一种抗菌止痒消炎消肿去疤痕的短肽的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物技术医药领域，本发明更具体涉及了一种抗菌止痒消炎消肿去疤 痕的短肽及其应用。
【背景技术】
[0002] 各类皮肤红肿、发炎、瘙痒是常见多发性的皮肤病，严重影响人们的健康，通常分 为神经性皮炎、接触性皮炎、急慢性湿瘆、虫咬性皮炎及瘙痒性皮肤病等。目前市场上有各 种膏体药物治疗皮肤病，但这些膏类药物有的疗效不佳有的有副作用而不能治愈皮肤病， 有的虽然能够治愈皮肤病，但却会让患者落下疤痕，主要原因是这些药物大都是无机化合 物，化学合成所得的产品。而用生物活性肽一一来自于蛋白质的片段的氨基酸序列所形成 的短肽，做为皮肤抗菌止痒消炎消肿去疤痕的药物，迄今尚未见文献报道。因此，研制抗菌 止痒消炎消肿去疤痕的生物活性短肽及其应用具有十分重要的意义与价值。
【发明内容】
[0003] 本发明目的是针对上述问题，提供一种抗菌止痒消炎消肿去疤痕的短肽及其应 用。
[0004] 本发明所述的一种抗菌止痒消炎消肿去疤痕的短肽， 〈1>组成短肽的氨基酸序列如下所示： Tyr-Leu-Tyr-Glu-Val-Ala-Arg 或者 Tyr/T-Leu-Tyr-Glu-Val-Ala-Arg 或者 Leu-Tyr-Glu-Val 或者 Tyr-Glu-Val-Ala-Arg ； 〈2>所述短肽的核苷酸序列是指短肽的每个氨基酸序列所对应的3个密码子构成的基 因序列。
[0005] 本发明所述的抗菌止痒消炎消肿去疤痕的短肽的制备方法及其应用，短肽片段的 氨基酸序列具有与所述短肽氨基酸序列多70%的相同性，或多90%的相似性，所述片段为把 所述的6个或7个氨基酸的序列从任意位置截取成3个或4个或5个或6个氨基酸组成的 与所述短肽具有同样生物活性的短肽。
[0006] 本发明所述的抗菌止痒消炎消肿去疤痕的短肽的制备方法及其应用，其短肽氨基 酸序列所对应的核苷酸的制备方法及其应用，短肽的核苷酸片段的碱基序列具有与所述短 肽的碱基序列多70%的相同性，多90%的相似性，所述片段为把所述的6个或7个氨基酸的 对应的核苷酸序列从任意位置截取成3个或4个或5个或6个氨基酸对应的碱基序列所组 成的与所述短肽的核苷酸序列具有同样生物活性的短肽。
[0007] 本发明所述的抗菌止痒消炎消肿去疤痕的短肽的制备方法及其应用，其短肽类似 物，所述短肽类似物具有与所述短肽相同的生物活性，所述类似物是指在用所述短肽和另 一种化合物融合或者用所述短肽的氨基酸序列融合另外的多肽或者蛋白质而形成具有生 物活性的多肽序列或蛋白质。
[0008] 本发明所述的抗菌止痒消炎消肿去疤痕的短肽的制备方法及其应用，其短肽衍生 物，所述短肽衍生物的氨基酸序列具有与所述短肽氨基酸序列多70%的相同性，多90%的相 似性，所述衍生物是指把所述短肽的氨基酸的序列中的氨基酸的一个或者几个氨基酸的某 个基团用另外的基团取代后与所述短肽具有同样生物活性的短肽。
[0009] 本发明所述的抗菌止痒消炎消肿去疤痕的短肽的制备方法及其应用，其短肽变 体，所述短肽变体的氨基酸序列具有与所述短肽氨基酸序列多70%的相同性，多90%的相似 性，所述变体是指一种具有一个或几个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的核苷 酸序列，所述改变包括在氨基酸序列或核苷酸序列中，在序列中间的任一位置缺失、插入或 替换氨基酸或核苷酸，或在序列两端添加氨基酸或核苷酸。
[0010] 本发明所述的抗菌止痒消炎消肿去疤痕的短肽的制备方法及其应用，所述的短肽 采用化学合成方法制备。
[0011] 本发明所述的抗菌止痒消炎消肿去疤痕的短肽的制备方法及其应用，所述核苷酸 采用人工合成方法制备。
[0012] 本发明所述的抗菌止痒消炎消肿去疤痕的短肽的制备方法及其应用，所述短肽、 核苷酸、短肽片段、短肽类似物、短肽衍生物和短肽变体用于制备具有抗菌止痒消炎消肿的 各类皮肤消毒或治疗皮肤病的药物。其对皮肤病恢复过程中，对皮肤细胞具有修复作用，从 而使得皮肤不留疤痕，其适用于神经性皮炎、接触性皮炎、急慢性湿瘆、虫咬性皮炎及瘙痒 性皮肤病的局部治疗。
[0013] 所述的皮肤病为接触性皮炎、急慢性湿瘆或虫咬性皮炎症。
[0014] 所述的菌为金黄色葡萄球菌。
[0015] 本发明的显著优点是：本发明的短肽来自于运用生物信息学的方法把国际蛋白质 数据库的蛋白进行序列比对，筛选出来的一种新型的具有活性功能的生物活性肽，运用本 发明的短肽对皮肤病的治疗拥有卓越的显著功效，最大的优点是治愈后皮肤不留疤痕。
【附图说明】
[0016] 图1是本发明涉及的短肽杀菌效果实验图。其中（a)实验组24小时培养的结果， 无金黄色葡萄球菌长出来；（b)对照组在24小时后长出金黄色葡萄球菌；（c)实验组48小 时培养的结果，无金黄色葡萄球菌长出来；（d)对照组在48小时后长出的金黄色葡萄球菌 的数量增多，颗粒明显变大。
[0017] 图2是患者被蚊子叮咬后，使用本发明的皮肤抗菌止痒消炎消肿去疤痕的短肽喷 剂，使用前后对比效果图。其中（a)临床患者的胳膊，被蚊子叮后，出现红肿与瘙痒；（b)喷 涂本发明的短肽喷剂，患者立刻感到不痒了；（c)喷涂本发明的短肽喷剂10分钟后，红肿完 全消失，痊愈。
[0018] 图3是本发明涉及的短肽衍生物杀菌效果实验图。其中（a)实验组24小时培养 的结果，金黄色葡萄球菌的数量明显少于对照组；（b)对照组在24小时后长出金黄色葡萄 球菌； 图4是本发明涉及的短肽截取的短肽片段杀菌效果实验图。其中（a)实验组48小时 培养的结果，金黄色葡萄球菌的数量明显少于对照组；（b)对照组在48小时后长出金黄色 葡萄球菌。
【具体实施方式】
[0019] 短肽的制备方法采用化学合成的方法，即本领域熟知的已经非常成熟的固相肽合 成方法，既可以采用Boc方法也可以采用Fmoc方法。具体做法就是将被保护的氨基酸逐个 偶联到惰性固相载体上去，然后利用强酸将肽链从载体上裂解下来，同时去除侧链保护。
[0020] 短肽的氨基酸序列，Tyr-Leu-Tyr-Glu-Val-Ala-Arg为主要序列，从任意位置截 取成3个或4个或5个或6个氨基酸组成的与所述短肽具有同样生物活性的短肽片段，短 肽类似物，短肽衍生物，短肽变体等都具有本发明所述的功效作用。
[0021] 核苷酸采用人工合成方法制备；编码短肽的核苷酸包含下组中的一种： (a) 编码具有所述氨基酸序列的短肽或其片段、类似物、衍生物或其变体的核苷酸； (b) 与（a)所述核苷酸互补的核苷酸； (c) 与（a)或（b)中所述核苷酸有彡75%相同性的核苷酸； 该核苷酸基本由编码具有〈1>所述的氨基酸序列短肽的核苷酸组成，本发明的核苷酸 序列，其形式为DNA形式包括cDNA或人工合成的DNA。DNA可以是单链的也可以是双链的。 编码短肽的编码区序列可以和〈2>中的核苷酸相同，也可以不同，称为变异体，其中变异体 是指具有编码权利要求1中的氨基酸序列的编码，但可以和〈2>中的核苷酸不同。变异体 可以是一个或几个核苷酸取代、插入、缺失的核苷酸序列，但不会改变编码〈1>中氨基酸序 列的短肽的活性功能。
[0022] 该短肽或核苷酸的"变体"是指一种具有一个或几个氨基酸或核苷酸改变的氨基 酸序列或编码它的核苷酸序列。改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的 缺失、插入、添加或替换。变体可具有"保守性"改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相 类似的结构或化学性质，也可以有"非保守性"改变，其中替换的氨基酸不具有与原氨基酸 相类似的结构或化学性质。"缺失"是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或几个氨基酸 或核苷酸的缺失；"插入"是指在氨基酸序列或核苷酸序列的中间任意位置插入一个或几个 氨基酸；"添加"是指在氨基酸序列或核苷酸序列的N端或C端添加一个或几个氨基酸；"替 换"是指用不同的氨基酸或核苷酸替换一个或几个氨基酸或核苷酸。
[0023] 该短肽、核苷酸、短肽片段、短肽类似物、短肽衍生物和短肽变体用于制备抗菌止 痒消炎消肿包括但不限于下述疾病的药物的用途： 1.神经性皮炎：慢性单纯性苔藓，包括局限性神经性皮炎和弥漫性神经性皮炎。
[0024] 2.接触性皮炎：包括变态反应性接触性皮炎和刺激性接触性皮炎以及速发型接 触性反应、光毒性及光变态反应性接触性皮炎等。
[0025] 3.急慢性湿瘆：包括急性湿瘆、亚急性湿瘆和慢性湿瘆。
[0026] 4.虫咬性皮炎：包括蚊虫叮咬后引起的皮炎。
[0027] 5.瘙痒性皮肤病：包括普通型和过敏性皮肤瘙痒症。
[0028] 6.外阴瘙痒症：包括肛门、阴唇和阴囊瘙痒症。
[0029] 在计算短肽片段、短肽衍生物和短肽变体的氨基酸主序列具有与短肽氨基酸主序 列的相同性和相似性时，"相同性百分率"是指两种或多种氨基酸或核酸序列比较中序列相 同的百分率。根据 Cluster 法（Higging D.G. & Sharp P.M·，Gene 1988，73:234-237 )通 过检查所有配对之间的距离将各组序列排列成簇，然后将各簇以成对或成组分配。两个氨 基酸序列如序列A和序列B之间的相同性百分率通过下式计算：
【主权项】
1. 一种抗菌止痒消炎消肿去疤痕的短肽的应用，其特征在于：所述短肽用于制备具有 抗菌止痒消炎消肿的皮肤消毒药物或用于制备治疗皮肤病的药物，所述短肽的氨基酸序列 如下所示： Tyr-Leu-Tyr-Glu-Val-Ala-Arg或者TyiTT-Leu-Tyr-Glu-Val-Ala-Arg或者 Leu-Tyr-Glu-Val或者 Tyr-Glu-Val-Ala-Arg0
2. 根据权利要求1所述的抗菌止痒消炎消肿去疤痕的短肽的应用，其特征在于：所述 的皮肤病为接触性皮炎、急慢性湿疹或虫咬性皮炎症。
3. 根据权利要求1所述的抗菌止痒消炎消肿去疤痕的短肽的应用，其特征在于：所述 的菌为金黄色葡萄球菌。
【专利摘要】本发明提供一种抗菌止痒消炎消肿去疤痕的短肽的应用。该短肽的短肽片段、类似物、衍生物、变体的氨基酸主序列具有与该短肽氨基酸主序列≥70%的相同性，≥90%的相似性；短肽、核苷酸、短肽片段、短肽类似物、短肽衍生物和短肽变体用于制备具有抗菌止痒消炎消肿的各类皮肤消毒或治疗皮肤病的药物，制备神经性皮炎、接触性皮炎、慢性湿疹、虫咬性皮炎及瘙痒性皮肤病的局部治疗的药物应用。本发明涉及的短肽分子结构明确，生产技术成熟，成品无毒无害无副作用，显著特点是治愈后不落疤痕，是一种优异的外用皮肤消炎消肿止痒消毒剂或皮肤病药物。
【IPC分类】A61P29-00, A61P17-00, C07K5-103, A61P31-04, A61K38-07, C07K7-06, A61K38-08, A61P17-04, A61P17-02
【公开号】CN104840940
【申请号】CN201510289839
【发明人】李 昊
【申请人】李 昊
【公开日】2015年8月19日
【申请日】2013年8月10日
【公告号】CN103467569A, CN103467569B