治疗皮肤疾病的方法

专利名称：治疗皮肤疾病的方法
技术领域：
本发明涉及包含一种新的α,ω-羧酸(6-14C原子)酯作为活性成分的美容或药物组合物，所述羧酸与角质层分离活性醇共价连接。本发明还涉及这类组合物在治疗皮肤疾病时的给药方法。
背景技术：
大量的皮肤病可导致角质层肥大，这种情况也被描述成角化过度。表皮的增厚表层会在皮肤表面导致鳞片状斑块。由于与鱼鳞相似，所以这些鳞片斑块是一类名为鳞癣的疾病的表观。斑块可能是皮肤病的症状，由此可妨碍源自皮肤内层的疾病的治疗。肥大皮肤层本身内部也会聚集着感染。
至今还未知其病原学的鳞癣的典型实例包括牛皮癣、糠疹、红斑痤疮和皮脂溢性皮炎。这些疾病可利用角质层分离剂进行症状性治疗，去除斑块；或利用糖皮质激素进行症状性治疗，减轻炎症。皮肤疾病是由真菌感染引起的鳞癣。菌丝和孢子禁闭在组织中不能存活的部分，因此在皮肤、头发和指甲的角化过度组织中增生。皮肤疾病的典型实例包括头癣(乳痂)、皮真菌病(脚癣)和甲癣。这些疾病可利用抗真菌剂进行治疗，典型地利用角质层分离剂，除去禁闭和感染的皮肤层。
皮肤病也可由激素分泌失调引起。这种失调可引起睾酮水平增加，特别是在青春期开始之时。睾酮在靶向组织中被还原成二氢睾酮(DHT)，所述靶向组织包括皮脂腺。在一般的粉刺皮肤病中，DHT在毛囊皮脂腺中与受体结合，激发过量的皮脂分泌。皮脂可作为细菌的营养物质，所述细菌包括疮疱丙酸杆菌，这就感染了皮脂腺，引起皮肤炎症和异常角化。粉刺可典型地利用抗菌剂和消毒剂进行治疗，也可利用角质层分离剂进行治疗，如水杨酸或视黄酸，除去角化过度组织。
如上所述的皮肤病困扰着美容学，经常被认为包括美容方法。它们可通过利用公知的药物进行治疗，然而，人们一般已知道美容制品，如皂类、洗液和香波也可用来缓解一些疾病，如粉刺、头皮屑、皮脂溢和雄激素脱发。
壬二酸(AZA)是一种天然存在的具有两个羧基端基的九碳直链分子。AZA是一种抗角化剂，对角质层分离细胞具有抗增生作用，且可调制表皮分化的早期和末期阶段(Passi等人，G.Ital.Dermatol.Venerol.1989,124(10):455-463)。AZA是睾酮还原成二氢睾酮的竞争性抑制剂，同样也可降低皮脂腺中皮脂的生成。进一步地，最新研究表明，AZA和癸二酸也具有抗细菌和抗真菌性能。结构-活性关系研究表明，当α,ω-二羧酸具有大约6至14个碳原子骨架时，它们均可保持这种作用。
由此可见，壬二酸及其它α,ω-二羧酸可在皮肤病的治疗中用作治疗剂，然而上述疾病的治疗受到这类治疗剂生物药效率低的影响。由于存在两个羧基，由此如壬二酸类的二羧酸的极性很大；由于存在该极性，因此皮肤渗透性很低。另外，酸官能团的存在降低了pH值，从而会刺激皮肤。在局部用制剂(20％)中，只有高浓度的壬二酸才会在治疗粉刺中起作用。为了说明AZA洗液的治疗作用如何弱，对于每天给药两次，20％的制剂只有在局部应用3-6个月之后才会具有作用。参见A.Fitton和K.L.Goa,Drugs41:780-798(1991)。进一步地，在另外的研究中，局部应用AZA不能在皮脂组成、皮脂分泌速率和皮脂腺尺寸中引起特别的变化(参见如Mayer-da-Silva等人，1989,Acta Derm.Venereol.Suppl.(Stockholm)143:20-23)。其它皮肤病治疗剂也包含极性官能团，如羧基或羟基，使得它们的皮肤渗透性相对较低。由此需要提高这些药物在治疗皮肤病中的效力，药物通过局部给药的生物药效率应当提高。
α,ω-二羧酸及其巯基、酯和盐衍生物已被用于治疗各种皮肤疾病。对其使用的相关讨论可参见如下参考文献。
Hill等人的美国专利4,034,077使用包含癸二酸的组合物治疗皮肤刺激和预防尿布疹，其中二羧酸用作尿和皮肤之间的屏障，也可中和氨。该专利没有将癸二酸用于治疗任何内在疾病，包括任何形式的鳞癣，也没有将其用于治疗任何激素分泌失调。
Nazzaro-Porro(美国专利4,292,326)公开了利用二羧酸，如壬二酸治疗色素沉着过多皮肤病的方法。这些酸及其一-和二巯基衍生物能够通过抑制黑素生成，而使皮肤颜色趋于正常。Nazzaro-Porro(美国专利4,386,104)使用相同的化合物治疗粉刺，还公开了可向组合物中加入少量的角质层分离剂。Nazzaro-Porro(美国专利5,385,943)也公开了使用局部应用制剂治疗老化皮肤的老年性皮肤病，所述制剂包含可通过皮肤酶裂解的二羧酸酯，特别是甘油酯。然而该专利意识到，一般地，任何酯均可通过皮肤非特异酶裂解，所述酶包括现有技术中公开的那些酶。
Thornfeldt(美国专利4,885,282)公开了通过利用一-或二-羧酸(4-18C)及其巯基衍生物、盐和酯，治疗皮肤的水解过度、鳞癣和皱纹；公开了使用一-或二-羧酸的烷基、多元醇、低聚糖和多糖酯，特别是一-或二-羧酸的甘油、聚乙二醇、聚丙二醇和蔗糖酯。英国专利申请GB2,285,805使用含维他命A、E和D的二羧酸酯作为抗肿瘤剂。Chanmess(美国专利5,547,989)公开了包含二羧酸(7-13C，特别是AZA)及其盐和酯，它们可用于治疗鸡眼和骨痂；但没有要求保护特殊酯或通过实施例说明。
Sugibayashi等人(Chem.Pharm.Bull.,36(4):1519-1528(1988))在典型化合物消炎痛中使用渗透增强剂。由于水杨酸盐可软化和溶解角质层，所以该文献使用水杨酸盐作为增强剂。他们使用水杨酸盐作为角质层分离剂，从而除去细胞的外层，然后可允许较容易地渗透所需化合物。
Luedders(美国专利4,299,826)公开了红霉素抗菌剂与癸二酸二异丙基酯渗透增强剂的物理混合物。Luedders指出这种添加剂可增强红霉素的渗透性。
已知文献公开了直链二羧酸的复合酯。在美国专利5,494,924中，Cavazza等人公开了利用α,ω-二羧酸和卡尼汀的复合酯治疗鳞癣。Bilibin等人(USSR专利711,452)公开了通过与对羟基苯甲酸盐进行酯化反应合成直碳链α,ω-二羧酸的方法，然后将该直碳链α,ω-二羧酸用作制备液态晶体聚合物的单体。在美国专利3,660,467中，Gould公开了用作合成润滑剂和热交换流体的α,ω-二羧酸苯氧基苯基酯。Portnory等人(Chemical Eningerring Data Series,1958,3:287-293)公开了在研制非喷雾型润滑油中使用α,ω-二羧酸苯基酯。尽管该文献中描述了包含酯化α,ω-二羧酸的化合物，但并没有讨论在治疗皮肤病中使用这些化合物。
由此，需要提供一种治疗皮肤病的治疗剂，与现有技术中的治疗剂相比，该治疗剂的效力应当提高且刺激性降低。
发明概要本发明目的在于提供一种包含α,ω -二羧酸酯衍生物的新化合物，该化合物可有效地用于治疗皮肤病和改善皮肤外观。
本发明的进一步目的在于提供美容或药物组合物，该组合物包含新的酯衍生物，可用于治疗皮肤病和改善皮肤外观。
本发明目的在于提供一种提高皮肤渗透性的新组合物。
本发明目的在于提供能够治疗各种皮肤病的新组合物。
本发明的进一步目的在于提供能够向患者的皮肤位置传递各种治疗活性剂的新的双重作用的药物前体。
本发明的再一目的在于提供一种治疗方法，该方法能够有效地缓解角化过度、过多皮脂分泌、微生物感染、皮肤疾病和睾酮过多地转变成二氢睾酮的症状。
本发明的再一目的在于提供一种治疗方法，该方法能够有效地缓解粉刺、牛皮癣、皮脂溢性皮肤病、鳞癣、红斑痤疮、头皮屑、毛过多、多毛症和雄激素性脱发的症状。
这些及其它目的可通过这里所描述的本发明实例达到。
本发明一方面提供了α,ω-二羧酸的新酯衍生物。该化合物包括与至少一个角质层分离活性醇部分共价相连的α,ω-二羧酸部分。所述化合物可具有下式结构
其中n为6至12；m为0至8；R′选自H、烷基、芳基、链烯基、苄基、OH、NHR″、COOR″和CONHR″；R"选自H、烷基、芳基、链烯基或苄基；以及Y选自H、烷基、芳基、链烯基、苄基或X。
本发明化合物可用于缓解角化过度、过多皮脂分泌、微生物感染、皮肤疾病和睾酮过多地转变成二睾酮的症状，以及用于缓解粉刺、牛皮癣、皮脂溢性皮肤病、鳞癣、红斑痤疮、头皮屑、多毛症、毛过多和雄激素性脱发的症状。
本发明化合物还可用于由非医学专家进行的美容方法，即调理人的一些情况，如粉刺、头皮屑、皮脂溢和雄激素性脱发。发明详述本发明提供了一种用于有效治疗皮肤病的新化合物。这类化合物既可掺入到药物制品中，由医生开出处方；又可用于美容制剂中，直接提供给用户自用。
根据本发明，化合物包含α,ω－二羧酸部分，该α,ω－二羧酸部分通过酯键与角质层分离活性醇共价连接。化合物可包含一种或两种醇，从而提供相应的一－或二酯。同样，化合物包含两个部分，即α,ω－二羧酸部分和角质层分离剂，各自能够治疗各种皮肤病或改善皮肤外观。该化合物另外具有能够提供两部分的优点，能够迅速透过皮肤。
这里所使用的“α,ω－二羧酸部分”是指具有两个羧酸官能团末端的直碳链。α,ω－二羧酸部分的长度大约为6至14个碳原子。在一优选的实施方案中，α,ω－二羧酸部分包含8至10个碳原子。碳链骨架可以饱和或不饱和。在优选的实施方案中，不饱和骨架含有1－3个双键。直碳链也可以被取代，例如，在碳原子骨架上可与烃基相连。适当的α,ω-二羧酸部分包括但不局限于己二酸、庚二酸、辛二酸、壬二酸、癸二酸、1,11-十一烷二酸、1,12-十二烷二酸、1,13-十三烷二酸和1,14-十四烷二酸。在优选的实施方案中，α,ω-二羧酸为壬二酸。碳链骨架上的适当取代基包括但不局限于烷基、芳基、链烯基和苄基。仅作为实施例，适当的烃基取代基(如芳基和烷基)包括甲基、乙基、丙基、苯基、苄基等。
这里所使用的“角质层分解活性醇部分”是指能够松动和去除皮肤角质层或通过调节角化细胞分化和生长而具有抗角化作用的化合物。适当的角质层分离剂部分包括酚和取代酚化合物。适当的取代基包括但不局限于羟基、-(CH2)m-COOH和-(CH2)m-COOR′，其中m=0-8和R′为芳基、烷基、链烯基和苄基。仅作为实施例，适当的芳基和烷基取代基包括甲基、乙基、丙基、苯基、苄基等。R′和R"一般选择成能够给予化合物疏水性，或者为了改进皮肤渗透性，应当提高化合物对作用位置的靶向。另外，苯环上的取代基能够给予角质层分离酚治疗性能。例如，另外的羟基可增强角质层分离性能，而且羧酸和羧酸烷基酯取代基的存在可给予抗炎性能。其余取代基可增加部分疏水性。角质层分离剂包括但不局限于羟基苯甲酸及其酯、酸酐和胺衍生物，烷基羟基苯甲酸酯，二羟基苯及其酯、酸酐和酰胺衍生物，甲酚及其酯、酸酐和酰胺衍生物或维他命A的醇衍生物。
许多适当的角质层分离剂对于治疗各种皮肤病是有效的。水杨酸(邻－羟基苯甲酸)及其酯衍生物具有抗炎性能及角质层分离活性。人们公知其能够溶解和松动角化过度组织的细胞内基质。同样，他们被用于治疗皮肤病。二羟基苯及其衍生物被认为是有效的角质层分离剂。间苯二酚(间-二羟基苯)及其衍生物被用作抗粉刺制剂。
氢醌(对-二羟基苯)除了具有抗色素沉着性能之外还具有角质层分离作用。这些化合物也具有抗菌性能。甲酚也具有抗菌和角质层分离性能。当单独使用时，由于这些化合物皮肤渗透性差且效力相对较弱，因此所有这些化合物均局限于药物用途。然而，当与本发明α,ω－二羧酸部分共价连接时，这些化合物的渗透性增强和/或向作用区域的传递性能增强。由此可见，与现有技术相比，这些化合物的效力显著增加。
特别优选的角质层分离剂为邻－羟基苯甲酸。在其它优选的实施方案中，需要使用邻－羟基苯甲酸烷基酯或邻-羟基苯甲酸芳基酯作为角质层分离醇。仅作为实施例，适当的芳基和烷基取代基包括甲基、乙基、丙基、苯基、苄基等。与酸配对物相比，羟基苯甲酸烷基和芳基酯具有另外的增加疏水性优点，这就增加了皮肤渗透性。进一步地，α,ω－二羧酸的芳基和烷基酯衍生物形成了低熔点固体，该固体在生理温度下为液体。该性能在增强皮肤渗透性方面非常有用。本发明特别优选的化合物具有下列通式
其中n为6－12；R为OH、COOH和COOR′；R′为烷基、芳基、链烯基或苄基。Y为H、烷基、芳基、链烯基、苄基或X。最优选其中n=7、R为邻-COOR′且R′为烷基的化合物。仅作为实施例，适当的芳基和烷基取代基包括甲基、乙基、丙基、苯基、苄基等。
α,ω－二羧酸与上述醇化学结合可得到治疗作用增强的化合物，该化合物可用于治疗皮肤病。有些实例性化合物具有大约30-40℃熔点。这些化合物在生理温度时为液体，与生理温度时为固体的化合物相比，本发明化合物增加了皮肤渗透的容易性。
皮肤渗透性与疏水性直接相关。在本发明中，羧酸和羟基官能团的极性被与另一官能团反应形成复合一酯或二酯所掩饰。作为复合酯，本发明新衍生物比其相应的游离α,ω－二羧酸和游离醇具有更大的疏水性，这就允许增加皮肤渗透性。随着渗透性增加，化合物随后在皮肤内层具有治疗作用。这些作用包括但不局限于α,ω－二羧酸部分的上述性能，特定醇的角质层分离性能和抗炎作用。
本发明化合物可用作双重作用的“药物前体”，即一旦传递至靶向位置的化合物经历着化学或酶解过程，生成了两种对应活性剂的化学形式，即药物化学形式的α,ω－二羧酸和醇部分。皮肤自然地包含非特异酯酶，该酯酶可影响必要的裂解，参见Montagna,W.The Structure andFunction of Skin,1962，第二版；及Stevens,C.S.和C-Villez,R.L.Int.J.Dermatol,19:295(1980)。特别地，高浓度非特异酯酶位于靶向皮脂腺的内部，参见Holt,R.J.Br.,J.Dermatol.85:18(197)。在穿透皮肤外层之后，本发明化合物与这些酯酶相互作用。由于该酶为非特异酶，它们可水解与α,ω-二羧酸部分和醇相连的酯键，因此可释放其药物活性形式的两种治疗有效剂。
药物前体允许穿透自然存在的皮肤外层，而且可穿透角化过度细胞的异常斑块。这些斑块常常是靶向疾病和影响区屏障的症状。由此这些水解反应发生在皮肤的内层。能够治疗两种或多种独立症状的两种药物活性剂可通过这些屏障而到达靶向组织，药物活性剂在此具有各自的治疗性能。由此可见，利用本发明新化合物，可将两种治疗剂传递到靶向位置。
本发明化合物的渗透性增加，从而改进药物活性剂向靶向组织的传递，得到了比现有技术更有效的皮肤病治疗效果。由于传递效力提高，因此只需要比现有技术中公开更少量的活性成分即可减轻皮肤病症状。另外，由于酯化反应使得试剂的酸性降低，因而降低了应用区域的炎症和刺激。
本发明另一方面涉及能够解决皮肤病两方面问题的药物或美容组合物。α,ω-二羧酸可对皮脂分泌、皮肤角化、角质层分离所伴随的细菌和真菌感染和/或抗炎作用具有治疗作用，其中所述抗炎作用由酚部分给予。
在本发明的一个实施方案中，包含10％(重量)(200mmol/ml)二(水杨酸乙酯)壬二酸酯的组合物在兔耳模型中对降低黑头粉刺具有有效的作用。二(水杨酸乙酯)壬二酸酯的粉刺分解作用与0.025％Retin A乳膏相当。该粉刺溶解作用优于现有技术中公开的20％(1,060mmol/ml)壬二酸制剂。参见Lee等人，Kor.J.Dermatol.28(5):543-549(1990)。
另外，与利用0.025％RetinA治疗所观察到的炎症性作用不同，利用该组合物治疗不会在治疗区域引起任何炎症性响应。在自愿者中的比较皮肤刺激试验表明，二(水杨酸乙酯)壬二酸酯(20％,400mmol/ml)不会刺激皮肤。相反地，其成分的等摩尔混合物(7.5％,400mmol/ml壬二酸和11％,800mmol/ml水杨酸)引起了炎症性反应，包括中度红斑、轻微水肿和局部瘙痒症。兔的体内皮肤刺激试验也表明在应用二(水杨酸乙酯)壬二酸酯(10％和20％)24小时之后没有任何刺激迹象。这些结果着重说明了二(水杨酸乙酯)壬二酸酯比其母体成分具有明显的差距。
在人试验中也证明了二(水杨酸乙酯)壬二酸酯的皮脂溶解作用。利用光度仪进行测试，在局部治疗14天之后，自愿者的前额皮肤油脂由223单位(与“油性皮肤”相似)降至205单位(正常皮肤值)。这一发现说明本发明化合物优于壬二酸，根据公开出版的文献，壬二酸不能改变皮肤油脂。
通过在体外利用角质层细胞系，可测定本发明化合物对人的角质层细胞增生的直接作用。结果表明本发明化合物是角质层细胞增生的强抑制剂。在浓度为0.3mM时，二(水杨酸乙酯)壬二酸酯可抑制细胞增生；而壬二酸视黄基酯则在15μM浓度下具有抑制作用。相同试剂的各自细胞毒性浓度为3mM和100μM，基本治疗安全系数为6.6-10。相反地，壬二酸的抑制浓度可高达1mM，其细胞毒性浓度仅为2.6倍多。因此，利用本发明化合物治疗涉及角化过度的皮肤疾病优于使用游离壬二酸。
优选的实施方案涉及药物或美容组合物，该组合物包含治疗有效量的本发明新化合物和药物或美容可接受载体。这里所使用的“药物可接受载体”是指适用于与哺乳动物活组织接触的任何液体、凝胶、乳液、乳膏、油膏、液态油基、溶剂、稀料等，所述载体必须能够溶解本发明治疗活性剂且不与组合物任何其它成分以有害方式相互作用。醇是特别优选的载体。这类组合物的添加剂可包括但不局限于保存剂、增湿剂、石油、增稠剂、α-羟基羧酸、矿物油、颜料及美容成分CTFA手册中描述的其它组分。对于皮肤学领域中的普通技术人员来讲非常明显，所得组合物可以以许多形式存在，它们可包括但不局限于溶液、洗液、乳膏、糊剂、乳液、凝胶、皂条、喷雾剂或气溶胶。这些组合物可通过人工应用或通过各种装置应用。
本发明一方面涉及用于治疗角化过度的药物或美容组合物。本发明另一方面涉及治疗由靶向组织中激素失调引起的皮肤疾病的有效组合物和方法。人们已经知道α,ω-二羧酸可抑制睾酮还原成二氢睾酮(DHT)。通过抑制这种转变，α,ω－二羧酸可用作治疗由二氢睾酮量的增加引起的疾病的治疗剂。DHT是发育男性第二特征的雄性激素。DHT水平增加可引起过多的毛发生长，即所谓的毛过多。男性和女性都可患有毛过多，其中在身体的任何部位毛发生长增加。另一种可能侵袭女性且由DHT水平增加引起的疾病是多毛症。在这种疾病中，雄性激素水平增加会导致男性特征的毛发生长。由于上述疾病是由发囊中DHT水平增加所引起的，因此它们可伴随发生粉刺的可能性增加。本发明化合物所增加的渗透性可提供一种将α,ω－二羧酸传递至皮肤内层的方法。所以本发明组合物可用于治疗激素失调的继发作用。
雄性激素秃头症也称为男性脱发，它主要是遗传性疾病，遗传性疾病是男性脱发的最常见原因。发囊对DHT及其分解产物非常敏感，它们被认为可抑制头皮中的头发生长。由此，发囊中DHT量增加务必使抑制作用增加，从而导致脱发。女性也可患有雄性激素秃头症。女性中循环雄性激素水平增加可由内分泌疾病所致，所述内分泌疾病包括卵巢或肾上腺机能障碍。在这些女性中，靶向组织特别是发囊中的过量雄性激素抑制头发生长，最终导致脱发。本发明组合物可有效地降低发囊中的DHT量，这种降低可使所述抑制下降，从而促进头发的生长。
本发明另一方面涉及治疗特殊皮肤疾病的方法，该方法包括在感染区域应用包含与药物或美容可接受载体混合的有效量化合物。组合物包含本发明治疗有效量的新一-或二酯。实际有效量可根据所治疗的特殊皮肤疾病而改变，但本发明一般使用浓度为0.1％-30％(重量体积比)的组合物。组合物可局部应用到感染区域。这里所使用的术语“局部”是指直接喷洒或放置到表皮组织。应用可通过擦、使用医用垫或任何其它方便的手段进行。由于本发明化合物的低毒性，所以可使用经口、鼻或非肠道方式给药。
本发明新化合物可通过本领域公知的方法制各。由羧酸及其衍生物合成酯的方法是本领域技术人员所公知的。在存在酸催化剂条件下，将羧酸和醇结合可获得酯和水。酰卤或羧酸的其它适当衍生物(如甲苯磺酰基、2,4,6-三甲苯基等)也可有效地生成所需酯。对于综述酯的合成，读者可直接参见Vollhardt,Organic Chemistry,Chapter17。
下述实施例将在不限制本发明的条件下对本发明进行阐述。
实施例1，合成壬二酸，二-[(2′-乙氧基羰基)苯基]酯(也称为“二(水杨酸乙酯)壬二酸酯”)。在安装有氮气进口和出口的三颈烧瓶中，将80mmol水杨酸乙酯溶解在50ml吡啶中。将溶液冷却至0℃，在1小时内于磁性搅拌条件下，加入壬二酰氯(40mmol)。在室温下搅拌反应混合物2小时，然后注入200ml 5％HCl。利用二氯甲烷萃取混合物3次，利用碳酸氢钠和水后处理有机相，蒸发得到粘稠米色产物。在硅胶柱上纯化产物，利用3∶5乙酸乙酯∶己烷洗脱。然后蒸发并与50ml己烷混合过夜，得到11.6g(24mmol，收率60％)白色粉末(mp=34-35℃,MW=485)。通过NMR和IR鉴定化合物特征。NMR:1.25-2.04,m,10H；2.63,t,4H；4.32,dd,4H；7.08,d,2H；7.30,t,2H；7.52,t,2H；7.99,d,2H；和IR:1769,1757,1713,1606,1365,1255,1198,1140,1088,770,715。元素分析C=67.25(计算66.94)；H=6.68(计算6.61)。
实施例2．合成o,o-二-(7-甲氧基羰基-1-辛酰基-1,4-二羟基苯)。在5小时内于40-50℃水浴上，将20g(100mmol)壬二酸一乙基酯滴加到24g(14.7mmol)SOCl2中。馏出SOCl2，在室温下于磁性搅拌条件下将所得酰氯慢慢滴加到12g(110mmol)氢醌中。在室温下进一步搅拌反应混合物16小时，然后注入到5％HCl中。利用二氯甲烷萃取，利用水洗涤，干燥并蒸发。由甲苯结晶得到17g(58mmol，收率=58％)浅棕色固体(mp=53-56℃)。通过NMR鉴定化合物特征。NMR:1.31-1.77,m,20H；2.3,t,4H；2.54,t,4H；3.67,s,6H；7.07,s,4H。
实施例3．合成o-(7-甲氧基羰基-1-辛酰基-1,4-二氢苯)。在5小时内于40-50℃水浴上，将20g(100mmol)壬二酸一乙基酯滴加到24g(14.7mmol)SOCl2中。馏出SOCl2，在室温下于磁性搅拌条件下将所得酰氯慢慢滴加到5.5g(50mmol)氢醌中。在室温下进一步搅拌反应混合物16小时，然后注入到5％HCl中。利用二氯甲烷萃取，利用水洗涤，干燥，蒸发并与50ml己烷混合过夜，得到9.5g(20mmol，收率=40％)白色粉末。通过NMR和IR鉴定化合物特征。NMR:1.31-1.77,m,10H；2.32,t,2H；2.53,t,2H；3.67,s,3H；5.60，宽s,1H；6.82,dd,4H；IR:3458,2943,1740,1510,1444,1267,1223,1149。
实施例4．合成壬二酸视黄基酯。在安装有氯化钙出口的25ml烧瓶中，将维他命A(视黄醇，0.86g,3mmol)溶解在2ml吡啶和7.5ml二氯甲烷中。在冰浴上冷却溶液。在磁性搅拌条件下加入壬二酰氯(0.3ml,0.345g,1.5mmol)。在室温下搅拌反应混合物2小时，然后注入到10ml 5％HCl/冰中。利用二氯甲烷萃取混合物3次，利用碳酸氢钠和水后处理有机相，利用硫酸镁干燥并蒸发。在硅胶柱上纯化产物，得到0.5g(0.7mmol，收率=46％)。通过NMR鉴定化合物特征。NMR:1.0,s,12H；1.3-1.6,m,18H；1.70,s,6H；1.88,s,6H；1.95,s,6H；2.0,t,4H；2.30,t,4H；4.72,d,4H；5.6,t,2H,6.0-6.2,m,6H；6.27,d,2H；6.63,t,2H。
实施例5．制备抗粉刺/抗皮脂溢洗液。将10g二(水杨酸乙酯)壬二酸酯溶解在10ml乙醇和90ml PEG400中，得到清亮、无色溶液，其粘度＜100cps。
实施例6．二(水杨酸乙酯)壬二酸酯(10％)在兔耳粉刺模型中的效力。根据下述方法治疗三只患有白花病的成熟雄性兔。利用于亲水油膏USP中的1％原煤焦油处理双耳的外耳道五个工作日，每日一次，共3周。然后利用实施例4的抗粉刺洗液处理其中一只兔耳五个工作日，每日一次，共3周；而另一只作为未处理的对照组。将其固定在福尔马林中，切成半系列(semi-serial)并染成H和E形。未处理耳显示了皮脂粉尘的紧密角化过度。这些被认为是中等粉刺的实例，所述粉刺具有通过密集角化所表示的囊状动脉圆锥的畸形。所有处理过的三只耳中的粉刺显著降低。一些小囊中只残留少量的角化，而且这些角化已经松动且不紧密。二(水杨酸乙酯)壬二酸酯的粉刺分离作用与0.025％Retin A乳膏相当。通过该处理没有引起炎症性反应。
实施例7．人皮肤刺激试验。利用标准皮肤刺激试验腔室(0.64sq.cm.)，将下述洗液(0.1ml)应用于人皮肤上48小时(1)20％二(水杨酸乙酯)壬二酸酯(400mmol/ml)，溶解在PEG-400/乙醇1∶1中；(2)7.5％壬二酸(400mmol/ml)和11％水杨酸(800mmol/ml)混合物，溶解在PEG-400/乙醇1∶1中；和(3)PEG-400/乙醇1∶1(对照剂)。
除去腔室，在1、24和48小时之后，应用对照剂或二(水杨酸乙酯)壬二酸酯均没有显示任何皮肤反应信号。等摩尔药物前体-成分(2)的混合物引起了炎症性响应，包括中等红斑、轻微水肿和局部瘙痒症。
实施例8．急性表皮毒性/刺激试验。本研究的目的在于评价在兔的皮肤上局部应用二(水杨酸乙酯)壬二酸酯后的急性潜在表皮刺激作用。正如OECD指南中所描述，本试验是原始Draise方法的改进变形。将0.5ml二(水杨酸乙酯)壬二酸酯(10％或20％，溶解在PEG-400/乙醇1∶1中)和单独的载体应用到三只兔上24小时。在除去试验溶液1、24和72小时之后，利用兔来测试皮肤刺激信号。通过该研究，没有观察到皮肤刺激信号。基于目前的试验记录，可得到二(水杨酸乙酯)壬二酸酯为非刺激性试剂的结论。
实施例9．急性皮下毒性界限试验。五只雌性和五只雄性ICR小鼠经皮下给用2000mg/kg二(水杨酸乙酯)壬二酸酯，然后等待14天。在整个治疗和观察期内没有任何毒性作用，这就表明二(水杨酸乙酯)壬二酸酯可被认为是无毒的。
实施例10．二(水杨酸乙酯)壬二酸酯的皮脂溶解作用。在治疗之前向具有油性皮肤的妇女的前额局部给用实施例5的抗粉刺/抗皮脂溢洗液，每天两次。在治疗之前和14天之后，利用“STC20型皮肤测试仪”(IMS Ltd.,Haifa,Israel)测定皮肤油性。在治疗之前，皮脂值为223单位，是典型的油性皮肤。治疗两周后的皮脂值为205单位，相对于正常皮肤。
实施例11．抗牛皮癣凝胶。将20g二(水杨酸乙酯)壬二酸酯溶解在50ml乙醇和50ml水中。在搅拌条件下，将溶液温热至60℃，加入1g PEG-4000。冷却混合物至室温，慢慢地磁性搅拌2小时。
实施例12．控制角蛋白细胞增生。利用人的角蛋白细胞培养体系，在体外进行二(水杨酸乙酯)壬二酸酯和壬二酸二视黄基酯对细胞增生和细胞生存能力作用的测试。
细胞增生测定。将次培养物中的50,000个人的角蛋白细胞接种在24孔板上，于具有生长因子和10％胎牛血清的1ml DMEM-F12培养基(Green H.(1978)Cell15:801-805)中。细胞在CO2气氛下于37℃下孵育，直至达到30-40％融合，然后将溶解在乙醇中的各种试验物质以0.1-20μl体积加入，最终体积为0.5ml。向对照培养基中加入相同体积的乙醇，从而比较乙醇细胞毒性值。直至40μl/ml乙醇，没有发现明显的细胞毒性。在加入试验物质之前，利用新鲜培养基替代上述培养基。在37℃和5％CO2条件下继续孵育3小时，然后利用磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤。利用两种方法测定细胞数量1)受胰蛋白酶作用，接着进行细胞计数；和2)利用于PBS中的2％p-甲醛结合培养基并利用亚甲蓝染色，接着提取颜色并在650nm处测定光密度。两种方法具有良好的相关性，1OD单位对应于1,000,000细胞。IC50(即对于各种试验物质，导致细胞增生50％抑制的浓度)示于表1。
细胞毒性试验。在没有试验物质条件下，将上述角质层分离细胞在培养基中增生至100％融合，在生长过程中进行一次培养基交换。在37℃和5％CO2条件下，孵育融合培养物3天，其中试验物质的乙醇浓度增加。在孵育阶段的最后，利用PBS洗涤培养物，利用上述方法测定残留附着细胞。LC50(即导致50％细胞毒性的浓度)也示于表1。
表1表明；在抑制细胞增生方面，壬二酸二视黄基酯和二(水杨酸乙酯)壬二酸酯的效力显著高于壬二酸和水杨酸；而且其细胞毒性浓度也比其抑制浓度高6.6-10倍，说明它们比游离壬二酸更安全。
权利要求
1．一种化合物，包含通过酯键与至少一个角质层分离活性醇部分共价连接的α,ω-二羧酸，其通式为
其中n为6至12；m为0至8；R′选自H、烷基、芳基、链烯基、苄基、OH、NHR″、CONHR″和COOR″；R″选自H、烷基、芳基、链烯基或苄基；以及Y选自H、烷基、芳基、链烯基、苄基或X。
2．一种化合物，包含α,ω-二羧酸一-或二酯，其中二羧酸的酯部分包含角质层分离活性醇。
3．根据权利要求1或2的化合物，其中α,ω-二羧酸部分包含大约6至14个碳原子。
4．根据权利要求1或2的化合物，其中α,ω-二羧酸部分包含8至10个碳原子。
5．根据权利要求1或2的化合物，其中α,ω-二羧酸碳链骨架为不饱和。
6．根据权利要求5的化合物，其中骨架包含大约1至3个双键。
7．根据权利要求1或2的化合物，其中α,ω-二羧酸部分的碳链与烃基取代基连接。
8．根据权利要求1或2的化合物，其中α,ω-二羧酸部分的碳链被烷基、芳基、链烯基或苄基取代。
9．根据权利要求1或2的化合物，其中所述α,ω-二羧酸为己二酸、庚二酸、辛二酸、壬二酸、癸二酸、1,11-十一烷二酸、1,12-十二烷二酸、1,13-十三烷二酸和1,14-十四烷二酸。
10．根据权利要求1或2的化合物，其中所述α,ω-二羧酸为壬二酸。
11．根据权利要求1或2的化合物，其中所述角质层分离活性醇包含水杨酸或其衍生物。
11a．根据权利要求13或14的药物或美容组合物，其中所述角质层分离醇选自邻-、间-和对-羟基苯甲酸，邻-、间-和对-羟基烷基苯甲酸酯，邻-、间-和对-二羟基苯，邻-、间-和对-羟基甲苯及其衍生物。
12．根据权利要求9的化合物，其中所述角质层分离活性醇包含水杨酸或其衍生物。
13．一种药物或美容组合物，该组合物包含治疗有效量化合物，该化合物包含α,ω-二羧酸一-或二酯，所述酯包含角质层分离活性醇；和药物可接受载体。
14．根据权利要求13的药物或美容组合物，其中所述α,ω-二羧酸选自己二酸、庚二酸、辛二酸、壬二酸、癸二酸、1,11-十一烷二酸、1,12-十二烷二酸、1,13-十三烷二酸和1,14-十四烷二酸。
15．根据权利要求13或14的药物或美容组合物，其中所述α,ω-二羧酸为壬二酸。
16．根据权利要求13或14的药物或美容组合物，其中所述角质层分离醇选自邻-、间-和对-羟基苯甲酸，邻-、间-和对-羟基烷基苯甲酸酯，邻-、间-和对-二羟基苯，邻-、间-和对-羟基甲苯及其衍生物。
17．根据权利要求13或14的药物或美容组合物，其中所述角质层分离醇包含邻-、间-和对-羟基苯甲酸酯的烷基衍生物。
18．根据权利要求13或14的组合物，其中所述化合物包含两个角质层分离活性醇部分。
19．根据权利要求13或14的药物或美容组合物，其中所述治疗有效量所述化合物包含治疗皮肤病有效的量，所述皮肤病包括角化过度、角质层肥大、过多皮脂分泌、微生物感染、皮肤疾病和睾酮转变成二氢睾酮增加。
20．一种治疗皮肤疾病的方法，该方法包括经鼻、口或非肠道向患有所述皮肤疾病的部位局部给用治疗有效量的化合物，该化合物包含治疗有效量的α,ω-二羧酸一-或二酯，其中所述酯的至少一种醇包含角质层分离活性醇。
21．一种治疗皮肤疾病的方法，该方法包括在感染区域局部应用治疗有效量的化合物，该化合物包含治疗有效量的α,ω-二羧酸一-或二酯，其中所述酯的至少一种醇包含角质层分离活性醇。
22．根据权利要求20或21的方法，其中所述皮肤疾病包括角化过度、角质层肥大、过多皮脂分泌、微生物感染、皮肤疾病和睾酮转变成二氢睾酮增加。
23．根据权利要求20或21的方法，其中所述皮肤疾病选自粉刺、皮脂溢性皮肤病、头皮屑、牛皮癣、鳞癣、红斑痤疮、毛过多、多毛症和雄激素性脱发。
24．一种增加α,ω-二羧酸穿透皮肤层的方法，该方法包括向皮肤层应用α,ω-二羧酸一-或二酯衍生物，所述酯部分包含角质层分离活性醇。
25．根据权利要求1或2的化合物，其中当向皮肤靶向位置传递时，所述化合物可以释放大量的皮肤病活性化合物。
26．根据权利要求13至19的组合物，其中当向皮肤靶向位置传递时，所述组合物可以释放大量的皮肤病活性化合物。
27．权利要求1至12任一的化合物用于治疗皮肤疾病。
28．包含α,ω-二羧酸一-或二酯化合物的用途，其中所述二羧酸的酯部分包含角质层分离活性醇，用于制备治疗皮肤疾病的可局部、经口或非肠道给药的药物组合物。
29．根据权利要求28的用途，其中所述皮肤疾病包括角化过度、角质层肥大、过多皮脂分泌、微生物感染、皮肤疾病和睾酮转变成二氢睾酮增加。
30．根据权利要求28的用途，其中所述疾病选自粉刺、皮脂溢性皮肤病、头皮屑、牛皮癣、鳞癣、红斑痤疮、毛过多、多毛症和雄激素性脱发。
31．包含α,ω-二羧酸一-或二酯衍生物的用途，其中所述二羧酸的酯部分包含角质层分离活性醇，用于制备增加α,ω-二羧酸穿透皮肤层的组合物。
32．根据权利要求28至31任一的用途，其中化合物或衍生物为权利要求1至12任一的化合物。
全文摘要
有效治疗皮肤疾病的化合物包含α,ω－二羧酸－或二酯,其中所述酯的醇部分包含角质层分离活性醇。该化合物可具有式(Ⅰ)结构,其中n为6至12;m为0至8;R’选自H、烷基、芳基、链烯基、苄基。OH、NHR”、CONHR”、和COOR”;R”选自H、烷基、芳基、链烯基和苄基;以及Y选自H、烷基、芳基、链烯基、苄基和X。
文档编号A61K31/20GK1237151SQ97199643
公开日1999年12月1日 申请日期1997年11月12日 优先权日1996年11月12日
发明者多夫·塔马尔金 申请人:塔马尔金药物革新有限公司