专利名称：监测方法
技术领域：
本发明涉及对雌性哺乳动物特别是人类排卵周期的监测方法。
近几十年来，在增进“自然”怀孕规划方面进行了许多研究，其中包括对表示排卵周期情况的生理参数的监测。在我们的欧洲专利说明书EP-A-706346中，我们特别描述了一种方法，它是采用对尿中的雌二醇或其代谢物、特别是雌酮-3-葡糖苷酸(E3G)的测定来预知可受孕期的开始。在我们的欧洲专利说明书EP-A-656118、EP-A-656119和EP-A-656120中描述了有关的方法。在这些说明书以及我们的国际专利说明书WO95/13531和WO96/09553中还描述了有关的测试装置和测试用成套用具。这些在先发明的主要目的是提供一种监测方法，该方法可以适应不同对象之间以及相同对象的一个排卵周期到另一周期之间的排卵周期参数的变化。尤其是用于避孕时，尽管有这些变化，监测方法仍能提供对可受孕情况的可靠了解。
即使在具有明显正常的排卵周期(平均28天)的多数女性中，某些人也会偶尔或经常地出现极短的周期。整个周期会缩短到20或21天，或者在极个别例子中甚至缩短到更短的时间内。可受孕期(注意精子可能存活的期限)会开始得格外早，在监测方法中，发现尿中E3G或类似代谢物浓度的增高，就是即将进入可受孕期的标志，出现较短周期时，可受孕期的较早开始则不易确定。因此，需要一种可解决意义的短周期的“保险”机制。
通过本发明，我们提供了一种监测人类排卵周期的方法，在该方法中，如果进行体液测试或者在周期的约第6天所表现出的有关可受孕情况的分析物浓度与在该点的预测浓度不同，则立刻表明周期进入可受孕期。例如雌二醇及其代谢物，已知从经期开始时计算，在周期的约第5-7天时，体内循环的以及尿中排泄的和其它体液中的雌二醇及其代谢物的含量处于或接近其在周期变化中的最低水平，在此后数天，该含量升至某一水平之前，标志着排卵即将开始。尽管这是在正常情况下，但仍有例外。
本发明提供一种预知人类排卵周期中可受孕期开始的方法，它包括对分析物如雌二醇或其代谢物的体液浓度的确切值或相对范围进行测定，该方法的特征在于在本周期中，约在经期结束时进行浓度测定，如果所表现的体液浓度正好是人类女性被测者体液的平均值，则立刻表明本周期进入可受孕期，该平均值为28天周期中排卵时间约前3天的平均值。
本发明的一种特别实施方案是一种预知人类排卵周期中受孕期开始的方法，它包括对尿中的E3G浓度的确切值或相对范围进行测定，该方法的特征在于约在经期结束时测定E3G，如果所表现的浓度与某一初始浓度相同或更高，则立刻表明进入可受孕期，该初始浓度选自约25-约35ng/ml的范围。
测定E3G浓度的最适宜时间是从经期开始时计算，在本周期第4至7天的某一天，优选在约第6天。
在本发明的另一实施方案中提供了一种监测哺乳动物排卵周期中可受孕状态的方法，它包括测定体液中分析物浓度的变化，该浓度在周期中可受孕期临近时会发生变化，并且浓度测定是在本周期的第4至8天内进行，该方法的特征在于根据对同一被测对象的前一次或几次排卵周期的监测，如果测得的浓度与排卵周期前3天的预测值至少相同，则立刻表明可受孕期开始。该方法一般包括对体液中雌二醇或其代谢物如E3G浓度的测定。
本发明还提供一种监测人类排卵周期中可受孕状态的方法，它包括在周期早期测定尿中E3G浓度的变化，从而预知可受孕期的开始，其中约在本周期的第6天测定E3G浓度的相对范围或绝对值，该方法的特征在于根据对同一被测对象的前一次或几次排卵周期前3天所得的值，如果在本周期约第6天的E3G浓度与前述所得值至少相同，则立刻表明本周期中可受孕期的开始。
仅为说明的目的，本发明将描述对尿分析物的测定，尤其是对“E3G”(雌酮-3-葡糖苷酸)和“LH”(促黄体激素)的测定。
除了上述的雌酮-3-葡糖苷酸，雌二醇的代谢物也可用于本发明的测试，它们包括雌二醇-3-葡糖苷酸、雌二醇-17-葡糖苷酸，雌三醇-3-葡糖苷酸、雌三醇-16-葡糖苷酸和(主要对于非人类被测对象来说)雌酮-3-硫酸酯。通过以下描述可知，本发明也适用于由其它分析物的体液浓度测定所得的数值，这些其它分析物应与排卵周期中的该可受孕状态密切相关。最适用的分析物一般是激素及其代谢物。例如促卵泡激素(FSH)。其它相对适用的可选择的体液的实例有唾液、牙龈液、汗液、皮脂、泪液和阴道分泌液。原则上可以采用内部液体如血液，但一般不优选，因为它们只有通过刺入方式才能得到。
技术人员可知无需测定所选分析物的体液“浓度”的绝对值，虽然在需要时完全可以测定。一般按以下方式测试分析物就足以达到要求了，即获得与实际浓度有关的、可转化为数值的指标，这样就可以将该数值与在该周期中不同阶段所得的类似数值相比较，从而可以确定例如实际浓度是否发生了显著变化。因此，在本说明书和权利要求书中提及分析物“浓度”时，应作广义地理解。
文中本发明所包含的、有利于本发明的实施例是一种监测个体雌性哺乳动物可受孕状态的方法，它包括对分析物(特别是雌二醇或其代谢物)的体液浓度进行测定，在所述方法中，应在本周期第1至7天内至少进行一次测定，从而建立本周期的参照浓度值或指标，在本周期的后期也进行测定，并将所得的浓度值或指标与参照浓度值或指标进行比较，从而发现变化，该变化标志着正常周期中的排卵即将开始。本发明中所补充的这种方法可以为不正常的短周期的监测提供一项有用的“保险”手段。
更为详尽的实施例是一种监测个体人类女性的目前可受孕状态的方法，它包括对雌二醇或其代谢物的体液浓度进行测定，并将测定结果与对照值或指标进行比较，从而确定标志着排卵即将开始的该浓度水平是否增高，其中应在本周期的第4至7天内、优选在第5和/或第6天对同一个体进行一次测定，从而建立本周期的参照浓度或指标，继续测定，或者更优选约在本周期的第9天重新开始测定，此后至少应每日测定，直到发现浓度显著升高，本周期中的该状态表明在发现浓度显著增高的当天即进入了可受孕期，并且它会持续至少12天，或者如果周期结束得早，就持续到出现周期结束的迹象(例如经期开始)时为止。作为本方法的选择性改进方案，如果在第15天或第15天以前未发现浓度的显著提高，即表明从第15天开始进入了“可受孕期”，它会持续至少14天，优选15天，或者如果周期结束得早，就持续到出现周期结束迹象时为止。
采用以下步骤得到一种人类避孕的方法，步骤包括a)在女性被测者的本周期第4至7天、优选在第5和/或6天至少应测定一次其尿中雌二醇或其代谢物的浓度，从而建立本周期的参照浓度和指标；b)至少每日重复测定尿的浓度，优选约在本周期的第9天重新开始测定，一直持续到本周期的第15天；以及c)从发现尿浓度显著升高的当天起至少12天内避免不保险的性交，如果到第15天(优选第14天)时未发现尿浓度的显著升高，从第15天(优选第14天)起即应避免不保险的性交，并持续至少14天，优选15天，直到周期结束，或者若周期结束得早，就持续到出现周期结束的迹象(例如经期开始)时为止。
更简单地说，一种监测个体雌性哺乳动物可受孕状态的有代表性的方法包括在排卵前期中对与排卵周期密切相关的至少一种分析物进行体液浓度测定，其中，从经期开始时算起，应在本周期第1天(第1天即首次发现月经的当天)至第7天内至少进行一次测定，从而建立本周期中该分析物的参照浓度值或指标，此后直到周期中可能发生排卵的前一天为止，应至少进行一次测定(例如可重复测定，如每日重复测定)，将所述的后期测定或重复测定所得的分析物浓度值或指标与参照浓度值或指标进行比较，从而确定在前述测试中是否出现或出现过浓度变化，该变化标志着排卵即将开始。
因此，一种监测个体雌性受试者可受孕状态的方法可以包括在预排卵期中对与排卵周期密切相关的至少一种分析物进行浓度测定，其中，从经期开始时算起，应在本周期的第一天(第1天即首次发现月经的当天)至第7天内至少进行一次测定，从而建立本周期中该分析物的参照浓度值或指标，然后直到从第5天起(更优选第6天)之后的一段时期内应至少进行一次测定，此段时期应为实际平均排卵日之前的数天，该平均日是根据同一受试者在以前的一个或几个周期中的排卵情况来确定的，将所述这段时期内测定的分析物浓度值或指标与参照浓度值或指标进行比较，从而确定在前述测试中是否出现或出现过浓度变化，该变化标志着排卵即将开始。该重复测试一般只需在不早于平均排卵日前约第9天开始即可。
优选在第4天至第7天内测定建立浓度参照值，更优选在第5天和/或第6天进行，最优选仅在第6天测定一次。
当发现浓度等于或者高于所建立的浓度参照值当天的“保险”初始值时，即表明周期进入可受孕期。在以后的几天应继续进行体液测定，从而确定实际排卵日或其它指标，这些指标可以显示可受孕期的结束。
对于标志着排卵即将开始的分析物(尤其对于分析物是雌二醇或其代谢物)的浓度的显著变化来说，如果其中参照浓度[r]和测定浓度[i]之比满足以下条件，则该变化通常是值得注意的1.5≤[i][r]≥2.5]]>特别是，如果分析物是E3G，并且参照值是在第6天建立的，则在满足以下条件时，该变化值得注意[i][r]≥2]]>如果浓度数值测定所产生的指标与实施际浓度成反比，如在竞争测试中，专业人员应能理解在该情况下[i]和[r]指标的关系应与以上所给出的正好相反。
注意，一般在建立浓度对照值的测试和开始进行重复测试之间应有一定间隔，该间隔至少是一天，一般是几天，在间隔期间不必进行测定。因此，方案之一中，使用者可以在本周期的早期(例如在第6天)进行一次测试，并在几天以后进行较为简单的重复测定计划，例如每日测定，直到获得标志可受孕期过程的足够信息后才结束。优选这些信息中包括该周期中可受孕期结束的信号。一般在LH骤增的当天或以后的几天内结束测定，即，在该周期中以后的阶段不必再进行测定。
适用的体液常常可以是尿。则适宜的分析物是雌二醇或其代谢物，如雌酮-3-葡糖苷酸。
例如从在先的至少3个(更优选至少5个)连续排卵周期获得的数据可以推算出平均排卵日。
平均排卵日理论上被用于计算本周期的测定计划，并且该平均排卵日是由上一个紧接着的周期所得的数据推导出来的。
特别适用的方法包括由一“滚动”参照基础(“rolling”referencebase)所得的数据测定出平均排卵日，该“滚动”参照基础由一定数目与本周期相连的在先周期构成。优选该滚动参照基础由相连的在先的3-12个周期，更优选相连的在先的5或6个周期所构成。通过该滚动参照基础，可以发现有关个体受试者所发生的排卵的逐渐“飘移”，并计算所规定的重复测试的开始日。
实施该方法时，使用者可采用测试用成套用具，该成套用具包括一件或多件测试装置，它们是用于测定所述体液中至少一种分析物的浓度(的相对或绝对值)，测定应与使用说明相结合，并由使用者在所述时间间隔内开始进行该测定，从而使使用者可以从其对在先的至少一次排卵周期中实际排卵日的了解推算出所述的时间间隔和/或确切的测试开始日。该成套用具可包含多数一次性体液测定装置，并且还配有对采用所述装置所得测定结果的读数和说明的用法。在用于上述方法的一次性体液测定装置的外包装袋上可以附有例如使用说明，以便使用者能在一个排卵周期过程中使用全部袋内的一次性测定装置。
该方法的一个优点是采用仅从体液分析物的浓度所得的数据就可达到对排卵周期的有效监测。不需要将该数据与其它参数相结合。特别是对该数据无须加入对基本体温的常规测定。
采用由本周期早期的数值得到的浓度参照值，该方法可以避免校准，并保证基本参照值是被测对象本人的。与以前提出的每日测定的方法相比，该方法可以得到排卵前浓度显著变化的清晰信号。
用于预知排卵周期即将来临的分析物的选择并不是关键的，只要在一般条件下，该分析物在本周期中从测试开始(按本文测定)到实际排卵期前的安全期时间内会表现出可察觉的浓度变化即可。
虽然仅通过有关的尿激素P3G、促黄体激素(LH)、以及孕二醇-3-葡糖苷酸(P3G)的实施例进行描述，但也易于理解的是该方法的原理也可用于其它来自例如血液或唾液的生化指标(如激素雌二醇和孕酮)。本文所述的方法可以与女性所了解的或易于了解的对其可受孕期其它生理指标的观察(例如其它体液指标)相结合。
可采用任何适用的已知的化学或生理参数来确定排卵日，但优选方法是测定LH水平。一经发现LG骤增，即说明排卵即将开始。也可将周期中发生排卵的当天记录下来作为以后的参考。如果发现LH骤增，则可以精确指出排卵日，从而向使用者表明很高的可靠性，即被测对象在4天后(排卵3天后)即不再受孕。实际上，尿中LH浓度为20mI U/ml就可看作在全部实际条件下LH骤增的一般初始指示。
短语“LH骤增”在此处用来表示发生排卵前LH浓度的显著增高。在本领域中，也称作“LH最大值”，即LH浓度的峰值。每日监测排卵周期，大多数个体被测者实际上是LH骤增和实际浓度增高同时发生。但也有一些个体被测者(约占人数的20％)在基本浓度升高的第二天仍未发现实际的浓度峰值。对本发明来说，我们优选采用可观察到的浓度增高作为关键参数。
或者，或另外可根据本周期中雌二醇(或其代谢物)的浓度的情况来表明可受孕期的结束。这适于在出现浓度峰值后某一固定日期进行。由于尿中E3G浓度峰值与LH骤增相比更不易出现，因此可通过参照初始值来决定将E3G“峰值”与初始值对照，如通过以下关系进行确定。[i][r]>2.5,]]>优选≥3在本周期的测定中，当浓度值首次满足上式的当天即出现“峰值”。若E3G指标与实际浓度成反比，则上式关系正好相反。在某些情况下，同一天会发现代表排卵即将开始的E3G的显著升高。当发现E3G“峰值”，即可预测出在第6天、更安全是在第7或8天后可受孕期结束。在本方案中，本发明提供了监测本周期中可受孕期的方法，它仅根据对雌二醇/代谢物的测定所得的数据就可实施。
其它预测可受孕期(虽然不能确切到排卵日当天)的方法还有测定尿中P3G激素。尿中的P3G处于较低水平，直到黄体期开始时，其水平才会出现较明显的升高。因此，当发现P3G升高时，即表明使用者的排卵周期中黄体期开始，即不受孕期结束。可根据本周期和/或在先的一个或多个周期所得的数据测定尿中P3G水平的升高。当发现P3G水平高于同一月经期中在先记录的4次P3G水平之和时，或者高于3500ng/ml时，记录下P3G水平的“升高”，其中这两项初始值中哪项更低或是先得出的就采用哪项。当记录下P3G水平“升高”后，可告知被测者在她排卵周期的剩余阶段属于不受孕期。
如果需要，对LH或P3G的监测可作为一个信号，它表示被测者直到周期结束不再处于可受孕期，其中激素可彼此间互为“补充”。但由于LH监测本身比采用P3G能更精确地测出确切的排卵日，因此，优选采用LH监测作为排卵是否已发生或即将发生的主要信号。
适用于本方法的用于监测体液分析物如尿中的激素代谢物的方法，都是本领域技术人员所熟知的。优选方案中，是通过我们在英国专利GB2204398和欧洲专利申请EP-A-383619所述的测试方法和装置对分析物进行监测的。
测定尿组分的方法应是对尿样进行的。各种免疫检测技术可用于尿组分的检测。文献中所述的多种固相检测装置如浸量尺和色谱比色条均适用于测定尿中的分析物。该装置至少应能表示出分析物(例如E3G)与初始值相比的浓度水平。在例如EP 0225054、EP 0183442、EP 0186799和GB 2204398中描述了适于家用的简单测量技术的实例。如在GB 2204398中所述的一次性测试色条在使用时只需与尿液接触，就可得到半定性结果，如通过色条上一系列的测试区域，当尿中分析物水平较高时可逐渐产生阳性结果。在WO96/09553中详细描述了可监测E3G和LH的典型色条式测试方法。对应于不同分析物的初始值，可采用复合色条而不是单一色条。或者根据试样表面可见的变化(例如径向扩散)，如颜色、区域或“边沿”的变化而采用可见能的定量测定法，例如采用酯标记测定。
在改进方案中，可加入记录装置，用于显示尿样的结果，例如测定试样色条的吸收度和荧光。这样能对分析物水平进行更确切的量化表征，从而进一步增进该方法的准确性。在WO95/13531中详细描述了一种采用光学透射率(optical transmission)的典型测定系统。
在同时测定两种或多种分析物的方案中，如果需要可采用单一体液测定装置进行测定，例如可将装置与复合色条结合使用，或者将装置与单一色条结合使用，该单一色条应能独立监测不同分析物的水平。
当电学领域的技术人员一旦了解到这种能对分析物浓度数据进行比较、记录和处理的装置所应考虑的因素、以及该装置应向使用者提供的有关信息，就可容易地装配该装置的详细电路、提供优选的电子元件以及根据所得数据预测以后周期的情况。该详细电路并不属于本发明的内容。但可参考EP-A-706346和WO95/13531。确定适宜的初始值以E3G为例，以下数据来源于一项试验方案，该方案是对54名妇女9个周期内每日清晨的尿样做出的。通过常规的EIA测试分析试样中的E3G和LH的浓度。平均结果如下相对于排卵的天数 E3G浓度(ng/ml)0 47.5-1 40.1-2 31.1-3 23.3-4 18.9-5 15.3-6 13.6-7 12.0-8 10.9-9 10.2-109.7在LH骤增的第二天发生排卵。“-10”天是排卵周期的第6天。
研究表明对于意外的短周期来说，保险的E3G适宜初始值约为30ng/ml，即，高于第-3天的清晨的浓度但低于第-2天清晨浓度的数值。考虑到实验误差，数值适于选自25-35ng/ml的范围，会出现监测短周期失败的可能，以及因过于小心的计算而使正常周期中增加不必要的“不安全”天数，应避免这两种情况，并在两种情况间权衡从而选出实际数值。实施例根据在英国1996年所做出的一项可信试验得到以下实施例，625对自愿者采用尿激素测试成套用具测定其可受孕状态，并且以此作为避孕的唯一手段。尿中的分析物是E3G和LH，采用WO95/13531中所述的测试条进行测定。根据EP-A-706346所述的原理，在每一周期的第6天确定E3G的基本浓度，并将E3G的显著升高作为可受孕期开始的预告；还补充了一项日期推算，即根据在先周期的情况，约在LH骤增当天的前3天即自动表明可受孕期开始。结果有一些人受孕。试验结束后收回电子监测仪并将数据输入计算机，从而鉴定试验记录和发现意外受孕的原因。
根据WO96/09553，可采用竟争测试法测定尿中的E3G浓度。由该测试装置所得的指标(测试色条上有关区域的光学透射百分比)与尿样中E3G的实际浓度成反比。E3G检测采用溶于含0.85％(W/V)盐水和0.1％(W/V)叠氮钠的0.01M磷酸盐缓冲剂的高纯度雌酮-3-葡糖苷酸(E1-3-G)晶体(购自Sigma化学公司，产品号E1752)来进行校验。
对试验的日期进行分析表明发生的几例受孕情况是因为相应的周期比预计的短得多，可受孕期在实际计算的日期前开始。
以下三个实施例给出的是在试验过程中受孕的自愿者的有关试验数据，回溯发现受孕是由于意外的短周期造成的。在每一实施例中都可以看出，如果第6天记录的E3G指标的透射率低于20％时立即被告知进入可受孕期，满足这一基本要求，可以避免受孕。
在用于本试验的测试成套用具中，E3G试样的20％透射率相当于E3G浓度为30±5ng/ml。根据测试结果，E3G的“保险”浓度取自周期的第6天左右，范围在25-35ng/ml，这样才会对意外的短周期提供保护。实施例1周期 长度LH骤增日1 26 142 25 X3 26 144 24 X5 25 146 27 137 32 X8 26 139怀孕 11怀孕周期第9周期是怀孕周期，其LH骤增值在观察结果中最早出现。
该自愿者在怀孕周期中的测试指标是天数 69 101112 13 1415LH 22515 543 5E3G 18 16 111415 21 1516在本周期中，在第10天发现可受孕期的开始。不幸的是，这使志愿者在明显“安全”的第7、8和9天有过不安全的性交。这些自愿者在此周期怀孕，这可能与她们的上述行为有关。
采用在第6天20％T的值为初始值，这样该系统可以在受孕期开始时立即显示出来。实施例2周期长度LH骤增日131 17228 X328 14430 17529 17629 15731 178 怀孕 14在所有在先观察值中，怀孕周期的LH骤增最早，并且该周期比被测者的正常周期短。
怀孕周期中测试指标的情况是天数 6 11 121314151617LH 466 517 9 7 6E3G 20 16 121413141618发现可受孕周期在第12天开始。
在LH骤增前，第9天有一次性交(根据所知的科学信息，在第3、4、5天也有过性交，但精子成活的可能期限距LH骤增日太远)。
采用在第6天20％T的值为初始值，受孕期一开始就可显示出来，这就建议使用者在第9天应避免类似行为。实施例3周期长度LH骤增值130 16224 X324 12426 135怀孕 11怀孕周期在所有在先观察值中，怀孕周期的LH骤增仍然最早。
怀孕周期中测试指标的情况是天数 6 8 91011121314LH 4 1 0 613 9 5 0E3G 15 25201310142018发现可受孕期在第10天开始。
报告表明在第4、6、7、8和9天有过性交，这些均属于明显的“安全期”。
采用20％T的值为绝对初始值，在第6天受孕期一开始就可显示出来，建议使用者在第6、7、8和9天避免不保险的性交。第4天的性行为距离LH骤增日很远，因此精子成活期限距离排卵日也很远。
权利要求
1.一种预知人类排卵周期中可受孕期开始的方法，它包括对分析物如雌二醇或其代谢物的体液浓度的绝对或相对范围进行测定，其中约在经期结束时进行测定，如果所表现的体液浓度正好是人类女性被测者体液的平均值，则立刻表明本周期进入可受孕期，该平均值是28天周期中排卵时间约前3天的平均值。
2.权利要求1的方法，其中测定的是尿中雌酮-3-葡糖苷酸(E3G)的浓度。
3.一种预知人类排卵周期中可受孕期开始的方法，它包括对尿中的E3G浓度的绝对或相对范围进行测定，其中约在经期结束时进行测定，如果所表现的体液浓度与某一初始浓度相同或更高，则立刻表明进入可受孕期，该初始浓度选自约25-35ng/ml的范围。
4.权利要求3的方法，其中从经期开始时计算，在本周期的第4至7天内应至少测定一次E3G浓度。
5.一种监测哺乳动物排卵周期中可受孕状态的方法，它包括测定体液中分析物浓度的变化，该浓度在周期中可受孕期临近时会发生变化，并且浓度测定是在本周期的第4至8天内进行的，其中根据对同一被测对象的前一次或多次排卵周期的监测，如果测定所得的浓度与排卵周期前3天的预测值相同，则立刻表明可受孕期的开始。
6.权利要求5的用于人类排卵周期的方法，其中包括测定体液中雌二醇或其代谢物如E3G的浓度的变化。
7.一种监测人类排卵周期中可受孕状态的方法，它包括在周期早期测定尿中E3G浓度的变化，从而预知可受孕期的开始，其中约在本周期的第6天测定E3G浓度的绝对或相对范围，根据对同一被测对象的前一次或几次排卵周期前3天所得的值，如果在本周期约第6天的E3G浓度与前述所得值相同，则立刻表明本周期中可受孕期的开始。
全文摘要
一种预知人类排卵周期中可受孕期开始的方法,它包括对分析物如雌二醇或其代谢物的体液浓度的绝对或相对范围进行测定,其中约在经期结束时进行测定,如果所表现的体液浓度正好是人类女性被测者体液的平均值,则立刻表明本周期进入可受孕期,该平均值是28天周期中排卵时间约前3天的平均值。当分析物是E3G时,从经期开始时计算,在本周期的第4至7天内应至少测定一次E3G浓度,如果所表现出的E3G浓度与某一初始浓度相同或更高,则立刻表明进入可受孕期,该初始浓度选自约25—35ng/ml的范围。
文档编号A61B10/00GK1178098SQ9711024
公开日1998年4月8日 申请日期1997年2月20日 优先权日1997年2月20日
发明者M·卡特, K·梅 申请人:尤尼利弗公司