内)服用的组合物。该组合物通常可以以单位剂量形式存在，而且可以用药物领域中已知的任何方法来制备。该方法包括将活性组分与载体相结合这一步骤。该载体构成一种或多种辅助组分。一般，该组合物通过将活性组分与液体载体，或微细的固体载体，或二者兼有的载体，均匀地和紧密地进行结合，然后，如果必要，将产品成形。
本发明还提供一种治疗或预防与黄热病病毒有关的感染的方法，它包括服以含有有效量的由分子式1-12中选择出的一种或多种化合物的组合物。
这些化合物可以用文献中的方法来制备，或者作些改变，即改变为得到该目标化合物所需的反应物和反应条件。说明许多这类化合物的制备方法，结构和性质的一般评论文章包括P.Souchay，“IonsMinérauxCondensés”，Masson，Paris，1969;M.T.Pope，'HeteropolyandIsopolyOxometalates”，Springer-Verlag，Berlin，1983;T.J.R.Weakley，StructureandBonding，Springer-Verlag，Berlin，1974，18，131;M.T.Pope与A.Müller，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1991，30，34.
用来作为活性组分的本发明化合物，以如下通式1-12列出，并列出每种副型的适宜制备方法。
A.基于Keggin结构的化合物1.)An[YMXW11O39]其中X＝BⅢ，PⅤ，SiⅣ，GeⅣ，ZnⅡ，CoⅡ，CoⅢ，FeⅢ，GaⅢ，TiⅣ，或ZrⅣ.
M＝MnⅡ，MnⅢ，FeⅡ，FeⅢ，CuⅡ，CoⅡ，CoⅢ，GaⅢ，NiⅡ，ZnⅡ，TiⅣ，ZrⅣ，AlⅢ，InⅢ，VⅣ，VⅤ，MoⅥ，PbⅡ，NbⅤ，Y＝配位体(如H2O，OH-，O2-，NH3，NCS-，NO2-，CN-，SO32-，芳香族/脂肪族胺，或环戊二烯基。)这些化合物可以按下列文献中所说明的方法来制备，如
C.M.Tourné，G.F.Tourné，S.A.MalikandT.J.K.Weakley，J.inorg.nucl.Chem.1970，32，3875-3890和其中引用的对比文献;M.Bauchet，C.M.Tourné和G.Tourné，C.R.Acad.Sci.Paris，1972，C275，407;F.Zonnevijlle，C.M.Tourné和G.F.Tourné，Inorg;Chem.1982，21，2742，2750，2751-2757及其中引用的对比文献;P.J.Domaille，J.Am.Chem.Soc.，1984，106，7677;T.J.R.Weakley，J.Chem.Soc.，DaltonTrans.1973，341;L.C.W.BakerandT.P.McCutcheon，J.Am.Chem.Soc.1956，78，4503及其后的文章，;M.Michelon和G.Hervé，C.R.Acad.Sci.Paris，1972，C274，209J.Liu.W.Wag，Z.Zhu，E.Wang和Z.Wang，TransitionMet.Chem.1991，16，169;F.Ortéga和M.T.Pope，Inorg.Chem.1984，23，3292.环戊二烯基化合物的制备方法见R.K.C.Ho和W.G.Klemperer，J.Am.Chem.Soc.1978，100，6772或W.H.Knoth，J.Am.Chem.Soc.1979，101，2211.
2.)An[M(XW11O39)2]其中X＝GaⅢ，PⅤ，SiⅣ，GeⅣ，or TiⅣ.
M＝LaⅢ，CeⅢ，CeⅣ，PrⅢ，SmⅢ，NdⅢ，EuⅢ，GdⅢ，TbⅢ，DyⅢ，HoⅢ，TmⅢ，或YbⅢ.
该化合物可以按下列文献给出的方法来制备即J.Liu，W.Wang.Z.Zhu，E.Wang和Z.Wang，TransitionMet.Chem.1991，16，169及其中的参考文献;Gh.Marcu和M.Rusu，Rev.Roum.Chim.1977，22，227;
3.)An[XM2W10O40]式中X＝PⅤ，SiⅣ，或VⅤ.
M＝TiⅣ，ZrⅣ，VⅤ，ZnⅡ，CoⅡ，FeⅡ，或FeⅢ.
这些化合物可以按下列文献中的方法来制备
P.J.Domaille，Inorg.Synth.，1990，27，102-104.(Ed.A.P.Ginsberg)Whiley-Interscience和在其中引用的对比文献;J.Canny，R，Thouvenot，A.Tézé，G.Hervé，M.Leparulo-Loftus和M.T.Pope，Inorg.Chem.1991，30，976;P.J.Domaille和W.H.Knoth，Inorg.Chem.1983，22，818;C.M.Tourné和G.F.Tourné，J.Chem.Soc.DaltonTrans.1988，2411;C.M.FlynnJr.和M.T.Pope，Inorg.Chem.1971，10，2745.
4.)An[XM3W9O40]其中X＝PⅤ，FeⅢ，SiⅣ，or VⅤ.
M＝VⅤ，FeⅢ，NbⅤ，CrⅢ，ZrⅣ，or TiⅣ.
这类化合物可以按下列给出的方法来制备P.J.DomaiLle，J.Am.Chem.Soc.，1984，106，7677;R.G.Finke，C.A.Green和B.Rapko，Inorg，Synth.，1990，27，129.(Ed.A.P.Ginsoerg)Whiley-Interscience和在其中引用的对比文献P.Jun，Q.Lun-yu和C.Ya-guang，Inorg.Chim.Acta1991，183，157;D.J.Edlund，R.J.Saxton，D.K.Lyons和R.G.Finke，Organometaliics1988，7，1692;C.M.FlynnJr.和M.T.Pope，Inorg.Chem.1971，10，2745.
B.基于Dawson结构的饱和化合物5.)An[X2MW17O62]式中X＝PⅤ.
M＝CoⅡ，CoⅢ，NiⅡ，ZnⅡ，MnⅡ，MnⅡ，FeⅢ，AlⅢ，GaⅢ，InⅢ，TiⅣ，ZrⅣ，VⅤ，MoⅥ，或η5-RC5H4Ti，其中R＝有机残基该化合物可以用下列的反应来得到
S.A.Malik和T.J.R.Weakley，J.Chem.Soc.，Chem.Commun.1967，1094;J.Chem.Soc.(A)，1968，2647;D.K.Lyon，W.K.Miller，T.Novet，P.J.Domaille，E.Evitt，D.C.Johnson和R.G.Finke，J.Am.Chem.Soc.1991，113，7209和在其中引用的对比文献;J.F.W.Keana和M.D.Ogan，J.Am.Chem.Soc.1986，108，7951.
6.)An[M(X2W17O61)2]其中X＝PⅤM＝EuⅢ，CeⅢ，CeⅣ，SmⅢ，或其它稳定的镧系金属离子。
该化合物可以用下列的反应来得到R.D.Peacock和T.J.R.Weakley，J.Chem.Soc.(A)，1968，1836;A.V.Botar和Rev.Roum.Chim.1973，18，1155;Gh.Marcu，M.Rusu和A.V.Botar，Rev.Roum.Chim.1974，19，827.
7.)An[X2M3W15O62]其中X＝PⅤ.
M＝VⅤ，TiⅣ，MoⅥ，或NbⅤ当M＝V时，这些化合物可以用下列方法制备，即R.G.Finke，B.Rapko，R.J.Saxton和P.J.Domaille，J.Soc.1986，108，2947，当M＝Nb时，该化合物、该单体和二聚物可以按照下列方法制备D.J.Edlund，R.J.Saxton，D.K.Lyons和R.G.Finke，Organometallics1988，7，1692。
当M＝Mo时，该化合物可以按照下列方法制备J.P.Ciabrini，R.Contant和J.M.Fruchart，Polyhedron1983，2，1229。
C.化合物，其中二种或三种三空位的A或B-XW9O34n-或二个B-X2W15O56n-多阴离子通过过渡金属或镧系金属离子来连接。
8.)An[M4(H2O)y(XW9O34)2]其中X＝PⅤ，FeⅢ，ZnⅡ，或CoⅡ，M＝MnⅡ，FeⅡ，CoⅡ，NiⅡ，CuⅡ，ZnⅡ，ZrO，[FeCu]1/2，[WZn3]1/4，[WZnMnⅡ2]1/4，[WZnMnⅢ2]1/4，[WMnⅡ3]1/4，[WMnⅢ3]1/4，[WFeⅡ3]1/4，[WFeⅢ3]1/4，[WNiⅡ3]1/4，[WCuⅡ3]1/4，[WZnVⅣ2]1/4，[WZnⅡFeⅡ2]1/4，[WZnⅡCoⅡ2]1/4，WNi3Ⅱ，[WZnⅡNiⅡ2]1/4，[WZnⅡVⅣ2]1/4，[WZnⅡPdⅡ2]1/4，[WCo3Ⅱ]1/4，[WCoⅡMnⅡ2]1/4，[WCoⅡFeⅢ2]1/4，[WCoⅡNiⅡ2]1/4，或[WCoⅡZnⅡ2]1/4.
y是1-6，最通常是2。
这些化合物可以按照下列方法来制备H.T.Evans，C.M.Tourné，G.F.Tourné和T.J.R.Weakley，J.Chem.Soc.DaltonTrans.，1986，2699R.G.Finke，M.W.Droege和P.J.Domaille，Inorg.Chem.，1987，26，3886;S.H.Wasfi，A.L.Reingold，G.F.Kokoszka和A.S.Goldstein，Inorg.Chem.，1987，26，2934;C.M.Tourné，G.F.Tourné和F.Zonnevijlle，J.Chem.Soc.DaltonTrans.1991，143.
9.)An[(FeOA)4(PW9O34)2]这些化合物可以通过将△-Na8HPW9O34与乙酸铁(Ⅲ)的1∶2摩尔比含水混合物，按照专利申请PCT/AU91/00280所说明的方法，进行回流来制备。该多阴离子的结构是尚未知道的。用ICP分析方法，例如钾化合物的分析，得到K∶P∶F∶W的比例是7∶1∶2∶9。曾经试图测定铵盐的晶体结构，但是该结晶质量不够好以使得多阴离子中的原子被确切定位。单位晶格的尺寸经测定是32.36×27.30×24.42
，而b＝112.28°。
10.)An[Ma(XW9O34)2]其中X＝PⅤ，或SiⅣ.
如a＝1或2，M＝WO2如a＝3，M＝Zr(OH)，CeO，Cu，Cu(NO3)1/3，Cu(NO2)1/3，WO2，ZnⅡ，MnⅡ，MnⅢ，FeⅡ，FeⅢ，NiⅡ，CoⅡ，[Fe2(WO2)]1/3，[FeCo(WO2)]1/3，[CoⅡCuⅡWO2]1/3，[CuⅡ2CoⅡ]1/3，[CuⅡ2CoⅡNO3]1/3，[Zn2(WO2)]1/3，[Ni2(WO2)]1/3，[Co2(WO2)]1/3，或[η-C5H5TiⅣ(OH2)].
该类化合物可以按照下列说明的方法来制备R.G.Finke，B.Rapko和T.J.R.Weakley，Inorg.Chem.1989，28，1573和在其中引用的对比文献;C.Tourné，A.Revel和G.Tourné，Rev.Chim.Minerale 1977，14，537([Co2(WO2)]1/3);C.M.Tourné和G.F.Tourné，J.Chem.Soc.Dalton Trans.1988，2411.
11.)An[Co9(OH)3(H2O)6(HPO4)2(PW9O34)3]可以按下列给出的方法来制备T.J.R.Weakley，J.Chem.Soc.，Chem.Commun1984，1406;J.Chem.Soc.，DaltonTrans.，1986，2699。
12.)An[M4(H2O)2(X2W15O56)2]WhereinX＝PⅤM＝MnⅡ，FeⅡ，CoⅡ，NiⅡ，CuⅡor，ZnⅡ.
这些化合物可以按下列的一般方法来制备R.G.Finke，M.W.Droege和P.J.Domaille，Inorg，Chem.，1987，26，3886。
当此钴化合物(如钠盐)在水溶液中加热至80-90℃几小时后，在冷却到室温时由溶液中结晶出的红-棕色化合物称作此化合物的“高温”型。
在通式为1-12的化合物中，当过渡金属原子取代结构式中的一个或多个钨原子时，在过渡金属原子上的氧可以或是双质子化的(H2O)，单质子化的(OH)，或是完全脱质子的(O)，正如钨酸盐化学技术领域熟练人员所知的，这些质子的酸性和所得到的化合物，取决于过渡金属原子的性质，它的氧化态，所形成的多阴子的碱性、以及从其中分离出化合物的溶液的碱性等。在本发明的化合物中，并不是所有的氧原子都必须成为氧基团，并且，在多阴离子上的电荷(从而也是相反的阳离子(A)的数目)将取决于连接在氧原子上的质子数目。此外，含有基团例如MOH的化合物可以通过分子内的缩合反应而二聚化。所列举的化合物的二聚物类，若生成的话，也包括在本发明中。
本发明的许多化合物可以生成许多种异构体。事实上，为了得到异构化的纯化合物，有时是困难的。所有的异构体或异构体混合物都包括在本发明中。
很多本发明的化合物会发生-电子还原或多电子还原。已还原化合物也包括在本发明中。
在多阴离子上的电荷可以变化，这要取决了多阴离子的质子化程度(如前面所指出的)和金属原子的氧化状态。所连的相反阳离子(A)的数目也将相应地变化。A可以是质子，碱金属离子，碱土金属离子，或铵离子，或类型为R4-nHnN+类型的烷基铵离子，其中的R是含1到6个碳原子的烷基链。所需要的阳离子一般或者是利用离子交换树脂，或者是利用过量的这种阳离子盐的沉淀作用而引入到化合物中。
杂多阳离子化学技术领域的熟练人员应该注意，并不是通式1-12所给出的元素的所有结合都是可分离的。
适于口服的本发明的化合物可以以分离的单元提供，如胶囊，小袋或片剂，它们每种形式均含有预定量的活性组分;也可以作为粉状或粒状提供;以溶液，或以在含水液体或非水液体中的悬浮液提供;或以水包油乳化液或油包水乳化液提供。该活性组分也可以作为大丸剂、干药糖剂或糊剂提供。
片剂可以用压制或模制来制备，也可带有一种或多种附加组分。压制的片剂可以通过在适当的机器内，将以自由流动形式存在的活性组分，如粉末或细粒压制而得。该活性组分也可混有粘结剂(如惰性稀释剂)，防腐崩解剂(如乙醇酸淀粉钠、交联的povidone，交联的羧甲基纤维素钠)、表面活性剂或分散剂。模压的片剂可以通过在适宜的机器内，将用一种惰性液体稀释剂润湿的粉状化合物的混合物进行模压来制备。该片剂也可以进行涂敷或刻上记号，并且也可以进行配制以使其中的活性组分缓慢地或控制地释出，例如，加入不同比例的羟丙基甲基纤维素可以提供所需要的释放能力。该片剂也可以带有肠涂层的形式来提供，以使在肠的部分中而不是在胃中释放。
适于在口中作局部服用的组合物包括以下几种糖锭，它包含在香味基质中的活性组分，香味基质通常是蔗糖，阿拉伯胶，或黄蓍胶;锭剂，它包含在惰性基质(如明胶和甘油，或蔗糖和阿拉伯胶)中的活性组分;以及漱口物，它包含在适当液体载体中的活性组分。
适于直肠服用的组合物可以以带适当基质的栓剂提供，该基质包括例如可可脂或水杨酸盐。
适于阴道使用的组合物可以作为下列形式提供，例如，阴道栓剂，霜剂，凝胶状物，糊状物，泡沫状物或者是气雾剂，它们除包含活性组分之外还包含本技术领域中的人们所知道的适当载体。
适于肠胃外服用的组合物包括含水的或非水的等渗无菌注射液，后者可以含有抗氧化剂，缓冲剂;抑菌剂及溶质，后者使组合物与病者的血液等渗;并包括含水的或非水的无菌悬浮液，该悬浮液可以含有悬浮剂和增稠剂，该组合物可以放在单位剂量封闭容器中或多剂量封闭容器中，例如安瓿和小瓶，并且可以在冷冻干燥(冻干法)的条件下保存，只需要恰在使用之前加入无菌液体载体，例如注射用水。也可由如前所说的无菌粉末、粒状物及片剂来制备临时的注射液和悬浮液。
优选的单位剂量组合物是那种组合物，它含有活性组分的上述每天剂量或单位每天次级剂量，或含有它的适当的部分。
按照本发明，该组合物也可以制成兽药组合物的形式，它可以例如通过本技术领域中的常用方法来制备，这类兽药组合物的实例包括适用于以下方面的那些(a)口服，外用，例如，灌药(如含水或非水溶液或悬浮液);片剂或团块;与饲料相混合的粉状物、粒状物、或丸状物;用于舌内的糊状物。
(b)肠胃外使用，如通过皮下、肌内或静脉注射，例如作为无菌液或悬浮液;或(当适当时)通过乳房内注射，将悬浮液或溶液通过乳头注射入乳房中;
(c)局部使用，例如用于皮肤的霜剂软膏或气雾剂。
(d)阴道内用，例如阴道药栓，霜剂或泡沫。
应该理解，除了上述特殊提到的组分之外，本发明的组合物可包括技术领域中常用的试剂，例如，适于口服的那一类可以包括增甜剂，增稠剂和香味剂这些另外的试剂。
服用和剂量按照本发明的组合物可以通过任何适当的途径来治疗，包括口服，直肠，鼻，局部(包括口内和舌下)，阴道和肠胃外(包括皮下，肌内，静脉及皮内)，优选的是通过口服途径来治疗，然而优选的途径最好随患者的病况和年龄，组合物的性质，以及所选择的活性组分而变化。
一般，活性组分的适当剂量，按患者每公斤体重计，每天为3.0到120mg的范围，优选的剂量每天按患者每公斤体重计，每天为6到90mg的范围，而更为优选的是，按患者每公斤体重计，每天为15到60mg。所需要的剂量最好制成2，3，4，5，6或更多的副剂量，在全天的适当间隔内服用。这些副剂量可以以单位剂量形式来服用，例如，每单位剂量形式含有10至1500mg，优选的是20至1000mg，更为优选的是50至700mg的活性成份。
最理想的是，活性成分应该如此服用以达到活性化合物的峰值血浆状浓度为大约1至100μM，优选的为大约2至50μM。这是可以达到的，例如，可通过静脉注射0.1至5%活性组分的溶液，优选盐水溶液，或口服含有大约0.1至大约100mg/Kg的活性组分的大药丸。所需要的血液水平可以通过连续输注含大约0.4到大约15mg/mg的活性组分来保持。
下面提供的实施例只是作为说明，而不是以任何方式对本发明范围的限制。在实施例3到6所用的术语“活性组分”指的是一种或多种选自分子式1-12的化合物或者其药物上可以接受的衍生物。
实施例1本发明组合物制备了表1所列出的化合物，并按下列实施例2所说的将它们溶解在作为试验用双倍蒸馏水中。
表1
实施例2抗病毒活性对在实施例1列出的化合物进行了在玻璃试管中聚合酶被测物内抑制RNA合成能力的检测(Chu和Westaway，1985，1987;Brun和Brinton，1986)。在该测定物中，通过加入[α-32P]GTP，而检测出黄热病病毒RNS，后者含有基因44S RNA，双股复制型(RF)，部分双股复制中间物(RI)。
A.制备病毒感染的Vero细胞浸出物用登革2型(DEN-2)病毒(NewGuineaC菌株;Sabin和Schlesinger，1945)或Kunjin病毒(KUN)(菌株MRM61C;Boulton和Westaway，1972)重复感染7次而将Vero细胞感染。当聚合酶的活性在最大值时，在30-60hp.i.，制备含有依赖于RNA的RNA聚合酶(RDRP)的由DEN-2病毒感染细胞得到的浸出液。同样，在最大聚合物活性时，在24hp.i.，制备KUN病毒感染细胞的浸出物(Chu和Westaway，1985)。
将细胞通过离心作用制成丸状并再悬浮在10mM的乙酸钠中，浓度为2×107细胞/ml，然后将它们通过量器21的针20次，再通过量器26的针20次，以将其破碎。将此已破碎细胞以800g离心7分钟，以得到上面的清液部分和与核相联系的物质的片状物。用上部的清液部分测定所有的RDRP，此上部清液部分在下文中称之为细胞浸取物，将它在-70℃下贮存，并在仅进行一次冷冻/熔化循环之后即使用。
B，依赖于RNA的RNA聚合酶测定按照前述的方法测定细胞浸取物中的RDRP的活性，但有下列改进(Chu和Westaway，1985)。在每个RDRP的测定中，该病毒感染细胞浸取物含有4.5-6mg/ml的蛋白质。在加入进行RDRP测定所需的其它组份之前10分钟，将被检测的化合物溶在双倍蒸馏水中，并把RNasin(0.5单位/ml，Promaga)加入到细胞浸出物中。该最终的反应混合物(总体积为50μl)含有50mM的三羟甲氨基甲烷-HCl PH为8.0，10mM的乙酸镁，7.5mM的乙酸钾，10mM的2-巯基乙醇，6μg的放线菌素D(AMD)，5mM的膦酸烯醇丙酮酸，3单位/μl丙酮酸致活酶，0.5mM ATP，0.5mM CTP，0.5mM UTP，25μM GTP，5μCi[α-32P]GTP(Amersham，specific activity 410 Ci/mmol)，0.5单位/ml的RNasin，30μl已感染的细胞浸取物，及被检测化合物(由0.5至100μM)。该反应在37℃30分钟后通过加入EDTA至最终浓度为10mM而使反应终止。将等体积的TNE-SDS(50mM的三羟甲氨基甲烷-乙酸盐PH7.6，0.1M乙酸钠，1mM的EDTA及2%的SDS)加入其中以破裂其膜，然后用苯酚萃取RNA并用乙醇把它沉淀出来。
C.RNA的电泳将RNA样品与含有溶在TBE(89mM的三羟甲氨基甲烷-HCl，89mM的硼酸，2.5mM的EDTA)中的7M尿素的缓冲液样品，以及0.5%的溴酚蓝相混合，然后电泳通过含有溶在TBE中的7M尿素的3%聚丙烯酰胺凝胶而进行分离。该凝胶被固定在10%的乙酸中，将其干燥，并利用自动射线照相法检测射线标记带。
结果进行试验的化合物同时抑制DEN-2和KUNRFRNA的合成，提高药物浓度则降低了所检测的RI的量，抑制浓度见于表I。
参考文献BQULTON，R.W.ANDWESTAWAY，E.G.(1972).
ComparisonsofTogavirusesSindbisvirus(GroupA)andKunjinvirus(GroupB).Virology49，283-289.
CHU，P.W.G.ANDWESTAWAY，E.G.(1985).
ReplicationstrategyofKunjinvirusevidenceforrecycling，roleofthereplicativeformRNAastemplateinsemiconservativeandasymmetricreplication.Virology140，68-79.
CHU，P.W.G.ANDWESTAWAY，E.G.(1987).
CharacterizationofKunjinvirusRNA-dependentRNApolymerasereinitiationofsynthesisinvitro.Virology157，330-337.
GRUN，J.B.ANDBRINTON，M.A.(1986).
CharacterisationofWestNilevirusRNA-dependentRNApolymeraseandcellularadenylylanduridylyltransferasesincell-freeextracts.JournalofVirology60，1113-1124.
SABIN，A.B.ANDSCHLESINGER，R.W.(1945).
Productionofimmunitytodenguewithvirusmodifiedbypropagationinmice.Science101，640-642.
实施例3片剂配制物下列的配制物A可通过使用Povidone溶液将组分进行湿润成粒，然后加入硬脂酸镁并压制而制成。
配制物Amg/片(a)活性组分250250(b)乳糖B.P.21026(c)PovidoneB.P.159(d)乙醇酸淀粉钠2012(e)硬脂酸镁53500300下列的配制物B可通过将混合组分直接压制而制备配制物Bmg/胶囊活性组分250预胶凝化的NF15150400配制物C(控释配制物)该配制物可以通过用Povidone溶液将组分(如下)进行润湿造粒，然后加入硬脂酸镁并压制而制备。
mg/片剂(a)活性组分500(b)羟丙基甲基纤维素(methocelK4MPremium)112(c)乳糖53(d)PovidoneB.P.C.28(e)硬脂酸镁7700实施例4胶囊配制物配制物A胶囊配制物可以通过将上述实施例3中的配方B的组分进行混合，并装填到双片式硬凝胶胶囊而制备配制物Bmg/胶囊(a)活性组分250(b)乳糖B.P.143(c)乙醇酸淀粉钠25(d)硬脂酸镁2420配制物C(控释胶囊)下列的控释胶囊配制物可以通过用挤出机将a、b、c组分进行挤出，然后将挤出物制成粒并干燥而制备。然后，将已干燥的粒子用控释膜(d)涂复，并填充到二片硬凝胶胶囊中。
mg/胶囊(a)活性组分250(b)微晶化纤维素125(c)乳糖B.P.125(d)乙基纤维素13513
实施例5注射用配制物配方活性组分0.200g盐酸溶液0.1M调PH为5.0-7.0氢氧化钠溶液0.1M调PH为5.0-7.0无菌水调至10ml可将该活性组分溶于大部分水(35°-40℃)中，并用适量盐酸或氢氧化钠调节其PH值至5.0至7.0之间。然后可用水使每批达到其体积，通过无菌微孔过滤器过滤到无菌的10ml安瓿玻璃小瓶(Ⅰ型)中，并用无菌密封物进行密封并彻底密封。
权利要求
1.一种为治疗和预防与黄热病病毒有联系的感染的方法，其特征在于，它包括了对需要这种治疗和预防的病人服一种或多种选自通式1至12的化合物，及其二聚物，异构体，溶剂化物，或还原态化合物1.)An[YMXW11O39]其中X=BⅢ，PⅤ，SiⅣ，GeⅣ，ZnⅡ，CoⅡ，CoⅢ，FeⅢ，GaⅢ，TiⅣ，或ZrⅣ，M=MnⅡ，MnⅢ，FeⅡ，FeⅢ，CuⅡ，CoⅡ，CoⅢ，GaⅢ，NiⅡ，ZnⅡ，TiⅣ，ZrⅣ，AlⅢ，InⅢ，VⅣ，VⅤ，MoⅥ，PbⅡ，NbⅤ，Y=配位体2.)An[M(XW11O39)2]其中X=GaⅢ，PⅤ，SiⅣ，GeⅣ，orTiⅣ，M=LaⅢ，CeⅢ，CeⅣ，PrⅢ，SmⅢ，NdⅢ，EuⅢ，GdⅢ，TbⅢ，DyⅢ，HoⅢ，TmⅢ，或YbⅢ，3.)An[XM2W10O40]。其中X=PⅤ，SiⅣ，或VⅤ，M=TiⅣ，ZrⅣ，VⅤ，ZnⅡ，CoⅡ，FeⅡ，或FeⅢ。4.)An[XM3W9O40]其中X=PⅤ，FeⅢ，SiⅣ，或VⅤ。M=VⅤ，FeⅢ，NbⅤ，CrⅢ，ZrⅣ，或TiⅣ。5.)An[X2MW17O62]其中X=PⅤ。M=CoⅡ，CoⅢ，NiⅡ，ZnⅡ，MnⅡ，MnⅢ，FeⅢ，AlⅢ，GaⅢ，InⅢ，TiⅣ，ZrⅣ，VⅤ，MoⅥ，或η5-RC5H4Ti，其中R=有机基6.)An[M(X2W17O61)2]其中X=PⅤM=EuⅢ，CeⅢ，CeⅣ，SmⅢ，或其它稳定的镧系金属离子7.)An[X2M3W15O62]其中X=PⅤ。M=VⅤ，TiⅣ，MoⅥ，或NbV8.)An[M4(H2O)y(XW9O34)2]其中X=PⅤ，FeⅢ，ZnⅡ，CoⅡ，M=MnⅡ，FeⅡ，CoⅡ，NiⅡ，CuⅡ，ZnⅡ，ZrO，[FeCu]1/2，[WZn3]1/4，[WZnMnⅡ2]1/4，[WZnMnⅢ2]1/4，[WZnⅡ3]1/4，[WMnⅢ3]1/4，[WFeⅡ3]1/4，[WNiⅡ3]1/4，[WCuⅡ3]1/4，[WZnVⅣ2]1/4，[WZnⅡFeⅡ2]1/4，[WZnⅡCoⅡ2]1/4，WNi3Ⅱ，[WZnⅡNiⅡ2]1/4，[WZnⅡVⅣ2]1/4，[WZnⅡPdⅡ2]1/4，[WCo3Ⅱ]1/4，[WCoⅡMnⅡ2]1/4，[WCoⅡFeⅢ2]1/4，[WCoⅡNiⅡ2]1/4，或[WCoⅡZnⅡ2]1/4.y是1-69.)An[(FeOA)4(PW9O34)2]10.)An[Ma(XW9O34)2]其中X-PⅤ,或SiⅣ。如a=1or2，M=WO2如a=3，M=Zr(OH)，CeO，Cu，Cu(NO3)1/3，Cu(NO2)1/3，WO2，ZnⅡ，MnⅡ，MnⅢ，FeⅡ，FeⅢ，NiⅡ，CoⅡ，[Fe2(WO2)]1/3，[FeCo(WO2)]1/3，[CoⅡCuⅡWO2]1/3，[CuⅡ2CoⅡ]1/3，[CuⅡ2CoⅡNO3]1/3，[Zn2(WO2)]1/3，[Ni2(WO2)]1/3，[Co2(WO2)]1/3，或[η-C5H5TiⅣ(OH2)]。11.)An[Co9(OH)`3(H2O)6(HPO4)2(PW9O34)3]12.)An[M4(H2O)2(X2W15O56)2]其中X=PⅤM=MnⅡ，FeⅡ，CoⅡ，NiⅡ，CuⅡ，或ZnⅡ，并且，在上述每种通式中，A是阳离子，n是使分子电中性所必须的这种阳离子的数目，或它们的药物上可接受的衍生物。
2.一种如权利要求1的方法，其特征在于，A是质子、碱金属、碱土金属或铵阳离子，或通式为R4-mHmN+的烷基铵阳离子，式中的R是含1至6个碳原子的烷基链，而m是0、1、2或3。
3.一种如权利要求1或2的方法，其特征在于，该化合物以药物组合物来服用，而此组合物包括该化合物及药物上可接受的载体或稀释剂。
4.如权利要求1或权利要求2所定义的化合物在制造用于治疗和预防与黄热病病毒有关的感染的药物方面的用途。
5.一种用于治疗或预防与黄热病病毒有关的感染药物组合物，其特征在于它包含如权利要求1所定义的化合物以及药物上可接受的载体或稀释剂。
全文摘要
含有杂多钨酸盐类及其药物上可以接受的衍生物的药物组合物，这类化合物或组合物在治疗和预防病毒感染上的应用，该病毒是黄热病病毒科确定的或者可能的一员。
文档编号A61K38/22GK1082892SQ93106560
公开日1994年3月2日 申请日期1993年5月1日 优先权日1992年5月1日
发明者H·韦高尔德, A·I·巴塞洛米厄斯, G·霍兰, S·M·马库斯乔, P·J·赖特 申请人:联邦科学和工业研究组织