专利名称：噬菌蛭弧菌的冻干粉制剂及其生产方法
一种噬菌蛭弧菌冻干粉制剂及其生产方法，属于微生物的微生态制剂技术领域，涉及一种噬菌蛭弧菌冻干粉及其制造方法。
噬菌蛭弧菌是治疗人或动物肠道细菌疾病的寄生菌，现已经应用于畜禽兽药、饲料添加剂。但由于噬菌蛭弧菌不生成芽胞，对环境要求苛刻，其存活的环境温度为4-45摄氏度，现在使用的噬菌蛭弧菌的生物制剂是液体生物制剂，即将噬菌蛭弧菌经培养后与宿主菌按一定比例配合，加入灭菌自来水，制成噬菌蛭弧菌的液体制剂。当环境温度高于25摄氏度，液体制剂中的噬菌蛭弧菌的活菌数迅速衰减，其疗效也迅速下降，因此，液体制剂在常温下的保质期只有三、四个月左右，严重影响了该生物制品的推广应用。同时，由于噬菌蛭弧菌属于好氧性细菌，在杀灭致病菌的同时，随机体环境厌氧气氛的建立而消亡，虽然疗效迅速，但保持时间短，影响其最终效果。
本发明的目的是提供一种冻干粉剂型的噬菌蛭弧菌制剂及其生产方法，以延长噬菌蛭弧菌生物制剂在常温下保存的时间，同时增强应用功效。
本发明的噬菌蛭弧菌的冻干粉制剂是一种疏松、多孔、易溶的固态制剂，其成分如下噬菌蛭弧菌(活菌体)，细菌用冻干保护剂，水分(微量)。是用噬菌蛭弧菌菌悬液及保护剂，按常规冻干粉制备比例配制后，经真空冻干而制成。其比例应当使经冻干过程中细菌死亡率低，同时满足冻干后产品的疏松度等物理性能要求。菌悬液的噬菌蛭弧菌的活菌数大于105pfu/ml而小于是1018pfu/ml。
为了提高其治疗功效，可以在制备时加入附助菌株，如粪链球菌等机体原籍菌株。即用噬菌蛭弧菌菌悬液、机体原藉菌菌悬液、保护剂、水，经真空冻干方法制成冻干粉，冻干粉中噬菌蛭弧菌与机体原藉菌菌数比为10∶1-4。
本发明的冻干粉是由如下生产方法完成的1、制备菌悬液，将噬菌蛭弧菌菌种经培养复壮后，制成106-1012pfu/ml的菌悬液；2、制备保护剂，将明胶放入适量的蒸馏水中，加热溶化，再放入庶糖，补足蒸馏水，使明胶的浓度是1-2％，庶糖的浓度是5-10％，调PH值6.0-8.0，高温灭菌，冷却后备用；3、混合，将菌悬液与保护剂按20∶1-10的比例混合后，分装入容器；4、用常规方法预冻、升华、解析，冻干机内的温度在混合液的共融点下，装入分装有混合液的容器，将容器内产品冻实，再通过调压、调温的方法将容器内的水份升华，去除大多数水份，再经解析干燥，去除余下的大多数水分，使含水量达要求值3％以下；5、成品，产品经预冻、升华、解析后，取出容器密封，即得成品。
本生产方法中所使用的保护剂也可以是庶糖和脱脂奶粉，其具体方法是，将奶粉加入适量水加热溶化，再加入庶糖，补足蒸馏水，使庶糖浓度是5-10％，脱脂奶粉的浓度是10-20％，混匀，调PH值6.0-8.0，高温灭菌，冷后备用。
由于在冻干工艺过程中会因细菌死亡而损失近一个数量级的细菌，所以，冻干粉中的菌数是菌悬液中菌数的5-7/10左右。
下面详细说明本发明的冻干粉及其生产方法本发明的噬菌蛭弧菌的冻干粉制剂是一种疏松、多孔、易溶的固态制剂，其成分如下噬菌蛭弧菌(活菌体)，粪链球菌或者双歧杆菌或者乳酸杆菌或者脆弱拟杆菌菌株(活菌体)等机体原藉菌，细菌用冻干保护剂。是用噬菌蛭弧菌菌悬液及一种或多种机体原藉菌菌悬液及保护剂，按适当比例配制后，经真空冻干而制成。噬菌蛭弧菌菌悬液与机体原藉菌菌悬液的比例(体积)是10∶1-4，噬菌蛭弧菌菌悬液中噬菌蛭弧菌的活菌数菌数是109-1012pfu/ml，机体原藉菌菌悬液中的活菌数109-1012个/ml本发明的生产方法如下1、制备菌悬液，将噬菌蛭弧菌菌和粪链球菌菌种经培养复壮后，分别制成109-1010pfu/ml的菌悬液；2、制备保护剂，将明胶放入蒸馏水中(蒸馏水多少以能溶解明胶为宜)加热溶化，再放入庶糖，补足蒸馏水，使明胶浓度是1-2％，庶糖浓度是5-10％，调PH值7.2-7.4，高温灭菌，冷后备用；或者用庶糖和脱脂奶粉作为其保护剂，其具体方法是，将奶粉加入适量水加热溶化，再加入庶糖加入蒸馏水，混匀，庶糖浓度是5-10％，脱脂奶粉的浓度是10-20％，调PH值7.2-7.4，高温灭菌，冷后备用。3、混合，将噬菌蛭弧菌与粪链球菌菌悬液按10∶2的比例、菌悬液与保护剂按3-4∶1(体积)的比例混合后，分装入容器；4、用常规方法预冻、升华、解析，冻干机内的温度在混合液的共融点下，装入分装有混合液的容器，将容器内产品冻实，再通过调压、调温的方法将容器内的水份升华，去除大多数水份，再经解析干燥，去除余下的大多数水分，使含水量达要求值；5、成品，产品经预冻、升华、解析后，取出容器，密封容器，即得成品。
实施例本发明的噬菌蛭弧菌的冻干粉制剂是一种疏松、多孔、易溶的固态制剂，其成分如下噬菌蛭弧菌(活菌体)，粪链球菌或者双歧杆菌或者乳酸杆菌或者脆弱拟杆菌菌株(活菌体)等机体原藉菌，细菌用冻干保护剂。是用噬菌蛭弧菌菌悬液及一种或多种机体原藉菌菌悬液及保护剂、水配制后，经真空冻干而制成。噬菌蛭弧菌菌悬液与机体原藉菌菌悬液的比例(体积)是10∶2，噬菌蛭弧菌菌悬液中噬菌蛭弧菌的活菌数菌数是109pfu/ml，机体原藉菌菌悬液中的活菌数是109个/ml。
本发明的生产方法如下1、制备菌悬液，将噬菌蛭弧菌菌和粪链球菌菌种经培养复壮后，分别制成109pfu/ml和109个/ml的菌悬液；2、制备保护剂，将明胶放入蒸馏水中(蒸馏水多少以能溶解明胶为宜)加热溶化，再放入庶糖，补足蒸馏水，使明胶浓度是1.5％，庶糖浓度是7％，调PH值7.0，高温灭菌，冷后备用；或者用庶糖和脱脂奶粉作为其保护剂，其具体方法是，将奶粉加入适量水加热溶化，再加入庶糖加入蒸馏水，混匀，庶糖浓度是7％，脱脂奶粉的浓度是15％，调PH值7.0，高温灭菌，冷后备用。3、混合，将噬菌蛭弧菌与粪链球菌菌悬液按10∶2的比例、菌悬液与保护剂按3.5∶1(体积)的比例混合后，分装入容器；4、用常规方法预冻、升华、解析，冻干机内的温度在混合液的共融点下，装入分装有混合液的容器，将容器内产品冻实，再通过调压、调温的方法将容器内的水份升华，去除大多数水份，再经解析干燥，去除余下的大多数水分，使含水量达要求值；5、成品，产品经预冻、升华、解析后，取出容器，密封容器，即得成品。
本发明的噬菌蛭弧菌的冻干粉，在常温上能长时间保存，其保质期可达5-6年，冷藏保存，其保质期在8年以上，且本剂型体积小，易于运输。
权利要求
1.一种蛭噬菌蛭弧菌的冻干粉，是用细菌菌悬液配以细菌用保护剂和水，用常规工艺冻干而制成，由其特征是细菌为蛭菌蛭弧菌(活菌体)。
2.根据权利要求1所述的一种蛭菌蛭弧菌的冻干粉，其特征是细菌为噬菌蛭弧菌和机体原藉菌，其菌数比为10∶1-4。
3.根据权利要求2所述的一种噬菌蛭弧菌的冻干粉，其特征是噬菌蛭弧菌和机体原藉菌的菌数比为10∶2-3。
4.根据权利要求2或3所述的一种噬菌蛭弧菌的冻干粉，其特征是机体原藉菌是粪链球菌。
5.权利要求1所述的一种噬菌蛭弧菌的冻干粉的生产方法如下1)制备菌悬液，用噬菌蛭弧菌制成106-1012pfu／ml的菌悬液；2)加入保护剂，将明胶放入适量的蒸馏水中，加热溶化，再放入庶糖，补足蒸馏水，使明胶的浓度是1-2％，庶糖的浓度是5-10％，调PH值6.0-8.0，高温灭菌，冷却后备用；3)、混合，将菌悬液与保护剂按20∶1-10的比例混合后，分装入容器；4)预冻、升华、解析，冻干机内的温度在混合液的共融点下，装入分装有混合液的容器，将容器内产品冻实，再通过调压、调温的方法将容器内的水份升华，去除大多数水份，再经解析干燥，去除余下的大多数水分；5)成品，产品经预冻、升华、解析后，取出容器密封，即得成品。
6.根据权利要求4所述的一种噬菌蛭弧菌的冻干粉的生产方法，其特征是菌悬液是噬菌蛭弧菌菌悬液和机体原藉菌菌悬液，机体原藉菌菌悬液菌数是106-1012个/ml，混合液的菌数比为10∶1-4。
全文摘要
一种噬菌蛭弧菌冻干粉制剂及其生产方法,属于微生物的微生态制剂技术领域,涉及一种噬菌蛭弧菌冻干粉及其制造方法,现用的噬菌蛭弧菌的生物制剂,是液体的生物制剂,液体制剂在常温下的保质期只有三、四个月左右,严重影响了该生物制品的推广应用。本发明的生物制剂是一种经冻干处理的冻干粉,其生产方法可用常规的冻干工艺完成。本发明的噬菌蛭弧菌的冻干粉,在常温上能长时间保存,其保持期可达5—6年,冷藏保存,其保质期在8年以上,且本剂型体积小,易于运输。
文档编号A61K35/66GK1285187SQ99112389
公开日2001年2月28日 申请日期1999年8月19日 优先权日1999年8月19日
发明者徐钢, 阙宁宁 申请人:徐钢