的血液等压的溶质，所述无菌混悬剂可包括悬浮剂和增稠剂。所述制剂可存在于单位剂量或多剂量容器中，例如密封的安瓿，并且可以保存在冻结干燥的(冻干)条件，在立即使用前仅需要加入无菌液体载体，例如注射用水。
[0022]本发明的活性成分任选地可与固体赋形剂相组合，且任选地磨碎所得到的混合物，并且需要时，在加入合适的助剂后，加工颗粒的混合物，以获得所需剂型。合适的赋形剂特别是填充剂例如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨糖醇；纤维素或淀粉制剂、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。需要时，可以加入崩解剂，例如交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或海藻酸或其盐例如海藻酸钠。
[0023]本发明的活性成分的有效量可为提高受试者中δ阿片受体的转录和/或表达水平的的任何量，其可以是相当于约0.1-1Smg寡肽Asqffglm-NH2,优选0.01-20mg寡肽Asqffglm-Nh2的剂量单位。更优选地，剂量单位包括约1-4mg的寡肽asqffglm-nh2。最优选地，剂量单位包括约2-3mg的寡肽Asqffglm-NH2。有效量的测定在本领域技术人员的能力内，特别是根据本文提供的公开内容的启示下。
[0024]根据本发明，本发明的药学产品(药物、药剂)或药物组合物可以以任意有效剂量数施用给药受试者。优选地，本发明的药学产品(药物、药剂)或药物组合物可以以多次剂量给药，例如从约2至约15次剂量，更优选从约4-10次剂量，最优选约6次剂量。在特别优选的实施方案，在给药过程中，以每三周给药约一次的频率将本发明的药学产品(药物、药剂)或药物组合物给药至受试者，例如注射、输注或口服。在特别优选的实施方案，给药为通过注射。
[0025]应当理解本发明的药学产品(药物、药剂)或药物组合物可以按用于通过任意适宜的途径给药的任意适宜的方式配制。
[0026]本发明的药学产品(药物、药剂)或药物组合物的剂量单位是基于常规进行给药受试者。例如，剂量单位可以给药多于每日一次、每周一次、每月一次等。剂量单位可以是以两次/周为基础给药，即每周两次，例如每三天一次。
[0027]如本文所使用的，“包含”与“包括”、“含有”或“特征在于”同义，并且是包括在内的或开放性的，并且不排除另外的未陈述的元件或方法步骤。术语“包含”在本文中的任何表述，特别是在描述本发明的方法、用途或产品时，应理解为包括基本上由所述组分或元件或步骤组成和由所述组分或元件或步骤组成的那些产品、方法和用途。本文示例性描述的本发明适当地可以在不存在本文未具体公开的任何一种或多种元件、一种或多种限制的情况下进行实践。
[0028]本发明的药学产品中所包含的涉及该药学产品的说明书可以含有如下内容:适应症(例如疼痛)、施用剂量(例如上述所示例性说明的)以及可能产生的副作用等等。
[0029]本文已采用的术语和表述用作描述性而不是限制性术语，并且在此种术语和表述的使用中不预期排除所示和所述特征或其部分的任何等价物，但应认识到各种修饰在请求保护的本发明的范围内是可能的。因此，应当理解尽管本发明已通过优选实施方案和任选特征具体公开，但本领域技术人员可以采用本文公开的概念的修饰和变化，并且此类修饰和变化被视为在如由附加权利要求定义的本发明的范围内。
[0030]为更清楚地说明本发明，现结合如下实施例进行详细说明，但这些实施例仅仅是对本发明的示例性描述，并不能解释为对本申请的限制。
[0031]实施例
[0032]材料和方法
[0033]动物
[0034]雄性和雌性的ICR小鼠(20±1.0g)由杭州师范大学动物中心(中国杭州)随机提供。所有动物实验程序由浙江理工大学动物饲养和使用委员会批准，并且符合1986年11月24号欧共体委员会指令(86/609/EEC)。所有的动物饲养在12小时光/暗周期的23 °C -25 °C环境中，并且在实验开展前提供标准的食物和水。所有实验过程中尽可能减少小鼠所受到的伤害和痛苦。
[0035]多肽
[0036]Fiuo-寡肽Asqffglm-NH2和寡肽asqffglm-nh2多肽由中肽公司(中国杭州)使用固相多肽合成法合成，并且使用高效液相(HPLC)纯化，其纯度达到98%。FAM是羧基荧光基团，利用标准耦合技术将5-羧基荧光素耦合到寡肽ASQFFGLM-NH2肽的氨基酸基团上。寡肽Asqffglm-NH2溶解在生理盐水中，工作液浓度是1.5禮。荧光素标记的(fam)寡肽Asqffglm-Nh2溶解在50%dms0 (二甲基亚砜)中，储存液的浓度是15禮。在实验之前用生理盐水将其稀释到1.5mM的工作浓度。
[0037]侧脑室注射和组织制备
[0038]侧脑室注射按照Haley和McCormick描述的在清醒小鼠中的操作方法进行操作。每只小鼠注射的寡肽AsqFFGLM-NH2或f Iuo-寡肽Asqffglm-NH2的最终剂量是6nmol，注射体积是4 μ I。
[0039]我们前期的研究结果显示侧脑室注射寡肽Asqffglm-NH2后，在20min内具有明显的镇痛效果，因此本实验的时间点选择为5、10和20min三个时间点。在注射FAM-寡肽ASQFFGLM-NH2或者寡肽ASQFFGLM_NH2 (每只小鼠6nmol)后，在相应的时间点，断颈处死小鼠，注射位点的准确性由显微测量所验证。在对照组中，向小鼠侧脑室注射4μ I生理盐水。然后，将注射寡肽Asqffglm-NH2或者生理盐水的小鼠脑迅速取出，保存在-so°c冰箱中以供进一步实验。迅速将注射FAM-寡肽Asqffglm-NH2的小鼠脑取出，固定在含有4%多聚甲醒(Sigma)的0.1M的pH7.4的磷酸盐缓冲液中24h,在冰冻切片(JUNG Tissue freezingmedium, LEICA, Germany)之前用30%鹿糖溶液脱水。
[0040]冠状切片和显微镜观察
[0041]每只小鼠脑冷冻在-20°C，切片厚度为ΙΟμπι。然后脑组织切片被保存在玻片上。切片保存在4°C，12h内完成显微观察和拍照。样品用相差和荧光显微镜观察(NIKONTE2000-U)。根据成年小鼠脑结构图集鉴定解剖结构。
[0042]反转录和实时定量PCR
[0043]根据商品使用说明书，使用TRIzol试剂(Invitrogen, Carlsbad, CA)从每个冰冻的脑组织中提取总RNA。简而言之，用研钵将脑组织磨碎，然后根据每10mg加入ImlTRIzol的剂量加入TRIzol。在所有实验中，用逆转录试剂盒(Gibco BRL)将5 μ g总RNA逆转录成cDNA，最终体积为50 μ I。
[0044]引物序列如下，这与我们之前发表的工作中的引物序列相同[7]:
[0045]NKl 受体(F):5，-TGGACTCTGATCTCTTCCCCAACA-3，
[0046]NKl 受体(R):5，-GGACCCAGATGACAAAGATGACCACTT-3，
[0047]PPT-C (F): 5 ’ -CGGGCCATCAGTGTGCACTA-3 ’
[0048]PPT-C (R): 5，-GGAATCCCCGTCCCCAGCAT-3，
[0049]PPT-A (F): 5，-GAAATCGATGCCAACGATGATC-3 ’
[0050]PPT-A (R): 5，-AGGCTTGGGTCTTCGGGCGATTCT-3 ’
[0051 ] MOR (F): 5 ’ -ATCCTCTCTTCTGCCATTGGT-3 ’
[0052]MOR (R): 5 ’ -TGAAGGCGAAGATGAAGACA-3 ’
[0053]POMC (F): 5，-AGATTCAAGAGGGAGCTGGA-3 ’
[0054]POMC (R): 5 ’ -CTTCTCGGAGGTCATGAAGC-3 ’
[0055]KOR (F): 5 ’ -CCGATACACGAAGATGAAGAC-3 ’
[0056]KOR (R): 5，-GTGCCTCCAAGGACTATCGC-3，
[0057]PDYN (F): 5 ’ -CGGAACTCCTCTTGGGGTAT-3 ’
[0058]PDYN (R): 5，-TTTGGCAACGGAAAAGAATC-3 ’
[0059]DOR (F): 5，-AAGTACTTGGCGCTCTGGAA-3 ’
[0060]DOR (R): 5，-GCTCGTCATGTTTGGCATC-3，
[0061]PENK (F): 5 ’ -AACAGGATGAGAGCCACTTGC-3 ’
[0062]PENK (R): 5，-CTTCATCGGAGGGCAGAGACT-3 ’
[0063]GAPDH (F): 5，-AGG