专利名称：2－{4－[4－(4,5－二氯－2－甲基咪唑－1－基)丁基]－1－哌嗪基}－5－氟嘧啶,其制 ...的制作方法
技术领域：
本发明涉及2-{4-[4-(4，5-二氯-2-甲基咪唑-1-基)丁基]-1-哌嗪基}-5-氟嘧啶，其制备方法及其治疗用途从以及其生理可接受的盐，其制备方法，及其在人类和/或兽类治疗中作为药物的应用，以及含有它们的药物组合物。
本申请人的专利EP382637和EP497659公开了多种具有抗焦虑和/或镇静作用的嘧啶基哌嗪基烷基唑衍生物。虽然专利EP382637要求保护嘧啶的5位被卤原子取代的嘧啶基哌嗪基烷基唑衍生物，但是此类化合物的实例只公开了两例，而且这两种情况都仅涉及溴原子。
本申请人现在发现在嘧啶的5位引入氟原子取代基，特别是其中唑是被一个甲基在2位和被两个氯原子在4和5位三取代的咪唑时，得到了作为本发明主题的化合物，此化合物具有优异的生物性质，使其特别适用于人和/或兽类治疗应用。具体地讲，作为本发明主题的该化合物适用作止吐剂用于抗晕船(运动引起的恶心)，用作抗抑郁剂或抗焦虑剂，作为胃酸分泌或强迫性神经症抑制剂，用于包括人在内的哺乳动物的恐慌发作和睡眠窒息中。
按照本发明，通过下述方法之一能制备化合物2-{4-[4-(4，5-二氯-2-甲基咪唑-1-基)丁基]-1-哌嗪基}-5-氟嘧啶及其生理可接受盐a)8-(5-氟-2-嘧啶基)-8-氮杂-5-氮鎓杂螺[4.5]癸烷与4，5-二氯-2-甲基-1H-咪唑在碳酸钾存在下，在偶极质子惰性溶剂如二甲基甲酰胺中反应。该反应温度可以在70℃至溶剂的回流温度之间变化，且
其中R22、R23或R24各自独立地是如上R1所定义的；和
表示下式的六个杂环之一
IE具有下列结构
合物蒸发至干，并将所得粗品再溶解于氯仿中，用水反复洗涤。将此有机相干燥并蒸发，然后将所得粗品通过硅胶柱色谱纯化。得到3.3g(收率85％)油状2-{4-[4-(4，5-二氯-2-甲基咪唑-1-基)丁基]哌嗪-1-基}-5-氟嘧啶。IR(膜)，cm-12944，1610，1555，1503，1449，1402，1361，1243，786.RMN′-H(CDCl3，300MHz)，δ1,54(m，2H)，1,73(m，2H)，2,34(s，3H)，2,38(m，2H)，2,43(m，4H)，3,74(m，4H)，3,85(m，2H)，8,15(s，2H).
实施例2-制备2-{4-[4-(4，5-二氯-2-甲基咪唑-1-基)丁基]哌嗪-1-基}-5-氟嘧啶将3.5g(0.02mol)5-氟-2-(哌嗪-1-基)嘧啶、6.04g(0.025mol)1-(4-氯丁基)-4，5-二氯-2-甲基-1H-咪唑和4.14g(0.03mol)碳酸钾在200ml二甲基甲酰胺中的混合物维持回流12小时。随后将此混合物蒸发至干，并将所得粗品再溶解于氯仿中，用水反复洗涤。将此有机相干燥并蒸发，然后将所得粗品通过硅胶柱色谱纯化。得到6.4g(收率83％)油状2-{4-[4-(4，5-二氯-2-甲基咪唑-1-基)丁基]哌嗪-1-基}-5-氟嘧啶。IR(膜)，cm-12944，1610，1555，1503，1449，1402，1361，1243，786.RMN′-H(CDCl3，300MHz)，δ1,54(m，2H)，1,73(m，2H)，2,34(s，3H)，2,38(m，2H)，2,43(m，4H)，3,74(m，4H)，3,85(m，2H)，8,15(s，2H).
实施例3-制备2-{4-[4-(4，5-二氯-2-甲基咪唑-1-基)丁基]哌嗪-1-基}-5-氟嘧啶柠檬酸盐将1.1g(5.2mmol)柠檬酸一水合物加入到2g(5.2mol)2-{4-[4-(4，5-二氯-2-甲基咪唑-1-基)丁基]哌嗪-1-基}-5-氟嘧啶的无水乙醇溶液中。一段时间后，沉淀出2.72g(收率91％)2-{4-[4-(4，5-二氯-2-甲基咪唑-1-基)丁基]哌嗪-1-基}-5-氟嘧啶柠檬酸盐固体，M.p.为151-153℃。IR(KBR)，cm-13780-2270(bb)，1707，1616，1482，1429，1375，1244，1214.RMN′-H(DMSO-d6，300 MHz)，δ1,53(m，2H)，1,66(m，2H)，2,33(s，3H)，2,53-2,74(a.c.，10H)，3,75(m，4H)，3,94(t，J＝7，2Hz，2H)，8,46(s，2H).
止吐活性按照Costall等描述的方法(神经药学，1986，25，959-961)研究本发明获得的化合物对白鼬恶心所产生的作用。
将两种性别的白鼬(0.7至1.4kg)单独地放在温度为21±1℃的笼中并正常喂养。在用硫酸铜(CuSO4·5H2O；100mg/kg胃内给药)或顺铂(10mg/kg，由颈部固定插管给药)处理前15分钟，皮下给药本实施例的化合物或载体以便进行预处理。在动物开始呕吐时对动物进行观察，硫酸铜组观察30分钟，顺铂组观察240分钟。呕吐的特征是节律性腹部收缩，还会排出固体或液体物质(呕吐)或不通过口排出物质(恶心)。记录恶心或呕吐的发作次数。
实施例3的化合物能够缓解由硫酸铜引起的恶心，并抑制由顺铂引起的恶心。
a)硫酸铜化合物剂量(mg/kg，皮下给药) 恶心/呕吐的发作次数载体 - 8.2±1.4实施例3 0.001 7.4±1.2(NS)0.01 3.2±0.6(*)0.1 1.0±0.2(*)1 1.7±0.3(*)(*)与对照载体数值相比p＜0.05
b)顺铂化合物剂量(mg/kg，皮下给药)恶心/呕吐的发作次数载体 - 14.2±1.9实施例3 0.001 13.8±2.4(NS)0.01 6.5±3.1(*)0.1 3.1±2.9(*)1 3.0±2.0(*)(*)与对照载体数值相比p＜0.05对鼩鼱进行的晕动病研究按照N.Matsuki等描述的方法(“呕吐机理与控制”，John LibbeyEmotex，1992，233，323-329)研究本实施例3的化合物对鼩鼱进行的晕动病(眩晕)所产生的作用。
重58-72g的雄性鼩鼱3只一组关在笼中，让它们自由获得固体食物和水。试验前1小时，在它们的笼中放猫粮。试验开始时，通过腹膜内给药待测产物对动物进行处理。30分钟后，把它们分别置于试验盒中(15×15×10cm)，此盒与马达连接，使它们以某一频率向前并向后转几圈，以便引起恶心(晕动病)。此频率是1赫兹，位移距离为4cm。将这些动物在此试验盒中放30分钟，以便它们适应环境，然后开始将这些笼子活动20分钟，以便确定是否产生恶心(没有从消化道中排出物质)及呕吐(从消化道中排出物质)症状。
通过腹膜内给药0.01至10mg/kg实施例3的化合物可明显地抑制由运动引起的恶心(晕动病)，缓解恶心和呕吐。化合物 剂量(mg/kg，腹膜内给药) 恶心/呕吐的发作次数载体 - 10.0±1.39实施例3 0.0018.38±1.41(NS)0.01 0.33±0.21(*)0.1 2.17±0.83(*)1.0 0.33±0.21(*)10.0 0±0(*)(*)与对照载体数值相比p＜0.0001抗焦虑和抗抑郁活性抗焦虑和抗抑郁活性由这些新化合物对5HT1A5-羟色胺受体的亲和性(D.A.Glitz，Grugs，1991，41，11)和通过条件逃避反应试验(J.S.New等，J.Med.Chem.，1986，29，1476)证明。
a)与5HT1A5-羟色胺受体的结合使用大鼠海马均浆物，实施改良的S.J.Peroutka的方法(神经化学，1986，47，529)。[3H]-8-OH-DPAT用作放射配体而5-羟色胺用于检测非特异性结合。培养时间是15分钟，温度为37℃。通过玻璃纤维过滤器过滤分离与蛋白结合的放射配体，并通过液体闪烁测定过滤器上保留的放射活性。采用EBNA/LIGAND程序(Munson and Rodbard，分析生物化学，1980，107，220)通过非线性回归分析计算抑制常数(Ki，nM)。
实施例3的化合物的Ki＝19.4nMb)条件逃避反应(C.A.R.)试验在此试验中，用重200g的雄性Wistar大鼠，在它们被放入盒中后，训练它们在Letica穿梭移动盒(参见LI910和LI2700)中在30秒内跳跃障碍。
具有抗焦虑或镇静活性的产物抑制条件逃避反应。
训练第1天，以3分钟的间隔进行11次试验。电击其爪30秒(5mA，0.1s，10s)。第二和第三天只对所选择的鼠进行两次每日试验(第一天的某些级别(除了第一次试验)＞14)。试验的当天选择鼠形成的组。在开始研究前45分钟，口服此产物或载体。
实施例3的化合物 ED50＝9.7mg/kg，口服胃酸分泌抑制活性通过Shay方法(H.Shay等，Gastroenterology，1945，5，43；Visscher等，J.Pharmac.Exp.Ther.，1954，110，188)测定此活性。
此试验中使用重200至250g的雄性Wistar鼠，直至进行试验的那天为止保持这些鼠禁食，但是能自由地得到水。每批至少有4只鼠。
用乙醚麻醉这些鼠，对它们进行剖腹术，将它们的幽门系住，然后切开腹部。在缝合腹部切口前，十二指肠内(i.d.)给药这些产物。第一次试验的给药剂量为40mg/kg，然后确定半数有效剂量(ED50)。使用的载体是阿拉伯胶，在双蒸水中的浓度为5％w/v。
结扎幽门后2小时，通过用乙醚延长麻醉将鼠处死，测量胃液的体积。通过带有自动滴定管的pH检测仪测定总酸度。对于每个产物和每个被测剂量，相对于参考组确定胃酸分泌的抑制百分率。
实施例3的化合物 ED50＝1.9mg/kg，i.d.
在人或兽用药中的日剂量为1mg至500mg产物，可以一次或多次给药。组合物被制成与给药途径相适合的形式例如，片剂、糖衣丸、硬明胶胶囊、栓剂、溶液或混悬剂。这些组合物通过已知方法制备且它们含有1至60％重量活性成分和40至99％的与适当的组合物的物理形式和活性组分相配伍的适宜药用载体。作为实例，以下给出含有本发明产物的三种药剂配方。
片剂配制实施例实施例3的化合物5mg乳糖 60mg纤维素晶体 25mg聚乙烯吡咯烷酮K 90 5mg预凝胶淀粉 3mg胶体二氧化硅 1mg硬脂酸镁 1mg总重量 100mg硬明胶胶囊配制实施例实施例3的化合物10mg聚氧乙烯甘油酯 135mg甘油二十二烷酸酯 5mg赋形剂 150mg注射制剂的配制实施例实施例3的化合物4mg 8mg氯化钠 15mg30mg注射用水适量至 2ml 4ml
权利要求
1.下式的2-{4-[4-(4，5-二氯-2-甲基咪唑-1-基)丁基]-1-哌嗪基}-5-氟嘧啶化合物及其生理可接受的盐
2.权利要求1所述化合物的生理可接受盐，例如2-{4-[4-(4，5-二氯-2-甲基咪唑-1-基)丁基]哌嗪-1-基}-5-氟嘧啶柠檬酸盐。
3.权利要求1或2的化合物的制备方法，其特征在于进行下列操作之一a)8-(5-氟-2-嘧啶基)-8-氮杂-5-氮鎓杂螺[4.5]癸烷与4，5-二氯-2-甲基-1H-咪唑在碳酸钾存在下，在偶极质子惰性溶剂如二甲基甲酰胺中反应；该反应温度可以在70℃至溶剂的回流温度之间变化，且此反应时间为3至48小时，b)5-氟-2-(哌嗪-1-基)嘧啶与1-(4-氯丁基)-4，5-二氯-2-甲基-1H-咪唑在碳酸钾存在下，在偶极质子惰性溶剂如二甲基甲酰胺中反应。该反应温度可以在70℃至溶剂的回流温度之间变化，且此反应时间为3至48小时；该反应还可以在相转移条件下使用氢氧化钠水溶液、甲苯和催化剂如叔丁基溴化铵进行；在这些条件下，反应温度为50至90℃，反应时间为12至72小时，c)2-{4-[4-(4，5-二氯-2-甲基咪唑-1-基)丁基]哌嗪-1-基}-5-氟嘧啶和生理可接受的酸如柠檬酸在适当的溶剂如乙醇中反应。
4.权利要求1、2和3的化合物在制备用于治疗眩晕、晕动病(恶心)、抑郁、焦虑、胃酸分泌、强迫性神经症、恐慌发作和睡眠窒息的药物方面的用途。
5.药物组合物，其特征在于其中除药用载体外还含有权利要求1和2之一所述的2-{4-[4-(4，5-二氯-2-甲基咪唑-1-基)丁基]-1-哌嗪基}-5-氟嘧啶或其生理可接受盐之一。
全文摘要
本发明涉及式(Ⅰ)的化合物2－{4－[4－(4,5－二氯－2－甲基咪唑－1－基)丁基]－1－哌嗪基}－5－氟嘧啶及其生理可接受盐。
文档编号A61P1/08GK1261888SQ98806845
公开日2000年8月2日 申请日期1998年5月28日 优先权日1997年6月2日
发明者R·默克斯－威阿德尔, J·菲里卡拉－科斯坦萨 申请人:埃斯蒂文博士实验室股份有限公司