降低尿蛋白的药物及保健品的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及中医药领域，具体而言，涉及一种降低尿蛋白的药物及保健品。
【背景技术】
[0002] 糖尿病（diabetesmellitus，DM)是一种以胰岛素的分泌相对或绝对缺乏及胰 岛生物效应损伤导致的全球性慢性代谢性疾病，其临床的典型特征是高血糖及其引发的各 类慢性并发症，包括心脑血管疾病、糖尿病肾病（diabeticnephropathy，DN)、糖尿病眼病 (白内障、视网膜病变等）、糖尿病足等。其中，糖尿病肾病作为糖尿病最为严重和最为常见 的慢性微血管并发症之一，是导致终末期肾功能衰竭（end-stagerenalfailure，ESRF)的 主要原因。近年来，由于人们生活方式和饮食习惯的改变，国内DM与DN的发病率正在以惊 人的速度迅速飙升。根据国际糖尿病组织报告，中国现已成为世界第二糖尿病大国，预计至 2030年，全球的DM患者也将会超过5. 52亿。
[0003] DN发病早期其症状并非十分明显，临床中以蛋白尿的产生作为诊断指标，伴随渐 进性肾功能损害、高血压、高血脂、水肿等症状，并认为蛋白尿的严重程度与肾脏损伤成正 比。事实上，早在DN发病前期，尿微量白蛋白（Urinarymicroalbumin，UALB)就已经发 生，并伴随糖尿病肾病的整个进程，而病程一旦进入到大量蛋白尿时期，此时肾脏的病理 损伤已经很难逆转，终将发展为终末期肾脏病。DN的临床病理特征主要表现有：肾小球 细胞外基质（Extracellularmatrix，ECM)堆积，肾小球基底膜（Glomerularbasement membrane，GBM)增厚，系膜细胞扩张，肾小管及小管间纤维化，足细胞消失等。
[0004] 目前DN的发病机制错综复杂且尚未完全阐明，通常认为是多种机制协同产生 作用，如：糖基化终末产物（Advancedglycationendproducts，AGEs)生成，氧化应激 (Oxidativestress，OS)，炎性反应等多种机制。最近越来越多的研宄者将研宄目标转向 OS致病机制，认为活性氧自由基（Reactiveoxygenspecies，R0S)的产生对DN的发生起 到关键作用。在持续性的高血糖状态下，ROS的积累导致脂代谢紊乱，而血脂异常又加速了 DN的进展，这就形成一个恶性循环。因此，开发一种能够同时降低血糖和尿蛋白，且具有抵 抗ROS能力的药物，对延缓DN的发生发展具深远意义。
[0005] 既往针对DN的治疗，早期多采取控制血糖、血压和血脂，减少蛋白质摄入等手段 延缓病情迅速恶化，此期间主要依靠血管紧张素转化酶抑制剂（Angiotensionconverting enzymeinhibitors，ACEI)和血管紧张素受体诘抗剂（Angiotensionreceptorblockers， ARBs)类药物进行控制。当病情进入肾脏衰竭时期，只能依靠血液透析或腹膜透析，而患者 5年内的存活率仅为43 %。肾脏移植被公认为是最为有效的方法，但是由于器官来源及高 昂的手术费用等问题，此过程势必会给患者的家庭和整个社会带来沉重的负担。
[0006] 而且，目前，降尿蛋白的药物多为西药或中药复方药物。西药作用强而迅速，但病 人常因为药物毒副作用而被迫停药，停药又致症状反跳。而中药复方药基本上都是由天然 中草药经简单的炮制和提取制成的，不仅成分相当复杂、制备不便；而且药效不清，难以深 入研宄药物的有效成分，不利于药物质量控制和中药现代化。因此，急需开发一种能有效降 低尿蛋白且有效成分相对明确的单方中药制剂。
【发明内容】
[0007] 本发明的主要目的在于提供一种能有效降低尿蛋白且有效成分相对明确的单方 中药制剂，以提供一种有效成分相对明确，利于质量控制的降尿蛋白的药物及保健品。
[0008] 为了实现上述目的，根据本发明的一个方面，提供了一种降低尿蛋白的药物，该药 物由有效量的芡实醇提物和辅料组成。
[0009] 进一步地，芡实醇提物中含有酚类和三萜类物质，且酚类和三萜类物质的质量之 和占芡实醇提物总质量的比例大于50 %，优选大于60 %。
[0010] 进一步地，酚类物质包含没食子酸、没食子酸乙酯、表儿茶素没食子酸酯、 5, 7, 3'，4'，5' -五羟基二氢黄酮以及5, 7, 4' -三羟基二氢黄酮；三萜类物质包括异落叶 松树酯醇-9-0-0 -D-吡喃葡萄糖苷；优选地，芡实醇提物中的酚类和三萜类物质的质量比 为 1 :1 ~2 :1〇
[0011] 进一步地，辅料为载体、赋形剂或佐剂。
[0012] 进一步地，药物的给药途径为口服给药；优选地，药物的剂型为片剂、胶囊剂、丸 剂、粉末剂、栓剂、溶液剂或悬浮剂。
[0013] 进一步地，芡实醇提物的制备方法包括：用乙醇对芡实果仁粉进行醇提，得到醇粗 提物；用大孔树脂对醇粗提物进行纯化，并用体积含量为20 %~80 %的乙醇进行洗脱，得 到芡实醇提物；其中，大孔树脂选自AB-8、D101、DM-301或HPD-100中的任意一种。
[0014] 进一步地，以SD大鼠体重计，芡实醇提物的有效剂量为75~600mg/kg。
[0015] 根据本发明的另一方面，提供了一种保健品，该保健品包含有效量的芡实醇提物。
[0016] 进一步地，保健品的剂型为片剂、胶囊剂、丸剂、粉末剂、栓剂、溶液剂或悬浮剂。
[0017] 进一步地，芡实醇提物中含有酚类和三萜类物质，且酚类和三萜类物质的质量之 和占芡实醇提物的总质量的比例大于50 %，优选大于60 %。
[0018] 进一步地，酚类物质包含没食子酸、没食子酸乙酯、表儿茶素没食子酸酯、 5, 7, 3'，4'，5' -五羟基二氢黄酮以及5, 7, 4' -三羟基二氢黄酮；三萜类物质包括异落叶 松树酯醇-9-0-0 -D-吡喃葡萄糖苷；优选地，芡实醇提物中，酚类和三萜类物质的质量比 为 1 :1 ~2 :1〇
[0019] 应用本发明的技术方案，提供了一种降低尿蛋白的药物及保健品。该药物由有效 量的芡实醇提物及辅料组成，能够显著降低尿蛋白和尿微量白蛋白，可用于治疗各种具有 尿蛋白和尿微量白蛋白升高症状的包含糖尿病肾病在内的肾病。
【附图说明】
[0020] 构成本申请的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示 意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。在附图中：
[0021] 图1示出了芡实各提取物的总还原能力的测定结果；
[0022] 图2示出了芡实各提取物对DPPH清除能力的结果；
[0023] 图3示出了芡实各提取物对超氧阴离子清除能力的测定结果；
[0024] 图4示出了芡实各提取物对羟基自由基清除能力的测定结果；
[0025] 图5A示出了雌性KM小鼠灌胃芡实醇提物后14天内的体重变化情况；其中，图5A 表示雌性KM小鼠；
[0026] 图5B示出了雄性KM小鼠灌胃芡实醇提物后14天内的体重变化情况；
[0027] 图5C示出了雌性KM小鼠灌胃芡实醇提物后14天内的进食量变化情况；
[0028] 图示出了雄性KM小鼠灌胃芡实醇提物后14天内的进食量变化情况；
[0029] 图6示出了灌胃12周后各组SD大鼠的肾系数；
[0030] 图7示出了灌胃12周后各组SD大鼠的尿蛋白水平变化；
[0031] 图8示出了灌胃12周后各组SD大鼠的微量白蛋白水平变化；
[0032] 图9A示出了灌胃12周后各组SD大鼠的血糖水平变化；
[0033] 图9B示出了灌胃12周后各组SD大鼠的血清肌酐水平变化；
[0034] 图9C示出了灌胃12周后各组SD大鼠的血清尿素氮水平变化；
[0035] 图9D示出了灌胃12周后各组SD大鼠的甘油三酯水平变化；
[0036] 图9E示出了灌胃12周后各组SD大鼠的总胆固醇水平变化；
[0037] 图10示出了灌胃12周后各组SD大鼠的肾脏病理切片图；
[0038] 图11示出了本发明的一种优选的实施例中芡实醇提物经UPLC-MS分析得到的总 离子流图；
[0039] 图12A至图12D示出了本发明的芡实提取物与现有技术的芡实合剂在抗氧化能力 方面的差异；其中，
[0040] 图12A示出了本发明的芡实各提取物与现有技术的芡实合剂的总还原能力的测 定结果；
[0041] 图12B示出了本发明的芡实各提取物与现有技术的芡实合剂对DPPH清除能力的 结果；
[0042] 图12C示出了本发明的芡实各提取物与现有技术的芡实合剂对超氧阴离子清除 能力的测定结果；以及
[0043] 图12D示出了本发明的芡实各提取物与现有技术的芡实合剂对羟基自由基清除 能力的测定结果。
【具体实施方式】
[0044] 需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相 互组合。下面将结合实验数据来详细说明本发明。
[0045] 名称简称说明：
[0046] Scr(Serumcreatinine)血清肌酐；BUN(Bloodureanitrogen)血清尿素氮； TC(Totalcholesterol)总胆固醇；TG(Triglyceride)，甘油三醋；BG(Bloodglucose)，血 糖。
[0047] 如【背景技术】部分所提到的，现有技术中治疗糖尿病肾病的药物类型为西药或中 药复方药，西药往往伴随着毒副作用，而中药复方药由于成分复杂，药效不清，难以实现有 效成分的控制。为改善上述状况，本发明首先通过分光光度计法体外筛选突实（Euryale ferox)各部位对DPPH、02'OIT的清除能力及其总还原能力，实验证明突实醇提物浓度在 0. 6、0. 8、1.0mg/ml时能显示出一定的还原能力，且对各种有害自由基的均显示出相当的清 除能力，其中对DPPH自由基的清除功能最为显著，由此说明，芡实醇提物具有较强的抗氧 化能力。芡实水提物上清只在较高浓度时展现出较为微弱的还原能力和清除自由基功能， 而水提物沉淀并不具有抗氧化的能力。
[0048] 在上述筛选结果的基础上，利用链脲佐菌素（STZ)诱导的糖尿病肾病大鼠模型检 测芡实醇提物的降尿蛋白作用。模型大鼠均出现预期病理症状，给予厄贝沙坦阳性对照药 和不同剂量的芡实醇提物后，发现中、高剂量芡实醇